【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物医药，尤其是涉及一种磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度的试剂盒及检测方法。
技术介绍
1、肺癌是一种恶性肿瘤，起源于肺组织中的异常细胞，可以快速增殖和扩散。根据肿瘤的类型和位置，肺癌可以分为两类主要类型：非小细胞肺癌(nsclc)和小细胞肺癌(sclc)。
2、非小细胞肺癌(nsclc)：nsclc是最常见的肺癌类型，约占所有肺癌病例的85％。它包括腺癌、鳞癌和大细胞癌。nsclc通常生长较慢，较早出现症状，如咳嗽、咳痰、胸痛、呼吸困难等。如果不进行及时治疗，nsclc可能会扩散到其他器官(如肝脏、骨骼、脑部等)并形成转移瘤。
3、小细胞肺癌(sclc)：sclc约占所有肺癌病例的15％，生长速度快且具有强大的侵袭性。sclc往往在早期就已扩散到其他部位，如淋巴结、肝脏、骨骼和大脑。症状包括咳嗽、呼吸困难、胸痛、体重减轻等。由于sclc的早期诊断较为困难，大多数患者被确诊时已经处于晚期。肺癌的恶性特性使得它具有以下严重后果。因此，对于肺癌的早期诊断及治疗尤为重要。
4、目前，现有技术中，针对肺癌的检测方法较多，但各有优缺点。x射线检查虽具有简便、成本相对较低的特点，但是对早期肺癌的敏感性较低，可能无法准确检测小肿块。
5、ct扫描虽然能够提供更准确的图像，对早期肺癌的敏感性较高，但是存在较高的辐射剂量以及较高的成本，并且可能会导致误诊和过度治疗。
6、胸部mri虽然具有无辐射，对某些情况下的肺癌检测更准确，但是成本较高，因此，对于肺癌的检测并不是常规方法
7、pet-ct扫描虽然能够提供关于肿瘤代谢情况和位置的信息，对早期肺癌的敏感性较高，但是存在成本高，较高的辐射剂量，以及可能会导致误诊和过度治疗的问题。
技术实现思路
1、为了解决上述至少一种技术问题，开发出一种快速、简便、成本较低、灵敏性高，检测精确度高的能够辅助肺癌诊断的检测方法，本申请提供一种磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度的试剂盒及检测方法。
2、第一方面，本申请提供一种磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度的试剂盒，所述试剂盒包括缓冲液、肺癌标志物a、肺癌标志物b以及化学发光底物；
3、所述肺癌标志物a包括a1、a2、a3、a4、a5、a6；
4、a1包括与磁微粒偶联的ca125单克隆抗体；
5、a2包括与磁微粒偶联的cea单克隆抗体；
6、a3包括与磁微粒偶联的ca199单克隆抗体；
7、a4包括与磁微粒偶联的nse单克隆抗体；
8、a5包括与磁微粒偶联的cy211单克隆抗体；
9、a6包括与磁微粒偶联的scc单克隆抗体；
10、所述肺癌标志物b包括b1、b2、b3、b4、b5、b6；
11、b1包括由fitc和碱性磷酸酶标记的ca125单克隆抗体；
12、b2包括由cy3和碱性磷酸酶标记的cea单克隆抗体抗体；
13、b3包括由cy5和碱性磷酸酶标记的ca199单克隆抗体；
14、b4包括由dylight 549和碱性磷酸酶标记的nse单克隆抗体；
15、b5包括由rhodamine b和碱性磷酸酶标记的cy211单克隆抗体；
16、b6包括由gfp和碱性磷酸酶标记的scc单克隆抗体；
17、a1、a2、a3、a4、a5、a6浓度均为300-500μg/ml；
18、b1、b2、b3、b4、b5、b6的浓度均为200-300μg/ml；
19、缓冲液浓度为0.1～0.2mol/l。
20、通过上述技术方案，本申请能够对肺癌的早期诊断提供辅助检测，同时，可以检测非常低浓度的肿瘤标志物，具有高灵敏度，从而能够提供准确的结果；使用特异性抗体与目标肿瘤标志物结合，可以准确识别和测量特定的肿瘤抗原，避免了其他物质的干扰，提高了检测结果的准确性和可靠性；采用血清或血浆等生物样本进行检测，这些样本的采集相对简便和非侵入性，不会给患者带来过多的不适。同时，这些样本相对稳定，便于保存和运输，保证了检测结果的可靠性；总的来说，本申请具有高灵敏度、高特异性、快速、易操作和标本可靠性等优势，对于肺癌的早期辅助诊断、疾病监测和治疗效果评估具有重要的临床意义。
21、可选的，所述化学发光底物包括amppd，浓度为10-20mg/ml。
22、可选的，所述试剂盒还包括校准品、质控品、样本稀释液中的一种或多种。
23、可选的，所述一种磁微粒化学发光免疫法检测肺癌相关抗原浓度的试剂盒储存温度为2～8℃。
24、第二方面，本申请提供本申请所述一种磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度的检测方法，所述检测方法包括如下步骤：
25、s1、将a1、a2、a3、a4、a5、a6分别溶于浓度为0.1～0.2mol/l的tris缓冲液中，并加入待测样本，混合孵育，形成抗体-抗原复合物，并清洗；
26、将b1、b2、b3、b4、b5、b6分别溶于浓度为0.1～0.2mol/l的tris缓冲液中，备用；
