【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一株羽扇豆布鲁氏菌，尤其涉及一株具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌k6及其应用，属于农业微生物。
技术介绍
1、耐盐微生物因具有特殊的耐盐机制，能在高盐环境中维持正常的生长代谢，是一种新型微生物资源。我国有5亿亩盐碱地具有亟待开发利用潜力，是重要的潜在耕地资源。利用耐盐特性的功能微生物的促生功能，可有效改良盐碱地，提高盐碱农田作物产量。因此，选育高效实用的土壤功能微生物资源具有重要意义。
2、盐碱胁迫下，土壤中微生物数量显著降低，微生物群落结构、多样性及群落功能等方面均发生改变。盐碱地土壤高盐、贫瘠的特殊生境，蕴藏着许多丰富的耐盐微生物资源，特别是具有耐盐特性的植物促生菌株。通过挖掘盐碱地本土耐盐促生功能微生物，并利用它们的促生功能，可有效改善植物菌群环境，增加土壤中速效营养元素，加速盐碱地的改良和修复，优化盐碱地农作物生境，提高盐碱地土壤利用率。
3、丰富多样的耐盐促生菌群可将土壤中难以利用的营养元素转化为速效或可溶性营养物质，为植物提供易于吸收利用的营养元素，并可有效缓解环境中盐离子对植物的毒害作用。但目前现有技术对耐盐促生菌株的研究较少，可应用于实际生产的菌种资源依然相对贫乏。具有解钾、解磷、溶磷和固氮等多重促生功能的高耐盐可培养微生物，特别是不仅可以在高盐度环境中生存，而且可以有效提高盐碱土壤利用率的羽扇豆布鲁氏菌及其增加盐碱土壤速效钾和有效磷的应用还未见报道。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术提供了一株具有耐盐促生功能的
2、本专利技术的另一目的为提供了上述羽扇豆布鲁氏菌k6在增加盐碱土壤速效钾和有效磷的应用。
3、本专利技术为了实现上述目的所采用的技术方案为：
4、本专利技术提供了一株具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌k6，所述羽扇豆布鲁氏菌k6的保藏编号为cgmcc no. 27796，于2023年7月4日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
5、本专利技术还提供了一种上述具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌k6在盐胁迫条件下增加盐碱土壤中速效钾和有效磷的应用。
6、进一步的，应用过程中，所述盐胁迫是指土壤中盐浓度质量比不低于3‰的盐碱土壤。
7、本专利技术提供的具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌k6在盐胁迫条件下增加盐碱土壤中速效钾和有效磷的应用过程中，具体包括以下步骤：
8、（1）将活化后的羽扇豆布鲁氏菌k6种子液接种至发酵液体培养基中进行培养，获得含羽扇豆布鲁氏菌菌悬液；
9、（2）将发酵制得的羽扇豆布鲁氏菌菌悬液进行稀释，向盐碱土壤中施入稀释后的羽扇豆布鲁氏菌菌悬液即可。
10、进一步的，步骤（1）中，所述接种为将活化后的羽扇豆布鲁氏菌种子液按照体积比1~2%的接种量进行。
11、进一步的，步骤（1）中，所述发酵液体培养基为每1000 ml自来水中含有葡萄糖10g，酵母粉2g，氯化钠10 g，氯化钾0.5 g，磷酸钙3 g，硫酸亚铁0.05g，硫酸镁0.2g，ph调节至7.5~8.0。
12、进一步的，步骤（1）中，所述培养的条件为在28~30℃、180 rpm条件下培养24~48h。
13、进一步的，稀释后的羽扇豆布鲁氏菌菌悬液的浓度为1×106cfu/ml~1×1010cfu/ml。
14、本专利技术筛选得到的具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌k6，其生物学特征是：细胞形态呈圆形或椭圆形，不产生孢子，单个，细胞大小为（0.2 μm ~ 0.5 μm）×（1.2 μm ~1.5 μm）。28℃固体培养时菌落为圆形，较小，浅黄色，不透明，表面较湿润，易挑取，边缘不整齐；其生理生化特征是：革兰氏染色阴性，好氧，最适生长温度为25~33℃，最适生长ph值为6.5~8.0，最适盐浓度为1~5%，具有解钾、解磷、溶磷和固氮特性。
15、对本专利技术所述羽扇豆布鲁氏菌k6测定16s rrna基因序列的结果显示，其基因长度为1392 bp，相应的核苷酸序列如seq id no.1 所示。
16、通过使用美国生物工程信息中心（national center for biotechnologyinformation , ncbi）blastn 程序比对和系统发育分析确定本专利技术所述菌株k6与模式菌株羽扇豆布鲁氏菌（ brucella lupini）nbrc 102587高度同源，序列相似度高达99.87%。选取同源性比较高的15条序列的16s rdna序列作为参比对象，采用邻近法（neighbour-joining）运用mega 7软件构建菌株k6与参比菌株之间的系统进化树。在进化树中，菌株k6与羽扇豆布鲁氏菌（ brucella lupini）nbrc 102587形成单独的簇内进化分支（图7）。因此可以确定k6是一株羽扇豆布鲁氏菌（ brucella lupini）。
17、本专利技术所述具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌k6菌种选育的基本方法是：
18、从黄河三角洲自然保护区盐碱地采集盐地碱蓬根部土壤，取1g置于解钾液体培养基中，于28~30℃ 180 rpm恒温振荡培养箱中富集培养48h，梯度稀释涂布于解钾固体培养平板上，28~30℃条件下静置培养，挑取单菌落于相同培养平板上，经两次纯化后获得菌种，甘油冻藏保菌。
