一种碱性液化果胶酶的制备及其酶活检测方法技术

技术编号:40256214 阅读:40 留言:0更新日期:2024-02-02 22:48
本发明专利技术涉及一种碱性液化果胶酶的制备及其酶活检测方法,具体提供了一种鉴定碱性果胶酶的种类的方法,该方法能够区分酶解产物是短链果胶还是小分子还原糖,从而能够直接计算出碱性糖化果胶酶的酶活和碱性液化果胶酶的酶活,进而能够将内切型果胶酶和外切型果胶酶加以区分,便于筛选出产内切型果胶酶(液化果胶酶)和外切型果胶酶(糖化果胶酶)的微生物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物发酵及其产物检测领域,具体涉及一种碱性液化果胶酶的制备及其酶活检测方法


技术介绍

1、果胶主要是一类以聚半乳糖醛酸为骨架的杂多糖,该聚半乳糖醛酸以d-半乳糖醛酸(d-galacturonic acids,d-gal-a)为结构单元,由α-1,4-糖苷键连接而成,果胶的组分除d-gal-a外,还含有少量的l-鼠李糖、d-半乳糖、d-阿拉伯糖、d-甘露糖、l-岩藻糖等多种单糖。

2、当前研究将果胶酶分为两大类,一类能够催化果胶解聚,例如聚半乳糖醛酸酶、醛酸裂解酶等;另一类能催化果胶分子中的酯水解,生成果胶酸,例如果胶酯酶、果胶酰基水解酶等。一般情况下,如无特殊说明,果胶酶均默认为第一类果胶酶,即能裂解果胶的酶。

3、dns法是测定果胶酶常见的检测方法,其检测原理为:果胶酶水解果胶生成β-半乳糖醛酸,β-半乳糖醛酸是还原糖,能与dns(3,5-二硝基水杨酸)在高温下发生显色反应,生成红棕色产物(3-氨基-5-硝基水杨酸),该产物在540nm处有吸收峰,根据540nm处的吸光值来推算酶活。

<p>4、现有文献极少本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种鉴定碱性果胶酶的种类的方法,其包括:

2.一种检测碱性果胶酶的总酶活和具体酶活的方法,其包括:

3.权利要求1-2任一项所述的方法,其中,所述沉淀剂为由无水乙醇、三氯乙酸、二氯化钙和去离子水组成的混合物;

4.权利要求1-3任一项所述的方法,其中,所述方法具有选自以下(i)-(iv)中的一项或多项技术特征:

5.权利要求1-4任一项所述的方法,其中,所述方法具有选自以下(i)-(xvii)中的一项或多项技术特征:

6.权利要求1-5任一项所述的方法,其中,步骤(2)具有选自以下(i)-(ii)中的一项或多项技术特征:...

【技术特征摘要】

1.一种鉴定碱性果胶酶的种类的方法,其包括:

2.一种检测碱性果胶酶的总酶活和具体酶活的方法,其包括:

3.权利要求1-2任一项所述的方法,其中,所述沉淀剂为由无水乙醇、三氯乙酸、二氯化钙和去离子水组成的混合物;

4.权利要求1-3任一项所述的方法,其中,所述方法具有选自以下(i)-(iv)中的一项或多项技术特征:

5.权利要求1-4任一项所述的方法,其中,所述方法具有选自以下(i)-(xvii)中的一项或多项技术特征:

6.权利要求1-5任一项所述的方法,其中,步骤(2)具有选自以下(i)-(ii)中的一项或多项技术特征:

7.一种筛选能够生产碱性液化...

【专利技术属性】
技术研发人员:周康熙李菁菁丁宁龙腾陈义强陈善义张建平邓梅忠杨韧强何伟徐小青张恩仁李晨虎
申请(专利权)人:福建中烟工业有限责任公司
类型:发明
国别省市:

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