【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种生物墨水、类器官模型及应用，尤其涉及一种生物墨水、3d打印阿尔兹海默症类脑模型、方法及应用。
技术介绍
1、目前，研究新型药物对某种疾病的治疗作用或生物活性物质对于身体器官、组织的保健功能检测主要是两个方面。
2、第一种，将药物加入到培养的单一细胞培养皿中去检测药物对于该细胞的作用。对于这种方式，由于人体的器官或疾病的产生是多细胞共同的作用，用单一的细胞培养皿中的一种细胞作为检测无法模拟出真实人体中细胞与细胞之间的系统性交流。同时，由于人体的器官与组织是3d形式，而培养皿中的细胞呈现平面2d的形式生长，无法模拟器官内的细胞生长的最真实状态。
3、第二种，将药物或生物活性物质注射或喂食给动物。对于这种方式的缺点是，试验周期过长，且在摸索新型药物或生物活性物质的时候需要耗费大量的实验动物和金钱才能将该药物或生物活性物质作用在每一个器官上，进而才能最大程度上找到该药物或生物活性物质的功能。
4、近年来，3d打印技术逐渐兴起，可根据设计的3d模型来构建生物组织或器官的立体结构，这种技术有潜力用于生物医学研究、生物打印定制的组织和器官、以及药物筛选等应用领域。目前，3d打印技术鲜有应用于阿尔兹海默症的研究，同时，市面上大多数的生物墨水具有内毒素，并不能更好的模拟脑内微环境。基于此，阿尔兹海默症类脑模型3d打印材料的选择是亟需解决的问题，并且，如何使打印后的组织具有无需加药即可具有类似阿尔兹海默症自主加剧的作用，以更好的模拟脑内真实发生情况，将会对阿尔兹海默症的相关研究具有重要意义。p>
技术实现思路
1、为了解决上述技术所存在的不足之处，本专利技术提供了一种生物墨水、3d打印阿尔兹海默症类脑模型、方法及应用。
2、为了解决以上技术问题，本专利技术采用的技术方案是：一种3d打印阿尔兹海默症类脑模型，其特征在于：该阿尔兹海默症类脑模型具有上、中、下三层结构，其中，上、下两层结构中所含有的细胞是活化好的小胶质细胞与星型胶质细胞，胶质细胞与星型胶质细胞按1：1混合到生物墨水中，分别形成上、下两层结构；中间层所含有的细胞是海马体神经元，海马体神经元混合到生物墨水中，形成中间层结构。
3、进一步地，活化好的小胶质细胞、活化好的星型胶质细胞指的是：经lps诱导并成功产生炎症反应的小胶质细胞、星型胶质细胞。
4、一种3d打印阿尔兹海默症类脑模型的制备方法，包括以下制备过程：
5、s1、活化的小胶质细胞、星型胶质细胞获取：
6、小胶质细胞、星型胶质细胞先从超低温冰箱中取出来复苏至培养瓶中培养24小时；随后将小胶质细胞、星型胶质细胞通过加入lps诱导成为炎症的小胶质细胞、星型胶质细胞；
7、s2、海马体神经元获取：
8、海马体神经元也从超低温冰箱中取出来复苏至培养瓶中培养24小时，不做任何处理；
9、s3、生物3d打印准备阶段：
10、分别对上述海马体神经元细胞、以及活化的小胶质细胞、星型胶质细胞进行离心；
11、将离心获得的小胶质细胞、星型胶质细胞混合到生物墨水中，记为上样一；
12、将离心获得的海马体神经元混合到生物墨水中，记为上样二；
13、s4、设置3d打印参数，上机打印：
14、以上样一为原料打印出下层结构后，再由上样二为原料打印出中间层结构，再由上样一为原料打印出上层结构，制得阿尔兹海默症类脑模型。
15、进一步地，细胞复苏培养条件为：用含有89％的dmem、10％的fbs、1％的双抗在二氧化碳恒温培养箱中分别培养24h，双抗为抗青霉素和链霉素，恒温培养环境为37℃，co2的体积浓度为5％。
16、进一步地，在小胶质细胞与星型胶质细胞中加入lps使其最终浓度为100ng-1μg/ml，继续分别培养24小时，由lps诱导产生炎症反应。
17、进一步地，3d打印参数具体有：
18、打印喷头的直径：0.3mm；
19、打印气动压力：0.4mpa；
20、打印速度：10mm/s；
21、打印结构长宽高：6×6×6mm。
22、进一步地，小胶质细胞、星型胶质细胞按照1:1混合到生物墨水中，最终细胞浓度为1*10^6/ml。
23、进一步地，海马体神经混合到生物墨水中的最终细胞浓度为1*10^6/ml。
24、一种应用于3d打印阿尔兹海默症类脑模型的生物墨水，生物墨水的配方如下：
25、海藻酸钠：2-10wt％；
26、食用明胶：3-15wt％；
