【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及体外诊断领域，尤其是涉及样本分析方法和样本分析仪。
技术介绍
1、微生物为自然界中存在的体型细小、结构简单、肉眼看不见的微小生物，其须借助于特殊仪器放大后才能观察到。微生物包括原核类(如细菌、放线菌、支原体、立克次氏体、衣原体、螺旋体)、真核类(如真菌、原生动物、藻类)、非细胞类(病毒和朊病毒)。
2、很多疾病与微生物相关。病原微生物引起的相关疾病包括细菌性、病毒性、真菌性及原生动物引发的疾病。病原微生物可造成血液感染性疾病，包括菌血症、败血症、毒血症、脓毒血症等。其中，败血症是一种全身性的感染综合征(sirs)，可造成感染性休克及多器官功能障碍，其死亡率高达30-50％。由此可见，微生物的快速检测意义重大。
3、目前，临床上诊断微生物的金标准为血培养。然而，对于血培养而言，从血到平板培养到出结果整个过程操作繁琐，且耗时非常长(通常需要3-5天以上)，往往等到结果出来后病人病情已经非常严重。基于此，各种新型有效的检测手段相继涌现。这些检测手段包括免疫检测法和电化学检测法等。
4、免疫检测法是指利用抗原-抗体的特异性反应进行特定微生物的检测，包括传统的凝集素试验法和沉淀试验法以及新型的酶联免疫吸附法(elisa)、放射性标记法及化学发光免疫法等。免疫检测法的特异性非常强，检测速度也比传统培养法快。然而，由于存在抗体难以获得、抗体成本高、检测灵敏度不足、反应活性容易受环境影响等缺点，免疫检测法难以在临床微生物检测中广泛应用。
5、电化学检测法主要是利用微生物代谢过程产生的
技术实现思路
1、因此，本专利技术的任务在于提供一种样本分析方法和样本分析仪，其能够以流式细胞术为基础在使用荧光标记技术的情况下准确、灵敏、低成本且快速地识别血液或体液中的微生物。
2、为了实现本专利技术的上述任务，本专利技术第一方面首先提出一种样本分析方法，包括下列步骤：
3、采用包含第一染料的染料试剂和用于溶解红细胞的溶血剂处理同一份待测生物样本，以获得待测样本液，其中，所述待测生物样本为待测血液样本或待测体液样本，所述第一染料能对微生物进行染色；
4、使所述待测样本液中的粒子逐个通过光学检测区并用光照射流过所述光学检测区的粒子，以获得所述待测样本液中的粒子在被光照射之后所产生的散射光信息和荧光信息，所述荧光信息包括来自所述第一染料的第一荧光信息；以及
5、基于所述散射光信息和所述第一荧光信息识别所述待测样本液中的微生物。
6、本专利技术第二方面还提出一种样本分析仪，包括：
7、采样装置，用于定量吸取待测生物样本，所述待测生物样本为待测血液样本或待测体液样本；
8、样本制备装置，具有反应池和试剂供应部，其中，所述反应池用于接收所述采样装置所吸取的所述待测生物样本，以及接收所述试剂供应部提供的包含第一染料的染料试剂和用于溶解红细胞的溶血剂，所述采样装置所吸取的所述待测生物样本与所述试剂供应部提供的染料试剂和溶血剂在所述反应池中混合，以制备成待测样本液，其中，所述第一染料能对微生物进行染色；
9、光学检测装置，包括光源、流动室、散射光检测器和荧光检测器，所述光源用于发射光束以照射所述流动室，所述流动室与所述反应池连通并且所述待测样本液中的粒子可逐个通过所述流动室，所述散射光检测器用于检测通过所述流动室的粒子在被光照射后产生的散射光信息，所述荧光检测器用于检测通过所述流动室的粒子在被光照射后产生的荧光信息，所述荧光信息包括来自所述第一染料的第一荧光信息；以及
10、处理器，被配置为从所述光学检测装置获取所述散射光信息和所述荧光信息，并且基于所述散射光信息和所述第一荧光信息识别待测样本液中的微生物。
