【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一株能高效利用瓜氨酸的表皮葡萄球菌及其应用，属于食品微生物。
技术介绍
1、氨基甲酸乙酯(ethyl carbamate，简称ec)是发酵食品和饮料酒生产过程中自发形成的一种2a级致癌物。近年来调查发现，部分地区饮料酒中ec较高，部分人群的ec平均暴露量已超过公共卫生的关注度界点。因此，降低饮料酒中ec含量十分必要。研究表明，发酵酒产生过程中产生的尿素和瓜氨酸均显著影响ec形成，蒸馏过程中高温加速了二者与乙醇反应形成ec。因此，降低ec前体物瓜氨酸含量成为控制ec的有效措施之一。
2、瓜氨酸为非蛋白质氨基酸，饮料酒在发酵过程中大量具有精氨酸脱亚氨基途径(arginine deiminase pathway，adi途径)的细菌可将精氨酸转化成瓜氨酸，并释放到菌体外部。目前通过选育低产尿素的酵母或筛选高产脲酶的菌株应用于饮料酒发酵过程，但是这些微生物并不能同时降低瓜氨酸的含量。筛选能够高效利用瓜氨酸且不损害白酒风味的微生物应用于发酵过程，可有效减控酒醅中的瓜氨酸，是具有前景的工业化减控酒醅中氨基甲酸乙酯前体物积累的方法。
3、本专利技术从白酒发酵液中筛选得到一株能够高效吸收利用瓜氨酸的表皮葡萄球菌staphylococcus epidermidis，并将其应用于白酒酿造中，从而能够高效吸收并利用发酵液中的瓜氨酸，减少ec的形成，提高白酒的饮用安全性。
技术实现思路
1、本专利技术提供了一株能高效吸收利用瓜氨酸的表皮葡萄球菌(staphylococc
2、所述表皮葡萄球菌staphylococcus epidermidis分离自酒醅，分离方法如下：将酒醅用无菌生理盐水(0.85％，w/v)按质量比1:2比例稀释，梯度稀释后分别涂布于添加10g/l精氨酸和0.05％溴甲酚紫的mrs、nb、ypd以及lb固体培养基中，在37℃培养箱中培养直至出现明显的单菌落，通过紫色光晕的出现筛选能够代谢精氨酸的菌株。在相应平板上所分离纯化后的菌株，分别接种至含有10g/l精氨酸和5％乙醇的对应的mrs、nb、ypd以及lb液体培养基中，37℃培养48h后，离心测定上清中精氨酸与瓜氨酸含量。筛选能够大量利用精氨酸且瓜氨酸含量不增加的菌株，提取基因组进行16s rdna鉴定。
3、所述表皮葡萄球菌staphylococcus epidermidis为革兰氏阳性菌，球状。所述表皮葡萄球菌staphylococcus epidermidis的保藏方法为：挑取平板上的单菌落于nb液体培养基，培养12h后等体积添加60％甘油，置于-80℃下保存。
4、所述表皮葡萄球菌staphylococcus epidermidis的培养条件为：从甘油管中吸取100μl菌液接种于10ml nb液体培养基，30℃静置活化培养12h～16h到达对数中期，然后根据需要将种子液扩大培养。
5、本专利技术涉及一种高效利用精氨酸和瓜氨酸的表皮葡萄球菌及其应用，所述利用方法，具体是：(1)发酵：将表皮葡萄球菌staphylococcus epidermidis接种至nb培养基活化12-24h，扩培24～48h，培养温度37℃，经6000×g冷冻离心10min制备高密度菌液(107-109cfu/ml)；(2)拌曲：将制备好的菌液以按0.2％-2％ml/kg的比例与拌曲后的粮糟充分混合；(3)封缸发酵：将混合好的粮糟加入酒窖中密封发酵。
6、优选的，所述制备好的菌液按0.3％-1.5％的比例与拌曲后的粮糟充分混合。
7、本专利技术的有益效果：本专利技术的表皮葡萄球菌staphylococcus epidermidis进行白酒酿造，相比不添加表皮葡萄球菌staphylococcus epidermidis进行白酒酿造优越之处在于，在保持白酒风味的基础上，显著降低白酒发酵液中17.5％瓜氨酸含量。此外，表皮葡萄球菌staphylococcus epidermidis分离自发酵酒醅，属于食品安全的表皮葡萄球菌。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一株能高效吸收利用瓜氨酸的表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)，所述表皮葡萄球菌Staphylococcus epidermidis于2023年04月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCCNO.27204。
2.权利要求1所述表皮葡萄球菌Staphylococcus epidermidis在发酵酒中的应用。
3.按权利要求2所述应用，其特征在于，所述应用是将权利要求1所述表皮葡萄球菌Staphylococcus epidermidis用于降低白酒中瓜氨酸的含量，进而降低氨基甲酸乙酯含量。
4.按权利要求3所述应用，其特征在于，将表皮葡萄球菌Staphylococcus epidermidis活化培养至对数期，收集后与按0.2％-2％的比例加入到窖发酵原料中。
5.按权利要求4所述应用，其特征在于，所述过程为将表皮葡萄球菌Staphylococcusepidermidis按0.3％-1.2％mL/kg的比例与拌曲后的粮糟充分混合
6.按权利要求4至5中任一权利要求所述的应用，其特征在于，所述应用是将表皮葡萄球菌Staphylococcus epidermidis接种于NB培养基，37℃振荡活化培养12～24h后，扩培24～48h，经6000×g在0℃离心10min后，重悬于生理盐水中使菌液浓度为107-109cfu/mL。
7.权利要求1所述表皮葡萄球菌Staphylococcus epidermidis在控制瓜氨酸积累方面的应用。
...【技术特征摘要】
1.一株能高效吸收利用瓜氨酸的表皮葡萄球菌(staphylococcus epidermidis)，所述表皮葡萄球菌staphylococcus epidermidis于2023年04月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为中国科学院微生物研究所，保藏编号为cgmccno.27204。
2.权利要求1所述表皮葡萄球菌staphylococcus epidermidis在发酵酒中的应用。
3.按权利要求2所述应用，其特征在于，所述应用是将权利要求1所述表皮葡萄球菌staphylococcus epidermidis用于降低白酒中瓜氨酸的含量，进而降低氨基甲酸乙酯含量。
4.按权利要求3所述应用，其特征在于，将表皮葡萄球菌staphylococcus ep...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐振林，黄开胤，周凯，黄桂东，张笑，陈穗，刘占，徐婷，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：
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