【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于化学分析，具体涉及一种分离并检测利奈唑胺z4中氯甲酸苄酯的高效液相色谱法。
技术介绍
1、利奈唑胺，一种人工合成的唑烷酮类抗生素，主要用于治疗革兰阳性(g+)球菌引起的感染，包括由mrsa引起的疑似或确诊院内获得性肺炎(hap)、社区获得性肺炎(cap)、复杂性皮肤或皮肤软组织感染(ssti)以及耐万古霉素肠球菌(vre)感染。
2、利奈唑胺z4为利奈唑胺合成过程中的重要中间体，其结构式如式ⅰ所示。研究发现，利奈唑胺z4中存在杂质氯甲酸苄酯，该杂质结构式如式ⅱ所示；因为氯甲酸苄酯具有警示结构，所以在本品中需要按照遗传毒性杂质的控制限度进行控制。然而氯甲酸苄酯为不稳定化合物，室温下易水解，现有方法均是采用气相色谱法测定其含量，但是其沸点较高，使用气相色谱不能满足本品中遗传毒性杂质控制灵敏度要求。
3、
4、因此，有必要建立新的分析方法，对利奈唑胺z4中的警示结构杂质氯甲酸苄酯进行控制。
技术实现思路
1、本专利技术的目的之一在于提供一种分离利奈唑胺z4中氯甲酸苄酯的方法，该方法可以在10min内将利奈唑胺z4中的氯甲酸苄酯进行有效的分离，分离时间短，且专属性强、重现性好。
2、为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、分离利奈唑胺z4中氯甲酸苄酯的方法所述利奈唑胺z4的结构式如式ⅰ所示，所述氯甲酸苄酯的结构式如式ⅱ所示；所述分离方法是采用高效液相色谱法，以十八烷基键合硅胶为色谱柱填充剂，以乙腈水溶液为流
4、
5、作为优选，所述流动相中，乙腈和水的体积比为55：45。
6、作为优选，所述色谱柱规格采用150mm×4.6mm，3μm。
7、进一步，所述色谱柱柱温为23-27℃，优选为25℃；所述流动相流速为0.9-1.1ml/min，优选为1.0ml/min。
8、进一步，进样盘温度为5℃。
9、进一步，进样体积为20μl。
10、本专利技术的目的之二在于提供一种鉴别利奈唑胺z4中是否含有氯甲酸苄酯的方法，该方法可以实现利奈唑胺z4中氯甲酸苄酯的定性鉴别。
11、为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
12、鉴别利奈唑胺z4中是否含有氯甲酸苄酯的方法，利用前述方法分离利奈唑胺z4中的氯甲酸苄酯；进入检测器进行检测；所述检测器的检测波长为210nm。
13、进一步，根据检测样品与对照品色谱保留行为的一致性来判断产品是否含有所述氯甲酸苄酯。
14、作为优选的技术方案，采用如下色谱条件进行检测：所述流动相中，乙腈和水的体积比为55：45；所述流动相流速为1.0ml/min；所述色谱柱柱温为25℃，所述色谱柱规格为150mm×4.6mm，3μm；进样盘温度为5℃；检测波长为210nm。
15、进一步，保留时间在5.2±0.5min的为所述氯甲酸卞酯。
16、本专利技术的目的之三在于提供一种检测利奈唑胺z4中氯甲酸苄酯是否合格的方法，该方法可以实现利奈唑胺z4中氯甲酸苄酯的有效检测。
17、为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
18、检测利奈唑胺z4中氯甲酸苄酯是否合格的方法包括如下步骤：
19、(1)配制对照品溶液和样品溶液；
20、(2)利用权利要求4-6任一项所述的方法对步骤(1)配制的对照品溶液和样品溶液进行检测，得到色谱图；
21、(3)利用步骤(2)获得的对照品图谱，以氯甲酸卞酯的峰面积构建色谱模型；
22、(4)利用色谱模型判定样品溶液中氯甲酸苄酯含量是否合格。
23、进一步，采用乙腈、水和磷酸的混合溶液作为配制溶剂；所述乙腈、水和磷酸的体积比为50:50：0.1。
24、进一步，所述配制溶剂在冰浴控温至5℃以下使用。
25、进一步，若样品溶液中氯甲酸苄酯的峰面积小于对照品溶液中氯甲酸苄酯的峰面积，则判定为合格。
26、进一步，定量方法为限度法。
27、作为优选的技术方案：
28、1.精密称取待测利奈唑胺z4样品适量，加入溶剂进行溶解并稀释制得浓度约为6mg/ml的溶液，摇匀，作为样品溶液；(临用新制)
