【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药和细胞学，具体而言，本专利技术涉及涉及克来夫定的应用等。
技术介绍
1、克来夫定(clevudine)是合成的l2构型含氟核苷类似物，用于治疗乙型肝炎病毒(hbv)感染，也能与常用抗癌药物联用，对多种癌症的治疗有着协同增效的效果。核苷类似物药物通过抑制乙肝病毒的逆转录酶(rt)活性，来控制病毒复制，从而实现抗病毒治疗。因此理论上，这类药物因只能控制病毒复制而不能将病毒清除，通常需很长时间的使用，甚至终身服用，不但给病人帶來长期经济负担及精神压力，而且即使长期用药，仍有存留hbv的一些基因产物，如hbvsag、hbvx等，诱发肝癌(与近80％肝癌病例有关)。
2、尽管没有现有技术启示，本专利技术人仍旧认为，弄清楚克来夫定对人体各基因的表达水平的影响具有重要意义，能够为克来夫定能否长期用药以及可能的副作用、不良反应或疗效等提供依据。
3、然而，本专利技术人曾经研究了大量与hbv发展相关的基因及其编码蛋白质，尤其是宿主因子，然而，并没有发现其与克来夫定用药的相关性。即使这样，本专利技术人仍旧没有放弃，并时刻留心，终于凭借长期的深入研究，令人意外地，发现克来夫定用药能下调与肿瘤发生、发展正相关的基因的表达水平，上调与肿瘤发生、发展负相关的基因的表达水平，上调与增强或重启免疫系统反应正相关的基因的表达水平，下调与增强或重启免疫系统反应负相关的基因的表达水平，上调与组织修复正相关的基因的表达水平，上调与病毒抑制正相关的基因的表达水平，以及下调与由于氧化应急及脂肪代谢而导致的组织纤维化正相关的基因的表
4、尽管许多基因的用途是已经被明确证明，例如，提髙钟样受体(tlr2，tlr4，tlr6)基因表达,或/和提高tlr4的配体(adapter)ticam基因表达，会剌激固有免疫系统(innateimmunity)及适应性免疫系统(adaptive immune system)；拮抗抑制细胞凋亡因子pd-1、bircs等的表达，会促进肿瘤细胞凋亡或坏死；neat1参与调节免疫系统钟样受体活性；sel1l3(sel-1suppressor of lin-12-like 3)参与乙肝病毒颗粒及病毒蛋白的降解；阿片样生长因子受体(ogfrl1)修复坏死部位，促使被破坏的组识复常，等等，然而，克来夫定用药与之表达的相关性并没有任何公开和启示。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题在于提供克来夫定的新的应用等，包括克来夫定在制备用于药物或试剂中的应用，将克来夫定与细胞一起孵育而进行的方法，检测克来夫定对基因表达的影响的方法等。
2、具体而言，在第一方面，本专利技术提供了克来夫定在制备用于选自如下之一的药物或试剂中的应用：
3、(1)下调与肿瘤发生、发展正相关的基因的表达水平，或上调与肿瘤发生、发展负相关的基因的表达水平，
4、(2)上调与增强或重启免疫系统反应正相关的基因的表达水平，或下调与增强或重启免疫系统反应负相关的基因的表达水平，
5、(3)上调与组织修复正相关的基因的表达水平，
6、(4)上调与病毒抑制正相关的基因的表达水平，或
7、(5)下调与由于氧化应急及脂肪代谢而导致的组织纤维化正相关的基因的表达水平，或上调与由于氧化应急及脂肪代谢而导致的组织纤维化负相关的基因的表达水平。
8、在本文中，术语“药物”、“试剂”、“相关(性)”和“影响”等具有本领域技术人员所熟知的词典含义。例如，试剂可以是进行体外试验所用的物质，相关可以包括正相关和负相关，影响可以包括上调(即增加、增强或促进等)和下调(即减少、降低或抑制等)。
9、在本文中，“选自如下之一”表明是所示选项之间是“或”的关系。例如，本专利技术第一方面的应用可以优选是克来夫定在制备用于上调与病毒抑制正相关的基因的表达水平的药物或试剂中的应用。
10、在第二方面，本专利技术提供了选自如下之一的方法，其包括将克来夫定与细胞一起孵育的步骤：
11、(1)下调与肿瘤发生、发展正相关的基因的表达水平，或上调与肿瘤发生、发展负相关的基因的表达水平，
12、(2)上调与增强或重启免疫系统反应正相关的基因的表达水平，或下调与增强或重启免疫系统反应负相关的基因的表达水平，
13、(3)上调与组织修复正相关的基因的表达水平，
