【技术实现步骤摘要】
【】本专利技术涉及植物培养基制备，具体涉及利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法及组培工艺。
技术介绍
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技术介绍
1、植物组织培养所用的培养基，一般均采用琼脂作凝固剂的固体培养基。因此在工厂化育苗中，琼脂量需求较大、而且价格昂贵成本高，严重影响育苗的经济效益。此外，常规的植物组培常见问题有如下情况：
2、植物组织培养中，对外植体进行切割时，伤口处的细胞被破坏，这种分隔被打破，在氧气存在的条件下，多酚氧化酶(ppo)将酚类化合物氧化成褐色的醌类化合物，再在酪氨酸酶等酶的作用下，外植体细胞中的蛋白质聚合，进而引起细胞生长停滞甚至死亡；所以现有的植物培养基褐变率高，进而可能导致组培失败；而且组培植株体内可溶性蛋白和总糖的含量一般低于野生植株，同时组培植株的根系直接影响到植株的强弱，然而组培植株体的根系经常出现发育不良的概率。
3、鉴于此，本案专利技术人对上述问题进行深入研究，遂有本案产生。
技术实现思路
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技术实现思路
1、本专利技术要解决现有植物组织培养基存在培育成本高、组培时褐变率高的技术问题，在于提供一种利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法及组培工艺。
2、本专利技术是这样实现的：一种利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法，包括如下步骤：
3、步骤一：制备培养基母液；
4、步骤二：制备改性琼脂生产副产物：从过滤板卸下琼脂生产副产物，加入开水浸泡使得琼脂生产副产物有一定的流动状态
5、步骤三：植物组织培养基制作：称取改性琼脂生产副产物，倒入培养基母液中，改性琼脂生产副产物的添加比例为总培养基溶液的5～20％，100℃高温加热搅拌，之后培养基趁热分装于组培瓶；
6、步骤四：成品：将组培瓶盖上盖子，在110-125℃温度下高压灭菌30分钟，最后冷却至常温，即得植物组织培养基。
7、进一步的，所述琼脂生产副产物的成分包括：
8、珍珠岩40-55％
9、琼脂10-15％
10、纤维10-20％
11、水10-40％。
12、进一步的，在步骤二中，打浆时，温度控制在90～100℃。
13、进一步的，在步骤二中，所述纤维素酶的质量分数为0.1～0.6％；水解时长为6～8小时。
14、进一步的，在步骤三中，所述改性琼脂生产副产物的添加比例为总培养基溶液的8-14％。
15、进一步的，在步骤四中，灭菌温度为121℃。
16、进一步的，在步骤一中，所述培养基母液的制备方法包括如下步骤：
17、步骤1.1：根据ms、white、b5、sh、n6、nn、dkw等植物培养基母液的配制方法，配制得到母液a；
18、步骤1.2：称取100mg植物生长调节物质，水浴加热，最后定容至100ml，即得1mg/ml的母液b；
19、步骤1.3：称取母液a放入烧杯中，量取所需浓度的母液b加入烧杯中，摇荡均匀，添加2％～4％蔗糖到配制的溶液中，搅拌溶解；
20、步骤1.4：用酸度计或ph试纸测溶液ph值，用氢氧化钠或者盐酸调节ph值，直到培养基溶液的ph为6～8为止；即得所需培养基母液。
21、进一步的，在步骤1.2中，所述植物生长调节物质包括萘乙酸、6-苄氨基嘌呤中的一种或者两种；萘乙酸水浴加热时使用少量乙醇溶解，6-苄氨基嘌呤水浴加热时使用少量naoh溶液溶解。
22、另一方面，一种组培工艺，使用上述利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法制得植物组织培养基；然后接种、培养、移栽。
23、本专利技术的优点在于：
24、1、本专利技术使用改性琼脂生产副产物替琼脂制作培养基，可用于在ms、white、b5、sh、n6、nn、dkw等植物培养组织基中做凝固剂，大大降低了制作成本，提高了经济效益。
25、2、本专利技术的改性琼脂生产副产物含有珍珠岩和改性纤维等，可作为吸附剂吸附褐变产生的醌类化合物，同时培养基环境下褐变产生的有害物质能够较快被转移走，减轻毒害作用和进一步阻止褐变；进而降低组培的褐变率。改性琼脂生产副产物添加浓度越高抗褐变效果越好。
26、3、本专利技术的改性琼脂生产副产物作用类似于腐殖土，能够吸附植物生长调节物质与其他有利生根的物质，有利于根系生长的条件，故能够促进组培苗生根。
27、4、由于本专利技术的改性琼脂生产副产物能够促进根的形成与生长，也形成了较强的吸收水分和无机盐等营养物质的能力，为蛋白质和糖类的生物合成提供丰富的原料；同时酶解后的纤维也为其提供丰富的原料；进而可明显提高组培植株体内的可溶性蛋白和总糖的含量。
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1.一种利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法，其特征在于：包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法，其特征在于：在步骤二中，所述琼脂生产副产物的成分包括：
3.如权利要求2所述的利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法，其特征在于：在步骤二中，打浆时，温度控制在90～100℃。
4.如权利要求2所述的利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法，其特征在于：在步骤二中，所述纤维素酶的质量分数为0.1～0.6％；水解时长为6～8小时。
5.如权利要求2所述的利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法，其特征在于：在步骤三中，所述改性琼脂生产副产物的添加比例为总培养基溶液的8-14％。
6.如权利要求1所述的利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法，其特征在于：在步骤四中，灭菌温度为121℃。
7.如权利要求1所述的利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法，其特征在于：在步骤一中，所述培养基母液的制备方法包括如下步骤：
8.如权利要求7所述的利用琼脂生产副产物制作植
9.一种组培工艺，其特征在于：使用权利要求2-8中任意一项所述利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法制得植物组织培养基；然后接种、培养、移栽。
...【技术特征摘要】
1.一种利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法，其特征在于：包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法，其特征在于：在步骤二中，所述琼脂生产副产物的成分包括：
3.如权利要求2所述的利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法，其特征在于：在步骤二中，打浆时，温度控制在90～100℃。
4.如权利要求2所述的利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法，其特征在于：在步骤二中，所述纤维素酶的质量分数为0.1～0.6％；水解时长为6～8小时。
5.如权利要求2所述的利用琼脂生产副产物制作植物组织培养基方法，其特征在于：在步骤三中，所述改性琼脂生产副产物的添加比例为总培养基溶液的8-14％。<...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵守辉，林志魁，
申请(专利权)人：福建环海生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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