System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种卵子或胚胎的解冻方法技术_技高网

一种卵子或胚胎的解冻方法技术

技术编号:40377299 阅读:5 留言:0更新日期:2024-02-20 22:17
本发明专利技术公开了一种卵子或胚胎的解冻方法,包括如下步骤:分别将预热后的油、稀释液、清洗液和培养液装入不同的容器中;将装有卵子或胚胎的载体由液氮中取出,并将卵子或胚胎浸入装有油的容器内解冻;将解冻后的卵子或胚胎由载体上吸出,并移动至装有稀释液的容器中;将卵子或胚胎由装有稀释液的容器中吸出,并移动至装有清洗液的容器中;将卵子或胚胎由装有清洗液的容器中吸出,并移动至装有培养液的容器中。本发明专利技术在胚胎解冻的时候,拥有跟传统解冻液相若的升温速度和安全性的同时,避免胚胎离开载体,增加操作的便利性,此外,还具有设备结构简单、易于实施、成本低廉等特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程,特别是涉及一种卵子或胚胎的解冻方法


技术介绍

1、玻璃化冷冻技术依靠高速的降温和升温速度来避免冰晶的产生,使保存的生物样本避免冰晶的伤害,提高了解冻后的存活率。其中的高速降温由直接浸泡液氮得以实现,而高速升温则通过直接浸泡解冻液得以实现。

2、现有的玻璃化冷冻技术,卵子和胚胎在最后的处理步骤会被放置在一个载体上。胚胎或卵子的周围具有玻璃化冷冻液。玻璃化冷冻液含有高浓度冷冻保护剂,这些冷冻保护剂配合高速的降温速度可以避免冰晶的产生。当需要解冻的时候,操作人员将载体从液氮中取出,并立刻将装有卵子或胚胎的一部分浸入解冻液内进行升温。解冻升温的速度是决定卵子或胚胎能否复苏的关键因素(另外的关键因素还包括冷冻降温的速度)。如果升温速度过慢,冰晶就会在胚胎周围或者胚胎内部产生,导致卵子或胚胎死亡。为了加快升温速度,现有技术是将装有卵子或胚胎的载体由液氮中取出后,瞬间将载体插入解冻液中进行升温解冻。此方法比将载体放置在空气中的升温速度快很多。但是现有技术也存在一个严重的问题:载体上的卵子或胚胎当泡在解冻液的时候会由载体中向外漂出。当卵子或胚胎离开载体并在解冻液里自由漂浮的时候,操作员很难找到卵子或胚胎。由于解冻液中的渗透压很高,卵子或胚胎只能在其中浸泡很短时间,当胚胎漂出载体外部时,往往需要通过显微镜花费很长的时间进行寻找,从而导致卵子或胚胎的死亡,或者丢失。


技术实现思路

1、综上所述,本专利技术旨在解决上述现有技术所述的至少一种缺陷(不足),而提供一种卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:

2、将装有卵子或胚胎的载体由液氮中取出,并将卵子或胚胎浸入装有油的容器内解冻。

3、油的温度为30~40℃。

4、油的温度为37℃。

5、所述油为植物油、食用油、矿物油、硅油中的一种。

6、所述油为矿物油。

7、该方法包括如下步骤:

8、a、分别将预热后的油、稀释液、清洗液和培养液装入不同的容器中;

9、b、将装有卵子或胚胎的载体由液氮中取出,并将卵子或胚胎浸入装有油的容器内解冻;

10、c、将解冻后的卵子或胚胎由载体上吸出,并移动至装有稀释液的容器中,以降低卵子或胚胎周围的渗透压;

11、d、将卵子或胚胎由装有稀释液的容器中吸出,并移动至装有清洗液的容器中对卵子或胚胎进行冲洗;

12、e、将卵子或胚胎由装有清洗液的容器中吸出,并移动至装有培养液的容器中,对卵子或胚胎进行二次冲洗。

13、在步骤a中,预热后的油的温度范围为30~40℃。

14、预热后的油的温度为37℃。

15、所述油为植物油、食用油、矿物油、硅油中的一种。

16、所述油为矿物油。

17、在步骤c、d、e中卵子或胚胎通过玻璃毛细管吸出。

18、在步骤e之后,将装有培养液的容器移动至培养箱内培养复苏。

19、在步骤b中,载体由液氮取出到浸入油中的时间小于一秒。

20、在步骤c中,卵子或胚胎被移动至装有稀释液的容器中后,等待三分钟后再转移至装有清洗液的容器中。

21、在步骤d中,卵子或胚胎被移动至装有清洗液的容器中后,等待五分钟后再转移至装有培养液的容器中。

22、采用上述技术方案,与现有技术相比,本专利技术所产生的有益效果在于:本专利技术使用矿物油作为解冻液,具有如下优点:1)解冻升温的速度比直接放置在空气中快很多,同时解冻升温的效果与传统的解冻液相同。2)采用的解冻液为油,这点与传统解冻液不同,胚胎或卵子会一直被油限位在载体的水相内,不会飘离载体,方便操作人员寻找和操作。此外,在胚胎解冻的时候,拥有跟传统解冻液相同的升温速度和安全性的同时,避免胚胎离开载体,增加了操作的便利性。有效减少了显微镜的操作次数,使自动化玻璃化冷冻和自动化解冻衔接更加顺畅和方便。本专利技术还具有设备结构简单,易于实施,成本低廉等特点。

本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:

2.根据权利要求1所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,油的温度为30~40℃。

3.根据权利要求2所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,油的温度为37℃。

4.根据权利要求1~3任一项所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,所述油为植物油、食用油、矿物油、硅油中的一种。

5.根据权利要求4所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,所述油为矿物油。

6.一种卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:

7.根据权利要求6所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,在步骤a中,预热后的油的温度范围为30~40℃。

8.根据权利要求7所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,预热后的油的温度为37℃。

9.根据权利要求6~8任一项所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,所述油为植物油、食用油、矿物油、硅油中的一种。

10.根据权利要求9任一项所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,所述油为矿物油。

>11.根据权利要求6所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,在步骤c、d、e中卵子或胚胎通过玻璃毛细管吸出。

12.根据权利要求6所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,在步骤e之后,将装有培养液的容器移动至培养箱内进行培养复苏。

13.根据权利要求6所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,在步骤b中,载体由液氮取出到浸入油中的时间小于一秒。

14.根据权利要求6所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,在步骤c中,卵子或胚胎被移动至装有稀释液的容器中后,等待三分钟后再转移至装有清洗液的容器中。

15.根据权利要求6所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,在步骤d中,卵子或胚胎被移动至装有清洗液的容器中后,等待五分钟后再转移至装有培养液的容器中。

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【技术特征摘要】

1.一种卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:

2.根据权利要求1所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,油的温度为30~40℃。

3.根据权利要求2所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,油的温度为37℃。

4.根据权利要求1~3任一项所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,所述油为植物油、食用油、矿物油、硅油中的一种。

5.根据权利要求4所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,所述油为矿物油。

6.一种卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:

7.根据权利要求6所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,在步骤a中,预热后的油的温度范围为30~40℃。

8.根据权利要求7所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,预热后的油的温度为37℃。

9.根据权利要求6~8任一项所述的卵子或胚胎的解冻方法,其特征在于,所述油为...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈昊楠舒怡玮
申请(专利权)人:深圳拜尔洛克生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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