【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分析检测，尤其涉及一种曲法罗汀乳膏剂有关物质检测方法。
技术介绍
1、痤疮受多因素影响，其发病机制尚无定论，大多数学者认为其主要与毛囊过度角化、皮脂过度分泌、痤疮丙酸杆菌定植以及炎症反应有关。曲法罗汀是美国fda二十多年以来批准的首个类维生素a寻常痤疮疗法，作为选择性rar-γ受体激动剂，曲法罗汀避开了其他外用维甲酸中的rar-β受体激动效应，从而避免了rar-β受体直接介导的皮肤刺激反应，解决了由于维生素a酸刺激性导致的依从性差的问题。
2、为了保证药品的安全使用，通常需要对药品进行质量控制，有关物质是药品质量研究中的关键质量属性之一。此外，低剂量药物通常具有较强的生理活性，其降解产物也可能因较强的生理活性容易引起不良反应，从而影响该产品的安全性，因此低剂量药物的有关物质检查尤为重要，理应是质量控制的关键指标之一。曲法罗汀乳膏具有极低的单元药物含量，辅料占比较大，给样品中杂质的准确检测带来干扰，增加困难。然而，现行标准缺乏对曲法罗汀药品有关物质的检测监控，药品安全难以保证。因此建立一种准确可靠的曲法罗汀乳膏有关物质检测方法对药品的质量控制是非常必要的。
技术实现思路
1、鉴于此，本专利技术提供一种曲法罗汀乳膏剂有关物质检测方法，能够将曲法罗汀乳膏剂快速处理且对其杂质进行有效分离，避免了较多辅料的干扰，从而保证曲法罗汀乳膏剂的质量可控性。该方法灵敏度高，操作简单，分离度较好，检测效率高，专属性好。
2、为实现上述专利技术目的，本专利技术采用如下
3、本专利技术提供一种曲法罗汀乳膏剂有关物质检测方法，包括如下步骤：
4、s1.溶液的配制
5、制备供试品溶液：取曲法罗汀乳膏样品置于离心管中，加入生理盐水，涡旋使其分散均匀，再加入乙酸乙酯，涡旋至溶液呈透明，然后进行超声分散，离心；取上清液进行氮吹浓缩，待吹干后将产物用乙腈超声复溶，然后加入乙腈稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；
6、制备空白辅料溶液：采用制备供试品溶液的方法配制空白辅料溶液；
7、制备对照品溶液：称取曲法罗汀原料药，加甲醇溶解，再加乙腈稀释至刻度，作为对照品溶液；
8、s2.取供试品溶液、空白辅料溶液、对照品溶液和稀释剂，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；其中，所述稀释剂为乙腈。
9、可选的，步骤s1中，所述氮吹浓缩过程中，氮气的流速为1ml/min～2ml/min，水浴温度为60℃～90℃。
10、可选的，步骤s1中，所述对照品溶液的浓度为0.15mg/ml。
11、可选的，所述供试品溶液的配制方法具体为：称取曲法罗汀乳膏10.0g置于50ml离心管中，加入0.5ml生理盐水，涡旋使其分散均匀，再加入5.0ml乙酸乙酯，继续涡旋5min至溶液呈透明，然后进行超声分散10min，取分散后的溶液以10000r/min的速度离心10min；取上清液3ml于80℃以1.5ml/mi n的流速进行氮吹浓缩，待吹干后加乙腈超声10min复溶，再加乙腈稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
12、优选的供试品前处理方法，可使曲法罗汀乳膏剂中杂质的响应值提高10倍以上，能够准确检测制剂中的杂质，且该方法可保证曲法罗汀稳定无明显降解，解决了供试液浓度低所导致的检测灵敏度较低的问题。
13、可选的，所述对照品溶液的配制方法具体为：称取曲法罗汀原料药15.0m g，置于100ml量瓶中，加5ml甲醇溶解，再加乙腈稀释至刻度，作为对照品溶液。
14、可选的，步骤s2中，色谱条件为：
15、色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶填充的色谱柱；
16、检测波长：245nm～265nm；
17、柱温：20℃～40℃；
18、流速：0.8ml/min～1.2ml/min；
19、进样量：100μl；
20、流动相a：0.005％磷酸；
21、流动相b：乙腈。
22、进一步可选的，步骤s2中，色谱条件为：
23、色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶填充的色谱柱；
24、检测波长：254nm；
25、柱温：30℃；
26、流速：1.0ml/min；
27、进样量：100μl；
28、流动相a：0.005％磷酸；
29、流动相b：乙腈。
30、进一步可选的，所述色谱柱为intersil ods-3，规格为4.6×250mm，5μm。
31、可选的，所述梯度洗脱的程序为：
32、
33、
