【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物学检测领域，更具体地，涉及一种用于乳腺癌或癌前病变检测的试剂、试剂盒及应用。
技术介绍
1、乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。小叶原位癌(lobular carcinoma insitu，lcis)是一种非浸润性原位乳腺癌。有数据显示，确诊为小叶原位癌的女性发展为浸润性小叶癌的风险提高了18倍，而罹患浸润性导管癌的风险也提高了3～4倍。在确诊为小叶不典型增生和小叶原位癌的女性中，发生浸润性癌变的概率为5％～32％。小叶原位癌被认为是值得重视的浸润性乳腺癌的癌前病变。
2、小叶原位癌通常没有任何临床症状，例如没有乳房肿块、乳头溢液、乳头肿胀及皮肤改变等体征改变，有时仅有类似增生样的改变。因此，小叶原位癌通常难以被发现和确诊，大多数是具有明显的临床症状才去医院就诊。但同时，小叶原位癌具有癌变恶化周期长、双侧乳房和多个象限发病的特点。如果能够尽早发现和确诊小叶原位癌，对于保乳治疗、防止恶化为浸润性癌具有非常重要的意义。
3、目前对于乳腺癌癌前病变，尤其是小叶原位癌的甲基化检测尚未有较成熟的研究。
技术实现思路
1、针对现有技术的缺陷，本专利技术的目的在于提供了一种用于乳腺癌或癌前病变检测的试剂、试剂盒及应用，以改善现有技术对乳腺癌的诊断手段不足，对乳腺癌癌前病变的检出率低，尤其是对小叶原位癌的检测灵敏度欠佳等的技术问题。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了一种用于乳腺癌或癌前病变检测的试剂，其为用于检测样本中目标序列的甲基化水平
3、优选地，所述chr10:101140210-101140778的部分区域选自靶序列1～4中的至少一个；其中所述靶序列1选自chr10:101140230-101140416正链，所述靶序列2选自chr10:101140374-101140492负链，所述靶序列3选自chr10:101140639-101140778正链，所述靶序列4选自chr10:101140210-101140348负链。
4、优选地，所述目标序列选自seq id no.1～4所示核苷酸序列中的至少一个。
5、进一步优选地，所述目标序列选自如下任一组合：
6、seq id no.2～4中的任一者与seq id no.1的组合；
7、seq id no.3或seq id no.4中的任一者与seq id no.2的组合；
8、seq id no.3与seq id no.4的组合。
9、优选地，所述试剂包括用于检测所述目标序列的甲基化水平的引物对。
10、进一步优选地，所述引物对选自如下引物对中的至少一组：
11、用于检测seq id no.1区域内的甲基化水平的第一引物对、用于检测seq id no.2区域内的甲基化水平的第二引物对、用于检测seq id no.3区域内的甲基化水平的第三引物对、用于检测seq id no.4区域内的甲基化水平的第四引物对。
12、优选地，所述引物对选自如下(1)-(4)组引物对中的至少一组：
13、(1)seq id no.9～10所示的第一引物对；
14、(2)seq id no.12～13所示的第二引物对；
15、(3)seq id no.15～16所示的第三引物对；
16、(4)seq id no.18～19所示的第四引物对。
17、优选地，所述试剂还包括与所述引物对对应的检测探针，所述检测探针选自如下检测探针中的至少一种：
18、用于检测seq id no.1区域内的甲基化水平的检测探针如seq id no.11所示；用于检测seq id no.2区域内的甲基化水平的检测探针如seq id no.14所示；用于检测seqid no.3区域内的甲基化水平的检测探针如seq id no.17所示；用于检测seq id no.4区域内的甲基化水平的检测探针如seq id no.20所示。
19、本专利技术还提供了一种用于乳腺癌或癌前病变检测的试剂盒，其包括所述试剂。
20、优选地，所述试剂盒还包括核酸提取试剂、核酸纯化试剂、甲基化转化试剂、pcr反应试剂、质控品、内参基因的检测引物对、内参基因的检测探针中的一种或多种。
21、本专利技术还提供了所述试剂或所述试剂盒在制备乳腺癌或癌前病变诊断产品中的应用。
22、优选地，所述乳腺癌包括小叶浸润癌、导管浸润癌和小叶原位癌中的至少一种。
23、优选地，所述乳腺癌诊断产品包括引物、探针、试剂盒、芯片、测序文库、膜条和蛋白阵列中的一种或多种。
24、总体而言，通过本专利技术所构思的以上技术方案与现有技术相比，具有以下有益效果：
25、(1)本专利技术提供的一种用于乳腺癌或癌前病变检测的试剂、试剂盒，通过检测样本中目标序列(chr10:101140210-101140778的全长或部分区域)的甲基化水平，可以对乳腺癌或癌前病变进行检测或诊断，有效区分乳腺癌患者和健康人，对乳腺癌的早期筛查，尤其是癌前病变的早期筛查，具有重要意义。
26、(2)本专利技术提供的试剂盒对乳腺癌、乳腺癌癌前病变均具有良好的检测效果，检测乳腺癌血浆样本的灵敏度可达92.86％，检测小叶原位癌血浆样本的灵敏度可达89.29％，可以有效避免假阳性结果的检出，能够用于小叶原位癌的辅助诊断。此外，该试剂盒检测健康人血浆样本的特异性最高可达97.89％，能够有效避免假阴性结果的检出，提高检测准确度。
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1.一种用于乳腺癌或癌前病变检测的试剂，其特征在于，其为用于检测样本中目标序列的甲基化水平的试剂，以GRCh38.p14为参考基因组，所述目标序列包括Chr10:101140210-101140778的全长或部分区域。
2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述目标序列选自SEQ ID NO.1～4所示核苷酸序列中的至少一个。
3.根据权利要求2所述的试剂，其特征在于，所述目标序列选自如下任一组合：
4.根据权利要求2或3所述的试剂，其特征在于，所述试剂包括用于检测所述目标序列的甲基化水平的引物对，所述引物对选自如下引物对中的至少一组：
5.根据权利要求4所述的试剂，其特征在于，所述引物对选自如下(1)-(4)组引物对中的至少一组：
6.根据权利要求4所述的试剂，其特征在于，所述试剂还包括与所述引物对对应的检测探针，所述检测探针选自如下检测探针中的至少一种：
7.一种用于乳腺癌或癌前病变检测的试剂盒，其特征在于，其包括权利要求1至6任一项所述的试剂。
8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于
9.权利要求1至6任一项所述的试剂或权利要求7或8所述的试剂盒在制备乳腺癌或癌前病变诊断产品中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述乳腺癌包括小叶浸润癌、导管浸润癌和小叶原位癌中的至少一种；
...【技术特征摘要】
1.一种用于乳腺癌或癌前病变检测的试剂，其特征在于，其为用于检测样本中目标序列的甲基化水平的试剂，以grch38.p14为参考基因组，所述目标序列包括chr10:101140210-101140778的全长或部分区域。
2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述目标序列选自seq id no.1～4所示核苷酸序列中的至少一个。
3.根据权利要求2所述的试剂，其特征在于，所述目标序列选自如下任一组合：
4.根据权利要求2或3所述的试剂，其特征在于，所述试剂包括用于检测所述目标序列的甲基化水平的引物对，所述引物对选自如下引物对中的至少一组：
5.根据权利要求4所述的试剂，其特征在于，所述引物对选自如下(1)-(4)组引物对中的...
【专利技术属性】
技术研发人员：张良禄，周俊，熊杨辉，郑义慧，周谛晗，
申请(专利权)人：武汉艾米森生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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