【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于天然药物领域，涉及γ-吡喃酮类化合物asperpyrone a及其制备方法与用途，具体明涉及从微生物中，特别是从真菌发酵产物中获得的全新骨架γ-吡喃酮类化合物asperpyrone a或其药用盐类及其在制备预防和/或治疗血液肿瘤疾病的药物中的用途。
技术介绍
1、恶性肿瘤作为全球较大的公共卫生问题之一，极大地危害人类的健康，并将成为新世纪人类的第一杀手。血液肿瘤是起源于淋巴造血系统的恶性肿瘤，是一类高度异质性的疾病，其包括但不限于白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤等。由于造血系统和免疫系统遍布全身，一旦发病即属于全身系统性疾病，没有可切除病灶，局部治疗无效，导致治疗手段非常有限，既往的治疗方法以放化疗、分子靶向治疗与骨髓移植为主。除少数成功骨髓移植患者可能治愈外，大部分血液肿瘤患者预后不佳，总体生存率较低，并且复发率高。
2、化学药物治疗作为治疗血液肿瘤的重要手段之一，在近三十年已经有了巨大的发展和进步，比如多发性骨髓瘤治疗药物蛋白酶体抑制剂硼替佐米、淋巴瘤治疗药物环磷酰胺、阿霉素、长春新碱等。但是这些抗肿瘤药也存在许多不良反应，比如脱发、呕吐、快速产生耐药性等等，导致化学药物无法达到预期的治疗效果。因此，新的抗肿瘤药物的研究与开发是目前药学领域的热点和难点问题之一。
3、海洋来源微生物的次级代谢产物是新药的重要来源，近年来，人们已从海绵共附生真菌中发现了大量具有新颖结构的化合物，包括生物碱、聚酮、萜类及多肽类等，其中一些化合物具有显著的抗肿瘤、抗疟原虫、抗菌及神经保护等生物活性。并且微生物次级代
技术实现思路
1、专利技术人利用单菌株多产物策略(osmac)，对来自南海蜂海绵来源真菌榴红曲霉aspergillus puniceus(菌株保藏编号：mccc 3a00856)在不同培养基(包括pdb培养基，ypd培养基及大米培养基)下进行培养，借助hplc-dad-ms分析，以及antibase数据库分析排重，发现该菌株中可能含有一类新的化学成分。以uv和lc-ms导向，综合使用各种色谱手段对可能新结构实现了定向分离。采用各种波谱学方法，以及计算13c nmr和单晶x-ray实验确定其为一类全新骨架、具有独特的6/6/6/6/6环系的γ-吡喃酮类化合物asperpyrone a，并发现化合物asperpyrone a对多种血液肿瘤具有较强的抑制作用，因此，该化合物在治疗人血液肿瘤相关疾病方面具有较好的应用前景。同时，本专利技术化合物asperpyrone a的制备方法工艺简单，用时短，大大降低药品的成本，适合大规模生产。
2、本专利技术的目的是提供结构如式i所示的用作医药用途的γ-吡喃酮类化合物或其药用盐：
3、
4、化合物asperpyrone a的分子式为：c22h18o11，相对分子量为：458。
5、所述的γ-吡喃酮类化合物的药用盐为γ-吡喃酮类化合物与无机酸、有机酸、氨基酸或磺酸形成的盐；所述的无机酸为盐酸或硫酸；所述的有机酸为乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、马来酸、草酸、琥珀酸、苯甲酸、酒石酸、富马酸、扁桃酸、抗坏血酸或苹果酸；所述的氨基酸为丙氨酸、天冬氨酸或赖氨酸；所述的磺酸为甲磺酸或对甲苯磺酸。
6、本专利技术所述的γ-吡喃酮类化合物是从南海蜂海绵来源真菌aspergilluspuniceus(菌株保藏编号：mccc 3a00856)大米发酵产物中首次分离得到的。
7、本专利技术的另一个目的是提供一种所述的γ-吡喃酮类化合物的制备方法，包括以下步骤：