11、在本专利技术提出的各技术方案中，首先采用能对微生物进行染色的染料和用于溶解红细胞的溶血剂处理待测血液样本或待测体液样本，以获得待测样本液，然后采用流式细胞术获取待测样本液的散射光信息和荧光信息，基于所述散射光信息和所述荧光信息能够识别在待测样本液中是否存在微生物。由此能够准确、灵敏、低成本且快速地检测血液或体液中的微生物。
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1.一种样本分析方法，其特征在于，所述样本分析方法包括下列步骤：
2.根据权利要求1所述的样本分析方法，其特征在于，基于所述散射光信息和所述第一荧光信息识别所述待测样本液中的微生物包括：
3.根据权利要求2所述的样本分析方法，其特征在于，所述散射光信息包括前向散射光信息；并且
4.根据权利要求3所述的样本分析方法，其特征在于，基于所述散射光信息和所述第一荧光信息识别所述待测样本液中的微生物包括：
5.根据权利要求1至4中任一项所述的样本分析方法，其特征在于，基于所述散射光信息和所述第一荧光信息识别所述待测样本液中的微生物包括：
6.根据权利要求1至5中任一项所述的样本分析方法，其特征在于，所述待测生物样本为待测血液样本，所述样本分析方法还包括：
7.根据权利要求1至6中任一项所述的样本分析方法，其特征在于，所述待测生物样本为待测血液样本，所述染料试剂还包括不同于第一染料的第二染料，所述荧光信息还包括来自第二染料的第二荧光信息，其中，所述第二染料能对血液中的白细胞进行染色；并且
8.根据权利要求7所
9.根据权利要求1至6中任一项所述的样本分析方法，其特征在于，所述待测生物样本为待测血液样本，所述染料试剂还包括不同于第一染料的第二染料，所述荧光信息还包括来自第二染料的第二荧光信息，其中，第二染料能对血液中的白细胞和有核红细胞进行染色；并且
10.根据权利要求9所述的样本分析方法，其特征在于，所述散射光信息包括前向散射光信息；
11.根据权利要求7至10中任一项所述的样本分析方法，其特征在于，用光照射流过所述光学检测区的粒子包括：用单一波长的光照射流过所述光学检测区的粒子。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的样本分析方法，其特征在于，所述第一染料为能与脱氧核糖核酸特异性结合的染料。
13.根据权利要12所述的样本分析方法，其特征在于，所述第一染料包括具有通式I的结构的化合物：
14.根据权利要求13所述的样本分析方法，其特征在于，R1和R2独立地选自C1-6直链烷基、C1-6直链亚烷基-M，M选自磺酸基、苯基、羧基、巯基、氨基；或者
15.根据权利要求13或14所述的样本分析方法，其特征在于，R3选自氢、磺酸基、卤素、氰基、C1-6烷基；和/或
16.根据权利要求13至15中任一项所述的样本分析方法，其特征在于，当Y为抗衡阴离子时，Y选自卤素离子、ClO4-、PF6-、CF3SO3-、BF4-、乙酸根、甲磺酸根或对甲苯磺酸根；当Y不存在时，所述化合物为内盐。
17.一种样本分析仪，其特征在于，所述样本分析仪包括：
18.根据权利要求17所述的样本分析仪，其特征在于，所述处理器还被配置为在基于所述散射光信息和所述第一荧光信息识别所述待测样本液中的微生物时执行下列步骤：
19.根据权利要求18所述的样本分析仪，其特征在于，所述散射光信息包括前向散射光信息；并且
20.根据权利要求19所述的样本分析仪，其特征在于，所述处理器还被配置为：
21.根据权利要求17至20中任一项所述的样本分析仪，其特征在于，所述处理器还被配置为在基于所述散射光信息和所述第一荧光信息识别所述待测样本液中的微生物时执行下列步骤：
22.根据权利要求17至21中任一项所述的样本分析仪，其特征在于，所述待测生物样本为待测血液样本，所述处理器还被配置为：
