System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种基于纳米孔的环状RNA疫苗纯度的定量快速检测方法技术_技高网

一种基于纳米孔的环状RNA疫苗纯度的定量快速检测方法技术

技术编号:40351061 阅读:8 留言:0更新日期:2024-02-09 14:35
本发明专利技术公开了一种基于纳米孔的环状RNA疫苗纯度的定量快速检测方法,涉及生物检测技术领域。本发明专利技术采用纳米孔芯片用于检测环状RNA或线性RNA,由于环状RNA和线性RNA具有不同的二维结构,两种分子在穿过纳米孔时会产生不同的过孔电信号,环状RNA在穿过纳米孔时引起的电流变化幅值较大且过孔时间较长,而线性RNA穿过纳米孔引起的电流变化幅值较小,通过对一定时间范围内的过孔事件的信号进行统计分析,可鉴定环状RNA和线性RNA,应用于环状RNA疫苗纯度的定量检测。该检测方法操作简单,无需PCR扩增等样本预处理步骤即可有效实现环状RNA纯度的定量检测,且样本需求量小,加样几分钟即可获得结果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测,具体而言,涉及一种基于纳米孔的环状rna疫苗纯度的定量快速检测方法。


技术介绍

1、人工合成的rna疫苗通常为长度约一千个碱基的环状rna分子,然而由于合成的纯度问题,疫苗样本中会包含未合成的线性rna,影响着rna疫苗的合成产率及纯度。

2、然而,疫苗的纯度对其效果影响很大,因此,对合成的疫苗样品中环状rna分子纯度的定量检测,对开发rna疫苗领域具有极其重要的意义。当前,通常使用的rna疫苗纯度分析方法为色谱或基因测序,然而上述两种方法检测过程复杂,使用成本较高,并且检测耗时较长。

3、鉴于此,特提出本专利技术。


技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种基于纳米孔的环状rna疫苗纯度的定量快速检测方法。

2、本专利技术是这样实现的:

3、第一方面,本专利技术实施例提供了环状rna疫苗纯度的检测方法,其包括以下步骤:采用纳米孔芯片对待测样本进行检测,在纳米孔的一侧施加设定电压以驱使样本中的环状rna分子或线性rna分子过孔,提取待测样本在设定时间内的过孔事件的数量和每个过孔事件引起的电流变化幅值;基于线性rna分子在所述设定电压条件下过孔的最大电流变化幅值δiline,对所述待测样本在设定时间范围内的过孔事件进行判断,将所述待测样本的过孔事件中电流变化幅值>所述δiline的过孔事件作为环状rna分子的过孔事件;将所述待测样本的过孔事件中电流变化幅值≤所述δiline所述的过孔事件作为线性rna分子的过孔事件。

4、第二方面,本专利技术实施例提供了检测试剂在环状rna疫苗纯度的检测或鉴定环状rna分子或线性rna分子中的应用,所述检测试剂包括:前述实施例中所述的纳米孔芯片。

5、第三方面,本专利技术实施例提供了检测试剂在制备用于环状rna疫苗纯度的检测或鉴定环状rna分子或线性rna分子的产品中的应用,所述检测试剂包括:前述实施例中所述的纳米孔芯片。

6、本专利技术具有以下有益效果:

7、本专利技术采用纳米孔芯片用于检测环状rna或线性rna,由于环状rna和线性rna具有不同的二维结构,两种分子在穿过纳米孔时会产生不同的过孔电信号,环状rna在穿过纳米孔时引起的电流变化幅值较大且过孔时间较长,而线性rna穿过纳米孔引起的电流变化幅值较小,通过对一定时间范围内的过孔事件的信号进行统计分析,可鉴定环状rna和线性rna,并进一步实现环状rna疫苗纯度的定量检测。该检测方法操作简单,无需pcr扩增等样本预处理步骤即可有效实现环状rna纯度的定量检测,且样本需求量小,加样几分钟即可获得结果。

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【技术保护点】

1.一种环状RNA疫苗纯度的检测方法,其特征在于,其包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述纳米孔芯片含有电介质薄膜,所述电介质薄膜上开设有纳米孔;

3.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于,所述纳米孔芯片还含有具有开孔的支撑基片,所述支撑基片与所述电介质薄膜的下表面相连,所述开孔与所述纳米孔相通;

4.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,所述开孔的外径≥所述纳米孔的孔径;

5.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述设定电压为50~300mV。

6.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述设定时间为1s~30min。

7.根据权利要求1~6任一项所述的检测方法,其特征在于,采用纳米孔芯片对待测样本进行检测时,所述纳米孔芯片的纳米孔两侧灌注有电解质溶液,所述纳米孔两侧施加有正负电极;

8.根据权利要求1~6任一项所述的检测方法,其特征在于,所述检测方法还包括:获取环状RNA分子在设定时间范围内的过孔事件的数量与待测样本在设定时间内的数量的比值,以获得环状RNA的纯度。

9.检测试剂在环状RNA疫苗纯度的检测或鉴定环状RNA分子或线性RNA分子中的应用,其特征在于,所述检测试剂包括:权利要求1~8任一项中所述的纳米孔芯片;

10.检测试剂在制备用于环状RNA疫苗纯度的检测或鉴定环状RNA分子或线性RNA分子的产品中的应用,其特征在于,所述检测试剂包括:权利要求1~8任一项中所述的纳米孔芯片;

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【技术特征摘要】

1.一种环状rna疫苗纯度的检测方法,其特征在于,其包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述纳米孔芯片含有电介质薄膜,所述电介质薄膜上开设有纳米孔;

3.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于,所述纳米孔芯片还含有具有开孔的支撑基片,所述支撑基片与所述电介质薄膜的下表面相连,所述开孔与所述纳米孔相通;

4.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,所述开孔的外径≥所述纳米孔的孔径;

5.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述设定电压为50~300mv。

6.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述设定时间为1s~30min。

7.根据权利要求1~6任一项所述的检...

【专利技术属性】
技术研发人员:朱立博谭生伟杨海平高兵谭政
申请(专利权)人:苏州丽纳芯生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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