【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于水产饲料领域，涉及一种褐藻多酚提取技术，具体涉及一种应用在对虾饲料的褐藻多酚及其含有褐藻多酚的对虾饲料。
技术介绍
1、凡纳滨对虾(litopenaeus vannamei)是国际普遍认可的优良养殖物种，其具有生长快、抗病力强、虾体含肉量高等特点，作为营养均衡、味道鲜美的食源性高蛋白佳品而深受人们喜爱。
2、随着消费需求的增加，凡纳滨对虾养殖业得到快速发展，但集约化、高密度的养殖模式伴随而来的是水质污染、氧化应激、疾病爆发等一系列问题，严重影响水产动物成活率、抗氧化能力、免疫力和抗应激能力，导致凡纳滨对虾生长性能以及健康水平的下降，进而造成凡纳滨对虾产业巨大的经济损失。作为预防和治疗措施，一些渔业兽药和抗生素已在水产养殖中用作饲料、注射剂的添加剂。虽然传统的抗生素防治方式在一定程度上较好地控制了疾病的发生，但长期使用也带来了诸多负面的影响，如细菌耐药性的产生、机体内抗生素的积累，动物肠道微生物平衡被破坏，破坏养殖环境生态平衡等，进而影响水产食品安全。因此，为了水产养殖业的可持续发展，开发具有成本效益和生物安全的可持续和可再生的天然活性物质添加剂是十分必要的。
3、马尾藻的天然产物褐藻多酚，又被称为褐藻单宁，是从褐藻中提取的一类酚类化合物且只存在于褐藻中，其具有多种药理学活性，使其成为一种良好的天然活性物质添加剂选择。在过去的几十年里，海藻多酚已成为具有一系列生物功能特性的、有吸引力的、可持续的抗氧化剂来源，来自不同褐藻的一系列酚类化合物的生物学特性已被广泛研究。研究发现从马尾藻中提取的多酚具
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供了一种褐藻多酚的提取技术和将褐藻多酚应用在对虾饲料中作为饲料添加剂，通过对马尾藻进行超声辅助乙醇浸提获得褐藻多酚。
2、为了实现上述目的，本专利技术的技术方案为：提供一种褐藻多酚的制备方法，包括以下步骤：
3、步骤s1收集的新鲜马尾藻用淡水冲去表面附生植物，空气动力烘箱中37±2℃阴干，在高速粉碎机中进行破碎，并使用60目筛网过筛，得到的马尾藻粉末备用；
4、步骤s2马尾藻粉末中加入50％乙醇水溶液，然后移入超声仪破碎仪中进行超声破碎；
5、步骤s3将超声破碎后的液体移入1000ml锥形瓶中，加入磁力搅拌子，用锡纸封瓶口，置于磁力搅拌器上搅拌10分钟后，将锥形瓶放置于已经预热的恒温水浴锅中进行浸提；
6、步骤s4将滤液转入旋转蒸发仪中，循环水真空泵减至负压，旋蒸至膏状(乙醇水溶液与溶质大部分分离)；
7、步骤s5收集膏状乙醇提取物，使用1:1的氯仿分析纯溶液萃取2次，最后使用1:1的乙酸乙酯萃取6次；萃取后的乙酸乙酯溶液在冷旋转蒸发仪上旋蒸至颗粒状(乙酸乙酯与溶质完全分离)，得到马尾藻粗多酚，用纯水复溶回收得到的粗多酚；
8、步骤s6最后用冷冻干燥机将其冻干，得到褐藻多酚粉末。
9、进一步地，步骤s2中，马尾藻粉末中加入50％乙醇水溶液直至料液质量比为1:40。
10、进一步地，步骤s2中，超声仪破碎仪设置参数为25khz，25℃，32min，每6秒间隔3秒。
11、进一步地，步骤s3中，第一次浸提4小时，浸提过程中，每30分钟拿出锥形瓶搅拌3-4分钟后再重新置于水浴锅中；第一次浸提结束后，真空抽滤获得第一次过滤滤液，剩余滤渣加入400ml配制的50％乙醇水溶液，加入磁力搅拌子，用锡纸封瓶口，放置70℃水浴锅中进行二次浸提，浸提时间为2小时；第二次浸提结束，真空抽滤获得第二次过滤滤液，合并滤液。
12、进一步地，步骤s3中，恒温水浴锅的温度为70℃。
13、本专利技术的另一目的在于提供所述的褐藻多酚在对虾饲料添加剂中的应用。
14、本专利技术的再一目的在于提供一种对虾饲料，含有所述的褐藻多酚，制成的对虾饲料具有提升凡纳滨对虾生长性能、免疫机能和抗病能力的作用。
15、进一步地，所述的对虾饲料，包括对虾基础饲料和褐藻多酚，所述褐藻多酚的添加量占对虾基础饲料总质量的0.5‰-2‰。
16、进一步地，所述褐藻多酚的添加量占对虾基础饲料总质量的1‰-2‰。
17、进一步地，所述褐藻多酚的添加量占对虾基础饲料总质量的1‰或2‰。
18、进一步地，所述对虾基础饲料的组成和配比如下：
19、
20、
21、进一步地，所述复合多维由以下组分组成(mg/kg饲料)：维生素a(500000iu/g)，8；维生素d3(1000000iu/g)，2；维生素k，10；维生素e，200；硫胺素，10；核黄素，12；吡哆醇，10；泛酸钙，32；烟酸，80；叶酸，2；维生素b12，0.01；生物素，0.2；氯化胆碱，400；l-抗坏血酸-2-多磷酸盐，60。
