一种快速检测茶叶中30种化合物的方法技术

技术编号：40433559 阅读：8 留言：0更新日期：2024-02-22 22:59

本发明专利技术公开了一种快速检测茶叶中儿茶素、黄酮类、花青素、酚酸和氨基酸等30种化合物的方法，所述30种化合物为没食子酸、可可碱、GC、原儿茶酸、茶叶碱、EGC、茶氨酸、绿原酸、咖啡碱、儿茶素、丁香酸、咖啡酸、香草酸、表儿茶素、EGCG、飞燕草素、水杨酸、GCG、对香豆酸、矢车菊素、阿魏酸、芥子酸、芦丁、ECG、天竺葵素、杨梅素、茶黄素、槲皮素、芹菜素、山奈酚。本发明专利技术可实现上述30种化合物的同时快速定性、定量检测，为茶叶活性物质的开发提供了技术支撑。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分析化学，具体涉及一种快速检测茶叶中儿茶素、黄酮类、花青素、酚酸和氨基酸等30种化合物的方法。

技术介绍

1、茶叶是人类最佳的天然保健饮料，其纯天然的特质符合现代人们对生活品质的要求。现有研究发现，茶叶中主要的有机化合物有：占25%-30%的碳水化合物（约10%-20%纤维素）、蛋白质占20%-30%、茶多酚占20%-30％%，咖啡因占3%-5%、氨基酸占1%-4%、色素、维生素、有机酸等。其中茶多酚类物质是一类存在于茶水中的多元酚混合物，其中最重要的是以儿茶素为主体的黄烷醇类，其含量占多酚类总量的70%~80%，是茶树次生物质代谢的重要成分，对茶叶的色、香、味品质的形成有重要作用。酚酸是具有羧基和羟基的芳香族化合物，早在19世纪中叶就开始了茶叶中酚酸的研究。没食子酸在茶叶中的含量为干物质的0.5%~1.4%。生物碱是茶叶重要的代谢产物，主要包括咖啡碱、可可碱和茶碱，在茶叶干物质中含量最多。这些营养物质对人体具有极好的功效价值，如儿茶素抗氧化、保护心脑血管、抗肿瘤等作用；咖啡碱能兴奋提神、舒张血管等；没食子酸具有强抗氧化性，也有抗肿瘤、抗血栓等药理作用。

2、目前，关于茶叶没食子酸、儿茶素及咖啡碱的测定方法已有较多报道，主要有薄层色谱法、液相色谱-紫外检测、液相色谱-质谱、毛细管区带电泳法等。高效液相色谱法应用最多，但同时检测多种成分的方法耗时较长。基于小颗粒填料、低系统体积、快速、超高压等技术的超高效液相色谱（uplc）具有高效、分离度高、峰形尖锐、成本低、环境友好、结果精确等特点，逐渐成为食品分析检

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种快速检测茶叶中儿茶素、黄酮类、花青素、酚酸和氨基酸等30种化合物的方法。

2、为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：

3、一种快速检测茶叶中30种化合物的方法，其包括如下步骤：

4、（1）标准品母液的配制

5、准确称取30种化合物的对照标准物质各5.00 mg，分别用色谱纯级甲醇溶解，并定容至5.00 ml，配成1.00 g/l的标准品母液，备用；

6、（2）样品溶液的制备

7、取0.1g茶叶，加入3ml 80vol%甲醇溶液振荡超声萃取10min，静置分层后收集上清液；取下层重复用80vol%甲醇溶液萃取3次，合并上清液，加入色谱纯甲醇定容至10ml，超声波重溶解，经0.22 μm微孔滤膜过滤，得样品溶液；

8、（3）标准曲线的绘制：

9、按梯度取一定体积的标准品母液，用色谱纯级甲醇稀释成系列浓度的标准品溶液，经0.22 μm微孔滤膜过滤，采用超高效液相色谱仪进行检测，然后以标准品溶液的浓度为横坐标、以标准品峰面积为纵坐标绘制标准曲线；

10、（4）样品检测：

11、将样品溶液采用超高效液相色谱仪进行检测，之后依据所得样品峰面积及对应标准曲线计算获得样品中30种化合物的含量。

12、进一步地，所述30种化合物具体为没食子酸、可可碱、gc、原儿茶酸、茶叶碱、egc、茶氨酸、绿原酸、咖啡碱、儿茶素、丁香酸、咖啡酸、香草酸、表儿茶素、egcg、飞燕草素、水杨酸、gcg、对香豆酸、矢车菊素、阿魏酸、芥子酸、芦丁、ecg、天竺葵素、杨梅素、茶黄素、槲皮素、芹菜素、山奈酚。