19、本专利技术所述具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌k6在增加土壤中速效钾含量中的应用，其中土壤中速效钾含量增加达43.7%。本专利技术所述具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌k6在增加土壤中有效磷含量中的应用，其中土壤中有效磷含量增加达32.9%。
20、本专利技术的有益效果为：
21、（1）本专利技术公开了一株具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌k6，该菌株同时具备高度耐盐及解钾、解磷和溶磷等特性，耐盐范围广泛，在1~5%盐浓度条件下均可保持良好的长势，具有应用于盐碱土壤修复和农业生产中的极大潜力。
22、（2）本专利技术通过多轮筛选，获得一株具有多重促生功能的耐盐菌株，在高盐胁迫下，所述菌株可以使土壤中速效钾和有效磷含量明显增加，分别提高达43.7%和32.9%；本专利技术在提供所述羽扇豆布鲁氏菌k6的同时还提供了一种适于所述羽扇豆布鲁氏菌k6发酵的液体培养基，利用该培养基可以快速大量的获得具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌k6，该耐盐促生菌株为盐碱农田土壤修复提供了优良的菌株资源，该菌株及其菌液具有较高的农业应用前景和经济价值。
23、保藏信息
24、保藏时间：2023年07月04日；
25、保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；
26、保藏编号：cgmcc no.27796；
27、保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所；<本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一株具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌K6，其特征在于，所述羽扇豆布鲁氏菌K6的保藏编号为CGMCC No. 27796，于2023年7月4日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
2.一种如权利要求1所述的具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌K6在盐胁迫条件下增加盐碱土壤中速效钾和有效磷的应用。
3.根据权利要求2所述的具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌K6在盐胁迫条件下增加盐碱土壤中速效钾和有效磷的应用，其特征在于，所述盐胁迫是指土壤中盐浓度质量比不低于3‰的盐碱土壤。
4.根据权利要求2或3所述的具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌K6在盐胁迫条件下增加盐碱土壤中速效钾和有效磷的应用，其特征在于，包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌K6在盐胁迫条件下增加盐碱土壤中速效钾和有效磷的应用，其特征在于，步骤（1）中，所述接种为将活化后的羽扇豆布鲁氏菌种子液按照体积比1~2%的接种量进行。
6.根据权利要求4所述的具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌K6在盐胁迫条件下增加盐碱土壤中速效钾
7.根据权利要求6所述的具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌K6在盐胁迫条件下增加盐碱土壤中速效钾和有效磷的应用，其特征在于，步骤（1）中，所述培养的条件为在28~30℃、180 rpm条件下培养24~48 h。
8.根据权利要求4所述的具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌K6在盐胁迫条件下增加盐碱土壤中速效钾和有效磷的应用，其特征在于，步骤（2）中，稀释后的羽扇豆布鲁氏菌菌悬液的浓度为1×106 cfu/mL~1×1010 cfu/mL。
...【技术特征摘要】
1.一株具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌k6，其特征在于，所述羽扇豆布鲁氏菌k6的保藏编号为cgmcc no. 27796，于2023年7月4日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
2.一种如权利要求1所述的具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌k6在盐胁迫条件下增加盐碱土壤中速效钾和有效磷的应用。
3.根据权利要求2所述的具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌k6在盐胁迫条件下增加盐碱土壤中速效钾和有效磷的应用，其特征在于，所述盐胁迫是指土壤中盐浓度质量比不低于3‰的盐碱土壤。
4.根据权利要求2或3所述的具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌k6在盐胁迫条件下增加盐碱土壤中速效钾和有效磷的应用，其特征在于，包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的具有耐盐促生功能的羽扇豆布鲁氏菌k6在盐胁迫条件下增加盐碱土壤中速效钾和有效磷的应用，其特征在于，步骤（1）中，所述接种为将活化后的羽扇豆布...
【专利技术属性】
技术研发人员：王艳君，刘宏元，李新华，齐高相，董红云，王娜娜，张燕，
申请(专利权)人：山东省农业科学院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。