27、胶原蛋白：1-15mg/ml；
28、壳聚糖：3-14wt％。
29、一种3d打印阿尔兹海默症类脑模型的应用，包括但不限于阿尔兹海默症、老年失智症病理进展研究，药物检测，其它生物活性物质检测，药物筛查。
30、本专利技术公开了一种生物墨水、3d打印阿尔兹海默症类脑模型、方法及应用，通过3d打印类器官技术，在三维层面上模拟出真实的阿尔兹海默症影响海马体的病理进程打印后的组织具有无需加药即可具有类似阿尔兹海默症自主加剧的作用，能够更好的模拟脑内真实发生的情况。同时，通过3d打印技术将该类器官量产化，从而实现对药物、生物活性物质功能的快速筛选，为下一步针对性的动物实验或临床试验提供思路。此外，创新的提成一种新的生物墨水，改善了传统的生物墨水具有内毒素，且不能更好的模拟脑内微环境的现状。
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1.一种3D打印阿尔兹海默症，类脑模型，其特征在于：该阿尔兹海默症，类脑模型具有上、中、下三层结构，其中，上、下两层结构中所含有的细胞是活化好的小胶质细胞与星型胶质细胞，胶质细胞与星型胶质细胞按1：1混合到生物墨水中，分别形成上、下两层结构；中间层所含有的细胞是海马体神经元，海马体神经元混合到生物墨水中，形成中间层结构。
2.根据权利要求1所述的3D打印阿尔兹海默症类脑模型，其特征在于：所述活化好的小胶质细胞、活化好的星型胶质细胞指的是：经LPS诱导并成功产生炎症反应的小胶质细胞、星型胶质细胞。
3.一种如权利要求1-2任一项所述的3D打印阿尔兹海默症类脑模型的制备方法，其特征在于：包括以下制备过程：
4.根据权利要求3所述的3D打印阿尔兹海默症类脑模型的制备方法，其特征在于：细胞复苏培养条件为：用含有89％的DMEM、10％的FBS、1％的双抗在二氧化碳恒温培养箱中分别培养24h，双抗为抗青霉素和链霉素，恒温培养环境为37℃，CO2的体积浓度为5％。
5.根据权利要求4所述的3D打印阿尔兹海默症类脑模型的制备方法，其特征在于：在小
6.根据权利要求5所述的3D打印阿尔兹海默症类脑模型的制备方法，其特征在于：3D打印参数具体有：
7.根据权利要求6所述的3D打印阿尔兹海默症类脑模型的制备方法，其特征在于：小胶质细胞、星型胶质细胞按照1:1混合到生物墨水中，最终细胞浓度为1*10^6/mL。
8.根据权利要求7所述的3D打印阿尔兹海默症类脑模型的制备方法，其特征在于：海马体神经混合到生物墨水中的最终细胞浓度为1*10^6/mL。
9.一种应用于权利要求1-2任一项所述的3D打印阿尔兹海默症类脑模型的生物墨水，其特征在于：所述生物墨水的配方如下：
10.一种如权利要求1-2任一项所述的3D打印阿尔兹海默症类脑模型的应用，其特征在于：应用包括但不限于阿尔兹海默症、老年失智症病理进展研究，药物检测，其它生物活性物质检测，药物筛查。
...【技术特征摘要】
1.一种3d打印阿尔兹海默症，类脑模型，其特征在于：该阿尔兹海默症，类脑模型具有上、中、下三层结构，其中，上、下两层结构中所含有的细胞是活化好的小胶质细胞与星型胶质细胞，胶质细胞与星型胶质细胞按1：1混合到生物墨水中，分别形成上、下两层结构；中间层所含有的细胞是海马体神经元，海马体神经元混合到生物墨水中，形成中间层结构。
2.根据权利要求1所述的3d打印阿尔兹海默症类脑模型，其特征在于：所述活化好的小胶质细胞、活化好的星型胶质细胞指的是：经lps诱导并成功产生炎症反应的小胶质细胞、星型胶质细胞。
3.一种如权利要求1-2任一项所述的3d打印阿尔兹海默症类脑模型的制备方法，其特征在于：包括以下制备过程：
4.根据权利要求3所述的3d打印阿尔兹海默症类脑模型的制备方法，其特征在于：细胞复苏培养条件为：用含有89％的dmem、10％的fbs、1％的双抗在二氧化碳恒温培养箱中分别培养24h，双抗为抗青霉素和链霉素，恒温培养环境为37℃，co2的体积浓度为5％。
5.根据权利要求4所述的3...
【专利技术属性】
技术研发人员：楚江邦锐，翁建霖，
申请(专利权)人：威海海高园明睿智琳生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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