8、真菌aspergillus puniceus经大米发酵后得到大米发酵产物，大米发酵产物用95％乙醇超声提取2次，再用50％乙醇超声提取1次，将提取物进行过滤，合并滤液，滤液减压浓缩除去乙醇，得到混悬液，混悬液依次使用石油醚、乙酸乙酯萃取，将萃取液进行减压浓缩，分别得到石油醚部位萃取物、乙酸乙酯部位萃取物；乙酸乙酯部位萃取物进行mci柱层析，以etoh-h2o系统为洗脱剂进行梯度洗脱，得到45个组分，分别记为组分m1-组分m45；组分m16进行sephadex lh-20柱层析，以甲醇为洗脱剂进行洗脱，得到8个亚组分，分别记为亚组分m16-1-亚组分m16-8；亚组分m16-4经半制备rp-hplc(半制备反相高效液相色谱)纯化得到式i所示的γ-吡喃酮类化合物。
9、优选的，所述的大米发酵产物的制备：在温度28℃下，把菌株aspergilluspuniceus(菌株保藏编号：mccc 3a00856)接种在pda培养基平皿上，28℃培养7天；将复苏的菌株接种到100ml灭菌后的pdb种子培养基中，在温度28℃下，以转速180rpm培养3天，得到种子培养液；将大米和去离子水按照质量比1:1混合得到大米培养基，按照种子培养液和大米培养基的体积质量比为1:20ml/g，将种子培养液接种到大米培养基中，在温度28℃下培养30天，得到大米发酵物。
10、优选的，每次超声提取的时间为40min。
11、优选的，用95％乙醇超声提取时，95％乙醇和大米发酵物的体积比为3:1。用50％乙醇超声提取时，50％乙醇和大米发酵物的体积比为3:1。
12、优选的，混悬液使用石油醚萃取3次，每次萃取时，石油醚和混悬液的体积比为3:1；混悬液使用乙酸乙酯萃取3次，每次萃取时，乙酸乙酯和混悬液的体积比为3:1。
13、优选的，进行mci柱层析时，以mci gel chp20/p120为填料，所述的etoh-h2o系统依次为h2o、10％etoh、20％etoh、30％etoh、45％etoh、60％etoh、80％etoh和100％etoh，利用hplc对各流分进行检测，并对相似组分进行合并，最终得到45个组分(组分m1-m45)。
14、优选的，半制备rp-hplc的色谱柱为capcell pak pfp，规格为：5μm，10×250mm；流动相为：15％acn-0.1％tfa水溶液，等度洗脱，流速：1.5ml/min。
15、本专利技术以3株血液肿瘤细胞株(namalwa,nalm-6,raji)为模型，测定所述的γ-吡喃酮类化合物对肿瘤细胞增殖的抑制作用。实验结果表明，化合物具有较强的细胞毒性，对三株细胞的ic50分别为5.28、0.38和3.59μmol/l，表明所述的γ-吡喃酮类化合物或其药用盐对多种人血液肿瘤细胞具有强抑制活性，可用作制备抗血液肿瘤相关疾病的药物。与现有的同类抗肿瘤药物相比，所述的γ-吡喃酮类化合物具有更加优越的治疗效果。
16、本专利技术的另一个目的是提供所述的γ-吡喃酮类化合物或其药用盐在制备预防和/或治疗血液肿瘤疾病的药物中的用途。
17、所述的血液肿瘤疾病为白血病或淋巴瘤。
18、本专利技术的另一个目的是提供一种药物组合物，所述的药物组合物以所述的γ-吡喃酮类化合物或其药用盐作为本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.结构如式I所示的γ-吡喃酮类化合物或其药用盐：
2.根据权利要求1所述的γ-吡喃酮类化合物或其药用盐，其特征在于：所述的γ-吡喃酮类化合物的药用盐为γ-吡喃酮类化合物与无机酸、有机酸、氨基酸或磺酸形成的盐。
3.根据权利要求2所述的γ-吡喃酮类化合物或其药用盐，其特征在于：所述的无机酸为盐酸或硫酸；所述的有机酸为乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、马来酸、草酸、琥珀酸、苯甲酸、酒石酸、富马酸、扁桃酸、抗坏血酸或苹果酸；所述的氨基酸为丙氨酸、天冬氨酸或赖氨酸；所述的磺酸为甲磺酸或对甲苯磺酸。
