【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种单克隆抗体或其抗原结合片段及其抗肿瘤的用途。
技术介绍
1、肺癌目前占世界癌症死因的第一位，是世界上发病率和死亡率较高的恶性肿瘤之一。对于肺癌的治疗门类众多，但肺癌的预后仍较差，总体治疗效果目前仍不理想。由于肺癌的早期诊断尚有困难，又缺乏有效的治疗方法，因此选择一种简单易行，成模时间短，成模率高的肺癌动物模型对更加深入探讨肺癌的致癌因素、发病机制以及制定有效的治疗手段及防治措施是十分必要的。
2、lewis肺癌已被广泛应用于许多重要的研究。lewis肺癌细胞株(llc)最早是从小鼠lewis肺癌中分离到的适应培养细胞克隆系。c57bl/6小鼠具有正常的免疫功能，价格低廉、耐受性强，模型成熟，常用于lewis细胞的肺癌转移建模型构建。llc细胞在c57bl/6小鼠体内保持高度致瘤性和肺转移性，llc细胞采用基因工程技术修饰后可表达荧光素酶或绿色荧光蛋白，达到肿瘤细胞在活体内可视化效果(bertram js,janik p.establishment ofa cloned line of lewis lung carcinoma cells adapted to cell culture[j].cancerlett，1980,11(1):63-73；zhu h,et al.a simple bioluminescence imaging method forstudying cancer cell growth and metastasis after subcutaneous i
3、随着噬菌体展示技术的出现和基因工程抗体技术的发展，噬菌体抗体库技术成为一种制备单克隆抗体的新方法。目前大多数的噬菌体抗体库为免疫噬菌体库，通过免疫后动物体内的抗体水平提高，更有利于筛选到针对特异性抗原的抗体，对后续诊断及治疗效果更有优势(许静，张磊等，b3hm细胞免疫小鼠脾细胞scfv噬菌体展示文库的构建及表达，中国生物工程杂志，2007，27(7)：12～16)。
4、目前尚未见关于ll/2-luc2细胞免疫动物筛选出特异性单克隆抗体的报道。本专利技术利用噬菌体展示技术筛选出特异性靶向ll/2-luc2细胞的单克隆抗体，为获得特异性识别肿瘤细胞的抗体和进一步制备抗肿瘤药物提供基础。
技术实现思路
1、本专利技术提供了一种单克隆抗体或其抗原结合片段，该抗体特异性靶向ll/2-luc2肺癌细胞。利用基因工程的方法，在鼠源免疫噬菌体抗体库中淘选并鉴定出能特异性结合ll/2-luc2细胞的单克隆抗体或其抗原结合片段，以达到能有效、快速识别ll/2-luc2肺癌细胞的目的，为获得特异性靶向肿瘤细胞的单克隆抗体提供了思路和方法。
2、为实现本专利技术的目的提供了如下实施方案。
3、本专利技术的一种单克隆抗体或其抗原结合片段，所述单克隆抗体或抗原结合片段包含重链可变区cdr和轻链可变区cdr，所述重链可变区cdr具有选自seq id no:1～11的氨基酸序列或与其具有至少95％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区cdr具有选自seq idno:12～26的氨基酸序列或与其具有至少95％同一性的氨基酸序列。
4、在一具体实施方案中，本专利技术的一种单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链可变区cdr为cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3，所述轻链可变区cdr为cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3，所述单克隆抗体或其抗原结合片段具有选自下列组的氨基酸序列：
5、1)cdr-h1具有如seq id no:1所示的氨基酸序列、cdr-h2具有如seq id no:4所示的氨基酸序列和cdr-h3具有如seq id no:8所示的氨基酸序列且cdr-l1具有如seq id no:12所示的氨基酸序列、cdr-l2具有如seq id no:16所示的氨基酸序列和cdr-l3具有如seqid no:21所示的氨基酸序列；
6、2)cdr-h1具有如seq id no:1所示的氨基酸序列、cdr-h2具有如seq id no:4所示的氨基酸序列和cdr-h3具有如seq id no:8所示的氨基酸序列且cdr-l1具有如seq id no:13所示的氨基酸序列、cdr-l2具有如seq id no:17所示的氨基酸序列和cdr-l3具有如seqid no:22所示的氨基酸序列；