29、2.对照溶液：精密称取氯甲酸苄酯适量，加溶剂制成浓度约为96ng/ml的溶液。(临用新制)
30、3.精密量取供试品溶液与对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪；按前述色谱条件进行检测，并记录色谱图；最后采用限度法判断样品溶液中氯甲酸苄酯的是否合格。
31、本专利技术的有益效果在于：
32、本专利技术自建高效液相色谱法，采用常规的c18色谱柱，通过控制进样盘和稀释剂温度，以乙腈-水(55：45)为流动相进行洗脱；氯甲酸苄酯峰型对称，且与相邻所有杂质均能有效分离，且灵敏度能满足本品中遗传毒性杂质控制灵敏度要求。本专利技术方法10分钟内即可实现利奈唑胺z4中氯甲酸苄酯的分离和检测，且灵敏度高、专属性好、重现性好，方法简单、快速。
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1.分离利奈唑胺Z4中氯甲酸苄酯的方法，其特征在于，所述利奈唑胺Z4的结构式如式Ⅰ所示，所述氯甲酸苄酯的结构式如式Ⅱ所示；所述分离方法是采用高效液相色谱法，以十八烷基键合硅胶为色谱柱填充剂，以乙腈水溶液为流动相，通过洗脱将所述氯甲酸苄酯从所述利奈唑胺Z4中进行分离；所述流动相中，乙腈和水的体积比为54-56：46-44；
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱柱温为23-27℃；所述流动相流速为0.9-1.1ml/min。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，进样盘温度为5℃。
4.鉴别利奈唑胺Z4中是否含有氯甲酸苄酯的方法，其特征在于，利用权利要求1-3任一项所述的方法分离利奈唑胺Z4中的氯甲酸苄酯；进入检测器进行检测；所述检测器的检测波长为210nm。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，根据检测样品与对照品色谱保留行为的一致性来判断产品是否含有所述氯甲酸苄酯。
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，保留时间在5.2±0.5min的为所述氯甲酸卞酯。
7.检测利奈唑胺Z4中氯
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，采用乙腈、水和磷酸的混合溶液作为配制溶剂；所述乙腈、水和磷酸的体积比为50:50：0.1。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述配制溶剂在冰浴控温至5℃以下使用。
10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，若样品溶液中氯甲酸苄酯的峰面积小于对照品溶液中氯甲酸苄酯的峰面积，则判定为合格。
...【技术特征摘要】
1.分离利奈唑胺z4中氯甲酸苄酯的方法，其特征在于，所述利奈唑胺z4的结构式如式ⅰ所示，所述氯甲酸苄酯的结构式如式ⅱ所示；所述分离方法是采用高效液相色谱法，以十八烷基键合硅胶为色谱柱填充剂，以乙腈水溶液为流动相，通过洗脱将所述氯甲酸苄酯从所述利奈唑胺z4中进行分离；所述流动相中，乙腈和水的体积比为54-56：46-44；
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱柱温为23-27℃；所述流动相流速为0.9-1.1ml/min。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，进样盘温度为5℃。
4.鉴别利奈唑胺z4中是否含有氯甲酸苄酯的方法，其特征在于，利用权利要求1-3任一项所述的方法分离利奈唑胺z4中的氯甲酸苄酯；进入检测器进行检测；所述检测器的检测波长为21...
【专利技术属性】
技术研发人员：周书荣，
申请(专利权)人：重庆华邦胜凯制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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