14、(4)上调与病毒抑制正相关的基因的表达水平，或
15、(5)下调与由于氧化应急及脂肪代谢而导致的组织纤维化正相关的基因的表达水平，或上调与由于氧化应急及脂肪代谢而导致的组织纤维化负相关的基因的表达水平。
16、优选本专利技术第二方面的方法是体外方法，如可以是体外细胞水平的方法，不涉及体内治疗。例如，本专利技术第二方面的方法可以优选是体外上调与组织修复正相关的基因的表达水平的方法。在本专利技术的具体实施方式中，细胞是hepg2或hepg2.2.15。
17、优选在本专利技术中，与肿瘤发生、发展正相关的基因或与肿瘤发生、发展负相关的基因是birc2，birc3，rassfs，il6st，rrm2b，pd-1，rad51ap1，scfd1，arhgap11a，trim23，cdhr2，tfpi，dnajb4，或mbnl2基因。
18、优选在本专利技术中，与增强或重启免疫系统反应正相关的基因或与增强或重启免疫系统反应负相关的基因是tlr4，ticam2，tram1,tlr2，tlr6，neat1，stat4，atf2，mapk6，sgms2，c21orf91，il-10，eomes，gbp3，或gbp5基因。
19、优选在本专利技术中，上调与组织修复正相关的基因是ogfrl1基因。
20、优选在本专利技术中，上调与病毒抑制正相关的基因是sel1l3基因。
21、也优选在本专利技术中，与由于氧化应急及脂肪代谢而导致的组织纤维化正相关的基因或与由于氧化应急及脂肪代谢而导致的组织纤维化负相关的基因是pdk4,nox1,txnip，或bgn基因。
22、本专利技术中，相应的基因均公开于公共数据库中，例如可以从ncbi网站(https://www.ncbi.nlm.nih.gov)获取。
23、在第三方面，本专利技术提供了一种体外检测克来夫定对与肿瘤发生、发展相关的基因的表达影响的方法，其包括：
24、(1)在含有或不含有克来夫定的培养基中培养细胞；
25、(2)收获步骤(1)培养的细胞并裂解；
26、(3)从步骤(2)获得的裂解物中抽提rna；
27、(4)使用illumina系统进行建库并测序；和
28、(5)对步骤(4)获得的序列中的肿瘤相关基因进行rnaseq分析。
29、优选在本专利技术第三方面的方法中，细胞是hepg2或hepg2.2.15。
30、优选在本专利技术第三方面的方法中，基因是birc2，birc3，rassfs，il6st，rrm2本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.克来夫定在制备用于选自如下之一的药物或试剂中的应用：
2.进行选自如下之一的方法，其包括将克来夫定与细胞一起孵育的步骤：
3.权利要求2所述的方法，其为体外方法。
4.权利要求2所述的方法，其中，细胞是HepG2或HepG2.2.15。
5.调节基因的表达水平的体外方法，其包括将克来夫定与HepG2或HepG2.2.15细胞一起孵育的步骤，其中，所述基因是
6.一种体外检测克来夫定对与肿瘤发生或发展相关的基因的表达影响的方法，其包括：
7.一种体外检测克来夫定对与增强或重启免疫系统反应相关的基因的表达影响的方法，其包括：
8.一种体外检测克来夫定对与组织修复相关的基因的表达影响的方法，其包括：
9.一种体外检测克来夫定对与病毒抑制相关的基因的表达影响的方法，其包括：
10.一种体外检测克来夫定对与由于氧化应急及脂肪代谢而导致的组织纤维化相关的基因的表达影响的方法，其包括：
【技术特征摘要】
1.克来夫定在制备用于选自如下之一的药物或试剂中的应用：
2.进行选自如下之一的方法，其包括将克来夫定与细胞一起孵育的步骤：
3.权利要求2所述的方法，其为体外方法。
4.权利要求2所述的方法，其中，细胞是hepg2或hepg2.2.15。
5.调节基因的表达水平的体外方法，其包括将克来夫定与hepg2或hepg2.2.15细胞一起孵育的步骤，其中，所述基因是
6.一种体外检测克来夫定...
【专利技术属性】
技术研发人员：周詹姆斯，刘海凤，
申请(专利权)人：北京慧宝源生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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