13、进一步地，超高效液相色谱的条件为：色谱柱：c18，3 µm，4.6×100 mm；流动相：0.01vol%乙酸溶液与乙腈的混合液，采用梯度洗脱；检测器设置：dad，波长扫描范围210~900 nm；fld，激发波长扫描范围250~400nm，发射波长扫描范围 340~800 nm；其他设置：柱温30℃，流速0.03ml/min，进样量1.0 μl；以紫外吸收光谱扫描图、荧光发射光谱扫描图以及色谱峰保留时间三者结合进行定性判断；检测波长：280nm，330nm，530nm，采用外标法定量。

14、更进一步地，梯度洗脱的程序如下所示：

15、

16、本专利技术的显著优势在于：

17、本专利技术主要采用超高效液相色谱（uplc）法同时测定茶叶中没食子酸（ga）、可可碱、没食子儿茶素（gc）、原儿茶酸、茶叶碱、表没食子儿茶素（egc）、茶氨酸、绿原酸、咖啡碱、儿茶素（c）、丁香酸、咖啡酸、香草酸、表儿茶素（ec）、表没食子儿茶素没食子酸酯（egcg）、飞燕草素、水杨酸、没食子儿茶素没食子酸酯（gcg）、对香豆酸、矢车菊素、阿魏酸、芥子酸、芦丁、表儿茶素没食子酸酯（ecg）、天竺葵素、杨梅素、茶黄素、槲皮素、芹菜素、山奈酚30种成分的含量，该法快速简便，可满足茶叶中多种成分同时检测的需求，为茶叶活性物质的开发提供了技术支撑。

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【技术保护点】

1. 一种快速检测茶叶中30种化合物的方法，其特征在于：包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种快速检测茶叶中30种化合物的方法，其特征在于：所述30种化合物具体为没食子酸、可可碱、GC、原儿茶酸、茶叶碱、EGC、茶氨酸、绿原酸、咖啡碱、儿茶素、丁香酸、咖啡酸、香草酸、表儿茶素、EGCG、飞燕草素、水杨酸、GCG、对香豆酸、矢车菊素、阿魏酸、芥子酸、芦丁、ECG、天竺葵素、杨梅素、茶黄素、槲皮素、芹菜素、山奈酚。

3. 根据权利要求1所述的一种快速检测茶叶中30种化合物的方法，其特征在于：所采用超高效液相色谱的条件为：色谱柱：C18，3 µm，4.6×100 mm；流动相：0.01vol%乙酸溶液与乙腈的混合液，采用梯度洗脱；检测器设置：DAD，波长扫描范围210~900 nm；FLD，激发波长扫描范围250~400 nm，发射波长扫描范围 340~800 nm；其他设置：柱温30℃，流速0.03mL/min，进样量1.0 μL；以紫外吸收光谱扫描图、荧光发射光谱扫描图以及色谱峰保留时间三者结合进行定性判断；检测波长：280nm，330nm，530nm，采用外标法定量。

4.根据权利要求3所述的一种快速检测茶叶中30种化合物的方法，其特征在于：梯度洗脱的程序为：0-12min，乙腈体积由7%提升至16%，12-16min，乙腈体积由16%提升至50%,16-20min，乙腈体积由50%降低至7%。

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【技术特征摘要】

1. 一种快速检测茶叶中30种化合物的方法，其特征在于：包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种快速检测茶叶中30种化合物的方法，其特征在于：所述30种化合物具体为没食子酸、可可碱、gc、原儿茶酸、茶叶碱、egc、茶氨酸、绿原酸、咖啡碱、儿茶素、丁香酸、咖啡酸、香草酸、表儿茶素、egcg、飞燕草素、水杨酸、gcg、对香豆酸、矢车菊素、阿魏酸、芥子酸、芦丁、ecg、天竺葵素、杨梅素、茶黄素、槲皮素、芹菜素、山奈酚。

3. 根据权利要求1所述的一种快速检测茶叶中30种化合物的方法，其特征在于：所采用超高效液相色谱的条件为：色谱柱：c18，3 µm，4.6×100 mm；流动相：0.01vol%乙酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈源，余文权，
申请(专利权)人：福建省农业科学院茶叶研究所，
类型：发明
国别省市：

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