4.一种权利要求1所述的γ-吡喃酮类化合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：真菌Aspergillus puniceus经大米发酵后得到大米发酵产物，大米发酵产物用95％乙醇超声提取2次，再用50％乙醇超声提取1次，将提取物进行过滤，合并滤液，滤液减压浓缩除去乙醇，得到混悬液，混悬液依次使用石油醚、乙酸乙酯萃取，将萃取液进行减压浓缩，分别得到石油醚部位萃取物、乙酸乙酯部位萃取物；乙酸乙酯部位萃取物进行MCI柱层析，以EtOH-H2O系统为洗脱剂进行梯度洗脱，得到
5.根据权利要求4所述的γ-吡喃酮类化合物的制备方法，其特征在于：进行MCI柱层析时，以MCI GEL CHP20/P120为填料。
6.根据权利要求4所述的γ-吡喃酮类化合物的制备方法，其特征在于：半制备RP-HPLC的色谱柱为Capcell Pak PFP，规格为：5μm，10×250mm；流动相为：15％乙腈-0.1％三氟乙酸水溶液，等度洗脱，流速：1.5mL/min。
7.权利要求1所述的γ-吡喃酮类化合物或其药用盐在制备预防和/或治疗血液肿瘤疾病的药物中的用途。
8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于：所述的血液肿瘤疾病为白血病或淋巴瘤。
9.一种药物组合物，其特征在于：所述的药物组合物以权利要求1所述的γ-吡喃酮类化合物或其药用盐作为活性成分或主要活性成分，与药学上可接受的载体制成的制剂。
10.根据权利要求9所述的药物组合物，其特征在于：所述的制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、散剂、膏剂、混悬剂、注射剂、粉针剂、栓剂、霜剂、滴剂或贴剂。
...【技术特征摘要】
1.结构如式i所示的γ-吡喃酮类化合物或其药用盐：
2.根据权利要求1所述的γ-吡喃酮类化合物或其药用盐，其特征在于：所述的γ-吡喃酮类化合物的药用盐为γ-吡喃酮类化合物与无机酸、有机酸、氨基酸或磺酸形成的盐。
3.根据权利要求2所述的γ-吡喃酮类化合物或其药用盐，其特征在于：所述的无机酸为盐酸或硫酸；所述的有机酸为乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、马来酸、草酸、琥珀酸、苯甲酸、酒石酸、富马酸、扁桃酸、抗坏血酸或苹果酸；所述的氨基酸为丙氨酸、天冬氨酸或赖氨酸；所述的磺酸为甲磺酸或对甲苯磺酸。
4.一种权利要求1所述的γ-吡喃酮类化合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：真菌aspergillus puniceus经大米发酵后得到大米发酵产物，大米发酵产物用95％乙醇超声提取2次，再用50％乙醇超声提取1次，将提取物进行过滤，合并滤液，滤液减压浓缩除去乙醇，得到混悬液，混悬液依次使用石油醚、乙酸乙酯萃取，将萃取液进行减压浓缩，分别得到石油醚部位萃取物、乙酸乙酯部位萃取物；乙酸乙酯部位萃取物进行mci柱层析，以etoh-h2o系统为洗脱剂进行梯度洗脱，得到45个组分，分别记为组分m1-组分m45；组分m16进行sephadex lh-20柱层析，以甲醇...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈明华，李珂，肖同美，张婷婷，司书毅，武京帅，苏冰洁，陈渝川，赵铭暄，闫璧滢，常珊珊，
申请(专利权)人：中国医学科学院医药生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：
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