【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中药抗病毒活性成分筛选，特别是涉及一种以病毒为载体的亲和分离系统筛选抗病毒中药活性成分的方法和应用。
技术介绍
1、流感病毒是人类最常见的病原体之一，而季节性甲型流感病毒(iav)感染是发达国家肺炎相关死亡的最常见原因。在2009年流感大流行期间，流感病毒感染上升为美国第九大死因。对抗流感病毒感染的手段主要是疫苗和抗病毒药物。由于血凝素的抗原漂移，季节性流感疫苗需要每年更新一次，而且由于对流行毒株的年度预测不准确，季节性流感疫苗效果欠佳。目前，用于治疗h1n1感染的主要药物有神经氨酸酶抑制剂(奥司他韦、扎那米韦、帕拉米韦)，m2离子通道抑制剂(金刚烷胺)，病毒rna依赖性rna聚合酶抑制剂(法匹拉韦、巴洛沙韦)，但由于耐药和副作用，这些药物的使用受到限制。寻找抗病毒药物是迫在眉睫的。
2、中药是提供丰富化学骨架的天然宝库，已成为药物先导化合物的主要来源。由于中药中含有大量的物质，生物活性成分的筛选和分析非常困难。因此，需要进一步开发筛选方法，以有效地检测中药中针对病毒的活性成分。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种以病毒为载体的亲和分离系统筛选抗病毒中药活性成分的方法和应用，以解决上述现有技术存在的问题。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
3、本专利技术提供一种以病毒为载体的亲和分离系统筛选抗病毒中药活性成分的方法，包括以下步骤：
4、(1)将中药提取液与病毒混合孵育，其中活性成分与病毒结合形成结
5、(2)通过高效液相色谱法对步骤(1)筛选出的活性成分进行鉴定。
6、优选的是，所述病毒包括h1n1。
7、优选的是，所述中药提取液选自诃子提取液。
8、优选的是，所述离心和再次离心具体为通过含再生纤维素膜的离心过滤器进行，条件为4℃14000×g离心25min。
9、优选的是，所述超声分离具体为加入80％甲醇水溶液进行超声，并且在分离之后经过离心后取上清液。
10、优选的是，所述水洗为用300μl醋酸铵缓冲液水洗2次。
11、优选的是，所述评估是否为特异性结合具体为以无病毒溶液为对照，分析待测样品相对于对照组面积显著增加的色谱峰，若待测样品与对照组峰面积差异百分比大于20％，表明具有特异性结合，则是与病毒结合的活性成分。
12、优选的是，还包括向病毒溶液中加入病毒表面蛋白抑制剂以竞争抑制或非竞争抑制，分析活性成分的作用靶点的步骤以及通过药理实验验证所筛选活性成分药效及靶点的步骤。
13、优选的是，所述病毒表面蛋白抑制剂包括扎那米韦、奥司他韦酸、金刚烷胺或ing-1466。
14、优选的是，所述分析活性成分的作用靶点具体为进行高效液相色谱分析，以加入病毒表面蛋白抑制剂为试验组，以未添加病毒表面蛋白抑制剂为对照组，评估各成分的色谱峰面积差异，若色谱峰面积差异百分比小于-10％，表明具有特异性结合，则为与靶蛋白结合的生物活性化合物。
15、本专利技术公开了以下技术效果：
16、本专利技术提供了一种快速有效的筛选方法，通过离心超滤从中药中检测潜在的病毒靶向成分，用于治疗病毒性疾病。
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1.一种以病毒为载体的亲和分离系统筛选抗病毒中药活性成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述病毒包括H1N1。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述中药提取液选自诃子提取液。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述离心和再次离心具体为通过含再生纤维素膜的离心过滤器进行，条件为4℃14000×g离心25min。
5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述超声分离具体为加入80％甲醇水溶液进行超声，并且在分离之后经过离心后取上清液。
6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述水洗为用300μL醋酸铵缓冲液水洗2次。
7.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，所述评估是否为特异性结合具体为以无病毒溶液为对照，分析待测样品相对于对照组面积显著增加的色谱峰，若待测样品与对照组峰面积差异百分比大于20％，表明具有特异性结合，则是与病毒结合的活性成分。
8.根据权利要求1-7任一项所述的方法，其特
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述病毒表面蛋白抑制剂包括扎那米韦、奥司他韦酸、金刚烷胺或ING-1466。
10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于，所述分析活性成分的作用靶点具体为进行高效液相色谱分析，以加入病毒表面蛋白抑制剂为试验组，以未添加病毒表面蛋白抑制剂为对照组，评估各成分的色谱峰面积差异，若色谱峰面积差异百分比小于-10％，表明具有特异性结合，则为与靶蛋白结合的生物活性化合物。
...【技术特征摘要】
1.一种以病毒为载体的亲和分离系统筛选抗病毒中药活性成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述病毒包括h1n1。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述中药提取液选自诃子提取液。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述离心和再次离心具体为通过含再生纤维素膜的离心过滤器进行，条件为4℃14000×g离心25min。
5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述超声分离具体为加入80％甲醇水溶液进行超声，并且在分离之后经过离心后取上清液。
6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述水洗为用300μl醋酸铵缓冲液水洗2次。
7.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，所述评估是否为特异性结合具体为以无病毒溶液为...
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