【技术实现步骤摘要】
本申请涉及分子生物学，特别是涉及一种检测tuba1c突变的试剂、试剂盒及其应用。
技术介绍
1、国际辅助生育技术监控委员会发布的报告显示，自1978年以来，辅助生殖技术解决了全球800多万例生育问题，促进了人口增长。但是到现在为止，仍有很大一部分妇女在辅助生殖技术的帮助下依旧不能怀孕。
2、目前，体外受精（ivf）/卵胞浆内单精子注射（icsi）技术的成功率约为30%~40%，大部分病人反复失败的原因尚不明确。了解卵母细胞减数分裂成熟、受精及早期胚胎发育的关键事件、研究卵母细胞向胚胎转变的机制，都是提高辅助生殖技术成功率的关键。
3、临床上，可以通过对不孕患者的致病基因进行检测，即基因诊断（genediagnosis）技术明确患者遗传病因，进而选择合适的辅助生殖助孕方式，保证生育健康后代。目前对于表型明确且致病基因已知的患者，主要通过pcr-sanger测序技术对单个基因外显子区及其侧翼序列进行基因检测。而对于未明确致病基因突变的患者，目前首选采用包括全外显子组测序在内的新一代测序技术，该技术具有检测的通量高，可同时检测基因组中所有的编码基因。然而，据不完全统计，通过标准化的生物学信息学分析筛选候选致病变异并验证阳性的患者比例仍不足10%。因此，明确致病基因并开发相应的辅助诊断试剂盒对于这类患者的生育治疗具有重要的意义。
技术实现思路
1、基于此，本申请实施例提供了一种检测tuba1c突变的试剂、试剂盒及其应用。技术方案包括：
2、根据本申请的第
3、在其中一个实施例中，所述试剂包括如下引物对中的一对或多对：
4、核苷酸序列如seq id no:1~2所示的引物对；以及
5、核苷酸序列如seq id no:3~4所示的引物对。
6、在其中一个实施例中，所述试剂通过如下方法中的一种或多种方法实现对突变的检测：
7、普通pcr扩增法、测序法和实时荧光定量pcr法。
8、根据本申请的第二方面，提供了一种检测tuba1c突变的试剂，所述试剂包括如下引物对中的一对或多对：
9、核苷酸序列如seq id no:1~2所示的引物对；以及
10、核苷酸序列如seq id no:3~4所示的引物对。
11、根据本申请的第三方面，提供了一种检测tuba1c突变的试剂盒，所述试剂盒包括上述的试剂。
12、在其中一个实施例中，所述试剂盒还包括阴性对照品、阳性对照品、核酸提取试剂、pcr扩增试剂、测序试剂以及电泳检测试剂中的一种或多种。
13、根据本申请的第四方面，提供了一种检测tuba1c突变的方法，包括如下步骤：
14、以待测样本的dna为模板，使用上述的试剂进行pcr扩增，得到扩增产物；及
15、对所述扩增产物进行分析，以确定所述待测样本的dna中tuba1c的突变情况。
16、在其中一个实施例中，所述分析的步骤包括：
17、分析所述待测样本的dna中tuba1c是否发生c.1072c>t突变和/或c.1330_1330del突变。
18、在其中一个实施例中，所述分析包括如下步骤：
19、对所述扩增产物进行测序，得到序列信息；以及
20、将所述序列信息与野生型tuba1c的mrna进行比对。
21、在其中一个实施例中，所述待测样本包括外周血、唾液和毛发中的一种或多种。
22、与传统技术相比，本申请具有如下有益效果：
23、本申请通过研究发现2例分别携带tuba1c c.1072c>t突变和tuba1c c.1330_1330del突变的早期胚胎发育阻滞患者，临床上均表现为不孕。通过检测上述突变位点，能够为明确胚胎发育阻滞患者的遗传病因提供新的思路，为临床上选择合适的助孕手段提供新的参考。
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1.一种检测TUBA1C突变的试剂在制备诊断胚胎发育阻滞的产品中的应用，其特征在于，所述试剂包括检测c.1072C>T的试剂和检测c.1330_1330del的试剂中的一种或多种。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂包括如下引物对中的一对或多对：
3.根据权利要求1至2任一项所述的应用，其特征在于，所述试剂通过如下方法中的一种或多种方法实现对突变的检测：
4.一种检测TUBA1C突变的试剂，其特征在于，所述试剂包括如下引物对中的一对或多对：
5.一种检测TUBA1C突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1~3任一项所述的试剂。
6.根据权利要求5所述的检测TUBA1C突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阴性对照品、阳性对照品、核酸提取试剂、PCR扩增试剂、测序试剂以及电泳检测试剂中的一种或多种。
7.一种检测TUBA1C突变的方法，其特征在于，包括如下步骤：
8.根据权利要求7所述的检测TUBA1C突变的方法，其特征在于，所述分析的步骤包括：
9.
10.根据权利要求7~8任一项所述的检测TUBA1C突变的方法，其特征在于，所述待测样本包括外周血、唾液和毛发中的一种或多种。
...【技术特征摘要】
1.一种检测tuba1c突变的试剂在制备诊断胚胎发育阻滞的产品中的应用，其特征在于，所述试剂包括检测c.1072c>t的试剂和检测c.1330_1330del的试剂中的一种或多种。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂包括如下引物对中的一对或多对：
3.根据权利要求1至2任一项所述的应用，其特征在于，所述试剂通过如下方法中的一种或多种方法实现对突变的检测：
4.一种检测tuba1c突变的试剂，其特征在于，所述试剂包括如下引物对中的一对或多对：
5.一种检测tuba1c突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1~3任一项所述的试剂。<...
【专利技术属性】
技术研发人员：郑伟，万纤，胡慧玲，孙嘉琦，林戈，
申请(专利权)人：中信湘雅生殖与遗传专科医院有限公司，
类型：发明
国别省市：
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