34、曲法罗汀乳膏剂中含有sepineo p600、中链甘油三酸酯和环甲基硅酮等辅料，而中链甘油三酸酯作为油相包裹曲法罗汀加入到sepineo p600作为胶凝剂的水相中，加上环甲基硅酮的乳化作用，多个高分子混合物的结合导致主成分不能被有效浸润，被牢牢包裹在这些混合物中，即使长时间振摇也无法均匀分散，极大的影响了主成分溶出，导致回收率结果偏低；同时，上述辅料大都溶解于有机溶剂，使得在最终供试品溶液中仍存在较多辅料，且无法通过离心过滤去除，供试品溶液进样后在仪器和色谱柱管路中有较多辅料析出，造成仪器和色谱柱管路堵塞。专利技术人首先采用生理盐水破乳，使乳膏分散均匀，然后尝试过甲醇、异丙醇、正己烷、乙腈等多种有机溶剂作为提取溶剂，但效果均不佳，因辅料较多样品量无法增大，且不会有明显分层，溶液不澄清，难以提取分离。在深入研究后，专利技术人偶然发现，通过破乳-涡旋-提取-浓缩-复溶的方式对曲法罗汀乳膏剂进行前处理，以乙酸乙酯作为提取试剂，能够去除乳膏剂中绝大部分辅料。本专利技术首先使用生理盐水对曲法罗汀乳膏剂进行破乳分散，再用乙酸乙酯溶解提取，溶液呈现明显分层，可实现对样品中脂溶性和水溶性的杂质的一次性提取检测，最后浓缩后复溶使得供试品溶液澄清，易过滤，减少了空白辅料的干扰，使得空白辅料不易进入色谱柱与hplc系统，延长了色谱柱的使用使命，减少仪器进样针的损伤，提高了样品检测灵敏度，且主峰峰形较好。本专利技术中经处理的供试品与流动相梯度洗脱配合，实现了杂质的有效分离，杂质与主峰、空白辅料分离度均能大于1.5，色谱图重现性和稳定性强。
35、与现有技术相比，本专利技术具有如下技术效果：
36、本专利技术提供的曲法罗汀乳膏剂有关物质检测方法设计合理，灵敏度高，专属性好，抗干扰性强，线性良好，精密度和回收率良好，实现了曲法罗汀乳膏各杂质的有效分离，可延长色谱柱的使用使命，减少仪器进样针的损伤，提高了检测灵敏度；同时对在氧化剂条件下降解的杂质，本专利技术的有关物质检测方法均能实现有效分离和准确检测，各杂质峰之间具有良好的分离度，解决了空白辅料干扰杂质检测的问题。
37、现有技术中未有关于曲法罗汀乳膏中的杂质研究的报道和分离分析方法。为了更好地控制该药品的质量，增加用药安全性。本专利技术首次揭示了曲法罗汀乳膏有关物质的hplc检测分析方本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种曲法罗汀乳膏剂有关物质检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤S1中，所述氮吹浓缩过程中，氮气的流速为1mL/min～2mL/min，水浴温度为60℃～90℃。
3.如权利要求1所述的分析方法，其特征在于，步骤S1中，所述对照品溶液的浓度为0.15mg/mL。
4.如权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述供试品溶液的配制方法具体为：称取曲法罗汀乳膏10.0g置于50mL离心管中，加入0.5mL生理盐水，涡旋使其分散均匀，再加入5.0mL乙酸乙酯，继续涡旋5min至溶液呈透明，然后进行超声分散10min，取分散后的溶液以10000r/min的速度离心10min；取上清液3mL于80℃以1.5mL/min的流速进行氮吹浓缩，待吹干后加乙腈超声10min复溶，再加乙腈稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
5.如权利要求1所述的分析方法，其特征在于，步骤S2中，色谱条件为：
6.如权利要求5所述的分析方法，其特征在于，步骤S2中，色谱条件为：
7.如权利要求5所
8.如权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序为：
...【技术特征摘要】
1.一种曲法罗汀乳膏剂有关物质检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤s1中，所述氮吹浓缩过程中，氮气的流速为1ml/min～2ml/min，水浴温度为60℃～90℃。
3.如权利要求1所述的分析方法，其特征在于，步骤s1中，所述对照品溶液的浓度为0.15mg/ml。
4.如权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述供试品溶液的配制方法具体为：称取曲法罗汀乳膏10.0g置于50ml离心管中，加入0.5ml生理盐水，涡旋使其分散均匀，再加入5.0ml乙酸乙酯，继续涡旋5min至溶液呈透明，然后进行超声分...
【专利技术属性】
技术研发人员：张永鑫，张娟，樊明喜，陈莹莹，毕莹莹，尹智军，
申请(专利权)人：南京知和医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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