27、s2、洗涤结束后，往装有a1的反应管中加入由步骤s1获得的b1、往装有a2的反应管中加入由步骤s1获得的b2、往装有a3的反应管中加入由步骤s1获得的b3、往装有a4的反应管中加入由步骤s1获得的b4、往装有a5的反应管中加入由步骤s1获得的b5、往装有a6的反应管中加入由步骤s1获得的b6，进行反应，形成抗体-抗原-抗体夹心复合物；
28、s3、反应结束后，用洗涤液洗涤未反应的物质；
29、s4、洗涤结束后，在各反应管中加入发光底物，触发化学发光反应；
30、s5、检测发光信号的强度。
31、通过采用上述技术方案，本申请具有高度自动化的特点，可以同时处理多个样本，提高检测效率。同时，该技术的检测时间较短，可以在较短的时间内得到结果。并且，本申请在对肺癌进行检测时，使用同时由荧光染料标记和酶标记抗体的，多重标记的检测方法，可以同时获得荧光信号和酶反应信号，从而可以在细胞或组织中进行多重检测。这种多重标记的策略可以提供更多的信息，增加实验的灵活性和准确性，从而更全面地了解目标分子的分布和表达。
32、可选的，步骤s2所述待测样本包括人血清、血浆中的一种。
33、可选的，步骤s2所述混合孵育参数为如下：
34、孵育温度为20～25℃；孵育时间30～60min；孵育时的ph值为7.2～7.4。
35、可选的，步骤s1、步骤s3所述洗涤液包括磷酸盐缓冲液；洗涤次数为2次。
36、第三方面，本申请提供本申请所述磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度的试剂盒在肺癌检测领域中的应用。
37、综上所述，本专利技术包括以下至少一种有益技术效果：
38、1.本申请提供的一种磁微粒化学发光免本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括缓冲液、肺癌标志物A、肺癌标志物B以及化学发光底物；
2.根据权利要求1所述的一种磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度的试剂盒，其特征在于，所述化学发光底物包括AMPPD，浓度为10-20 mg/mL。
3.根据权利要求1所述的一种磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括校准品、质控品、样本稀释液中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的一种磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度 的试剂盒，其特征在于，所述一种基于磁微粒化学发光免疫法检测肺癌相关抗原浓度的试剂盒储存温度为2~8℃。
5.一种权利要求1所述的磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：
6.根据权利要求5所述的磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度的检测方法，其特征在于，步骤S1所述待测样本包括人血清、血浆中的一种。
7.根据权利要求5所述的磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度的检测方法，其特征
8.根据权利要求5所述的磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度的检测方法，其特征在于，步骤S1、步骤S3所述洗涤液包括磷酸盐缓冲液；洗涤次数为2次。
9.一种权利要求1所述的磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度的试剂盒在肺癌检测领域中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括缓冲液、肺癌标志物a、肺癌标志物b以及化学发光底物；
2.根据权利要求1所述的一种磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度的试剂盒，其特征在于，所述化学发光底物包括amppd，浓度为10-20 mg/ml。
3.根据权利要求1所述的一种磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括校准品、质控品、样本稀释液中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的一种磁微粒化学发光免疫法检测肺癌抗原浓度 的试剂盒，其特征在于，所述一种基于磁微粒化学发光免疫法检测肺癌相关抗原浓度的试剂盒储存温度为2~8℃。
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【专利技术属性】
技术研发人员：陈丽，林玉影，肖南香，许善情，章丽丽，
申请(专利权)人：福州汉佰康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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