22、进一步地，所述复合多矿由以下组分组成(mg/kg饲料)：锌(以znso4·7h2o计)，150；铁(以feso4·7h2o计)，40；锰(以mnso4·7h2o计)，15.3；铜(以cucl2计)，3.8；碘(以ki计)，5；钴(以cocl2·6h2o计)0.05；硒(以na2seo3计)0.09。
23、本专利技术所述的对虾饲料的投喂量占对虾总质量的5％，投喂频率为每天3次，投喂时间分别为7:00、15:00、23:00。
24、与现有技术相比，本专利技术对凡纳滨对虾具有以下有益效果：
25、(1)本专利技术能够显著提升凡纳滨对虾的生长性能，包括增重率(wgr)，特定生长率(sgr)；提高对虾免疫机能，包括细胞免疫(总血细胞数thc、吞噬活性、发动蛋白dym表达)、酚氧化酶原系统(酚氧化酶原propo表达及活性、酚氧化酶po活性)、抗菌溶菌能力(抗菌活性、抗脂多糖因子alf表达、溶菌活性、溶菌酶lyz表达)；提高对虾的抗氧化水平，包括肝胰腺中总抗氧化能力(t-aoc)、超氧化物歧化酶(sod)表达及活性、过氧化氢酶(cat)表达及活性、谷胱甘肽过氧化物酶(gpx)表达及活性。
26、(2)本专利技术能够显著提高凡纳滨对虾在弧菌攻毒后的存活率。
27、(3)本专利技术未对机体造成代谢上和组织上的损伤，且提高了组织上的健康水平，降低了丙氨酸氨基转移酶(alt)和谷草转氨酶(ast)活性，蛋白质羰基化(pc)水平无明显差异；肠道的的肠褶皱高度和肠壁厚度有所增加；肝胰腺的b、r、f细胞有所增加，且肝胰腺细胞间排列更加紧密。
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1.一种褐藻多酚的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的褐藻多酚的制备方法，其特征在于：步骤S2中，马尾藻粉末中加入50％乙醇水溶液直至料液质量比为1:40。
3.根据权利要求1所述的褐藻多酚的制备方法，其特征在于：步骤S2中，超声仪破碎仪设置参数为25KHz，25℃，32min，每6秒间隔3秒。
4.根据权利要求1所述的褐藻多酚的制备方法，其特征在于：步骤S3中，第一次浸提4小时，浸提过程中，每30分钟拿出锥形瓶搅拌3-4分钟后再重新置于水浴锅中；第一次浸提结束后，真空抽滤获得第一次过滤滤液，剩余滤渣加入400ml配制的50％乙醇水溶液，加入磁力搅拌子，用锡纸封瓶口，放置70℃水浴锅中进行二次浸提，浸提时间为2小时；第二次浸提结束，真空抽滤获得第二次过滤滤液，合并滤液。
5.根据权利要求1所述的褐藻多酚的制备方法，其特征在于：步骤S3中，恒温水浴锅的温度为70℃。
6.一种根据权利要求1-5任何一项所述的褐藻多酚在对虾饲料添加剂中的应用。
7.一种对虾饲料，其特征在于：含有权利要求6
8.根据权利要求7所述的对虾饲料，其特征在于：包括对虾基础饲料和褐藻多酚，所述褐藻多酚的添加量占对虾基础饲料总质量的0.5‰-2‰。
9.根据权利要求8所述的对虾饲料，其特征在于：所述对虾基础饲料的组成和配比如下：
10.根据权利要求9所述的对虾饲料，其特征在于：
...【技术特征摘要】
1.一种褐藻多酚的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的褐藻多酚的制备方法，其特征在于：步骤s2中，马尾藻粉末中加入50％乙醇水溶液直至料液质量比为1:40。
3.根据权利要求1所述的褐藻多酚的制备方法，其特征在于：步骤s2中，超声仪破碎仪设置参数为25khz，25℃，32min，每6秒间隔3秒。
4.根据权利要求1所述的褐藻多酚的制备方法，其特征在于：步骤s3中，第一次浸提4小时，浸提过程中，每30分钟拿出锥形瓶搅拌3-4分钟后再重新置于水浴锅中；第一次浸提结束后，真空抽滤获得第一次过滤滤液，剩余滤渣加入400ml配制的50％乙醇水溶液，加入磁力搅拌子，用锡纸封瓶口，放置70℃水浴锅中进...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵群，吴子杰，杨守国，唐贤明，李二超，程芬，徐畅，韩凤禄，
申请(专利权)人：海南大学，
类型：发明
国别省市：
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