23.根据权利要求17至22中任一项所述的样本分析仪，其特征在于，所述待测生物样本为待测血液样本，所述染料试剂还包括不同于第一染料的第二染料，所述第二染料能对血液中的白细胞进行染色，所述荧光信息还包括来自第二染料的第二荧光信息；并且
24.根据权利要求23所述的样本分析仪，其特征在于，所述散射光信息包括侧向散射光信息和前向散射光信息；并且
25.根据权利要求17至22中任一项所述的样本分析仪，其特征在于，所述待测生物样本为待测血液样本，所述染料试剂还包括不同于第一染料的第二染料，所述第二染料能对血液中的白细胞和有核红细胞进行染色，所述荧光信息还包括来自第二染料的第二荧光信息；并且
26.根据权利要求25所述的样本分析仪，其特征在于，所述散射光信息包括前向散射光信息；并且
27.根据权利要求23至26中任一项所述的样本分析仪，其特征在于，所述光源被构造为用单一波长的光照射所述流动室。
28.根据权利要求17至2...
【技术特征摘要】
1.一种样本分析方法，其特征在于，所述样本分析方法包括下列步骤：
2.根据权利要求1所述的样本分析方法，其特征在于，基于所述散射光信息和所述第一荧光信息识别所述待测样本液中的微生物包括：
3.根据权利要求2所述的样本分析方法，其特征在于，所述散射光信息包括前向散射光信息；并且
4.根据权利要求3所述的样本分析方法，其特征在于，基于所述散射光信息和所述第一荧光信息识别所述待测样本液中的微生物包括：
5.根据权利要求1至4中任一项所述的样本分析方法，其特征在于，基于所述散射光信息和所述第一荧光信息识别所述待测样本液中的微生物包括：
6.根据权利要求1至5中任一项所述的样本分析方法，其特征在于，所述待测生物样本为待测血液样本，所述样本分析方法还包括：
7.根据权利要求1至6中任一项所述的样本分析方法，其特征在于，所述待测生物样本为待测血液样本，所述染料试剂还包括不同于第一染料的第二染料，所述荧光信息还包括来自第二染料的第二荧光信息，其中，所述第二染料能对血液中的白细胞进行染色；并且
8.根据权利要求7所述的样本分析方法，其特征在于，所述散射光信息包括侧向散射光信息和前向散射光信息；
9.根据权利要求1至6中任一项所述的样本分析方法，其特征在于，所述待测生物样本为待测血液样本，所述染料试剂还包括不同于第一染料的第二染料，所述荧光信息还包括来自第二染料的第二荧光信息，其中，第二染料能对血液中的白细胞和有核红细胞进行染色；并且
10.根据权利要求9所述的样本分析方法，其特征在于，所述散射光信息包括前向散射光信息；
11.根据权利要求7至10中任一项所述的样本分析方法，其特征在于，用光照射流过所述光学检测区的粒子包括：用单一波长的光照射流过所述光学检测区的粒子。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的样本分析方法，其特征在于，所述第一染料为能与脱氧核糖核酸特异性结合的染料。
13.根据权利要12所述的样本分析方法，其特征在于，所述第一染料包括具有通式i的结构的化合物：
14.根据权利要求13所述的样本分析方法，其特征在于，r1和r2独立地选自c1-6直链烷基、c1-6直链亚烷基-m，m选自磺酸基、苯基、羧基、巯基、氨基；或者
15.根据权利要求13或14所述的样本分析方法，其特征在于，r3选自氢、磺酸基、卤素、氰基、c1-6烷基；和/或
16.根据权利要求13至15中任一项所述的样本分析方法，其特征在于，当y为抗衡阴离子时，y选自卤素离子、clo4-、pf6-、cf3s...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘宗俊，陈庚文，
申请(专利权)人：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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