7、3)cdr-h1具有如seq id no:2所示的氨基酸序列、cdr-h2具有如seq id no:5所示的氨基酸序列和cdr-h3具有如seq id no:9所示的氨基酸序列且cdr-l1具有如seq id no:14所示的氨基酸序列、cdr-l2具有如seq id no:18所示的氨基酸序列和cdr-l3具有如seqid no:23所示的氨基酸序列；
8、4)cdr-h1具有如seq id no:1所示的氨基酸序列、cdr-h2具有如seq id no:6所示的氨基酸序列和cdr-h3具有如seq id no:9所示的氨基酸序列且cdr-l1具有如seq id no:14所示的氨基酸序列、cdr-l2具有如seq id no:18所示的氨基酸序列和cdr-l3具有如seqid no:24所示的氨基酸序列；
9、5)cdr-h1具有如seq id no:1所示的氨基酸序列、cdr-h2具有如seq id no:4所示的氨基酸序列和cdr-h3具有如seq id no:8所示的氨基酸序列且cdr-l1具有如seq id no:15所示的氨基酸序列、cdr-l2具有如seq id no:19所示的氨基酸序列和cdr-l3具有如seqid no:25所示的氨基酸序列；
10、6)cdr-h1具有如seq id no:1所示的氨基酸序列、cdr-h2具有如seq id no:4所示的氨基酸序列和cdr-h3具有如seq id no:11所示的氨基酸序列且cdr-l1具有如seq idno:14所示的氨基酸序列、cdr-l2具有如seq id no:20所示的氨基酸序列和cdr-l3具有如seq id no:26所示的氨基酸序列；
11、7)cdr-h1具有如seq id no:3所示的氨基酸序列、cdr-h2具有如seq id no:7所示的氨基酸序列和cdr-h3具有如seq id no:10所示的氨基酸序列且cdr-l1具有如seq idno:12所示的氨基酸序列、cdr-l2具有如seq id no:16所示的氨基酸序列和cdr-l3具有如seq id no:21所示的氨基酸序列。
12、优选的，上述本专利技术的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述单克隆抗体或抗原结合片段具有选自如se本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种靶向LL/2-Luc2单克隆抗体或其抗原结合片段，所述抗体或抗原结合片段包含重链可变区CDR和轻链可变区CDR，所述可变区CDR具有下述氨基酸序列或与其具有至少95％同一性的氨基酸序列:
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述单克隆抗体或其抗原结合片段具有选自如SEQ ID NO：30所示的氨基酸序列。
3.一种DNA分子，其特征在于编码权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段。
4.一种表达载体，含有权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段的重组载体，其特征在于，将IL-10信号肽-单克隆抗体或其抗原结合片段的表达序列克隆到pcDNA3.4载体的Not1/Xba1酶多克隆位点处。
5.根据权利要求4所述的表达载体，所述重组载体包含权利要求3的DNA分子。
6.一种真核宿主细胞，含有权利要求4或5所述的表达载体。
7.根据权利要求6所述的真核宿主细胞，所述真核宿主细胞为CHO细胞。
8.权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段在制造抗肿瘤药物
9.如权利要求8所述的用途，所述肿瘤为肺癌。
...【技术特征摘要】
1.一种靶向ll/2-luc2单克隆抗体或其抗原结合片段，所述抗体或抗原结合片段包含重链可变区cdr和轻链可变区cdr，所述可变区cdr具有下述氨基酸序列或与其具有至少95％同一性的氨基酸序列:
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述单克隆抗体或其抗原结合片段具有选自如seq id no：30所示的氨基酸序列。
3.一种dna分子，其特征在于编码权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段。
4.一种表达载体，含有权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片...
【专利技术属性】
技术研发人员：曾肆，程昌英，戴萍，叶子峥，杨桂蓉，
申请(专利权)人：四川尚锐生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。