【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于体外诊断及免疫检测，特别涉及一种双向双驱序贯式血小板hla抗体检测的微流控芯片及应用。
技术介绍
1、目前成分输血越来越广泛地应用于临床，输注血小板作为重要的临床输血治疗手段，尤其是对治疗血小板缺乏引起的出血倾向、血小板功能性障碍具有重要价值。血小板抗体检测常用于医疗诊断中，部分患者体内产生血小板抗体致使血小板输注无效导致输血效率低下，血液资源浪费，甚至致使严重并发症的发生，如输血后紫癜、免疫性血小板减少性紫癜、重度出血等，因此输血前进行血小板抗体检测对于改善输血效果尤为重要。此外，在妊娠期妇女的常规检查中，检测血小板抗体有助于避免新生儿同种免疫血小板减少症发生。
2、血小板表达hla-i类抗原，由hla复合体编码表达。由于hla复合体具有极丰富的多态性，在无亲缘关系的个体间几乎不存在完全相同的个体。因此，人群中不同个体hla具有不同的抗原特异性。为此，任何个体在接触异种hla抗原的细胞的情况下，均会导致hla抗体的产生，如有孕产史的妇女，异体输血史等情况。血小板只表达hla-i类抗原，孕产史的妇女，或输血史的个体，均有可能产生针对hla-i类抗原的抗体，后文简述为血小板hla抗体。当患者输注血小板时，需要检测患者体内是否存在针对供者血小板hla的抗体，或选择和患者血清相匹配的供者血小板，故习惯称之为血小板配型试验。
3、目前，超过80%的血小板输注无效因为血小板hla抗体引起，使用的检测方法多为固相凝集法，该方法需血清量大，实际操作需一小时以上，其中包括反复多次的清洗步骤，结果判读模式较为
技术实现思路
1、本专利技术针对现有血小板hla抗体在常规检测的不足，提供一种双向双驱序贯式血小板hla抗体检测的微流控芯片及应用，利用该芯片可以比较完美整合常规血小板hla抗体检测的复杂流程，大幅减少血小板抗体检测所需时间，使临床输血的前期受者体内血小板抗体检测工作更为快速和便捷。
2、为实现上述目的，本专利技术的技术方案是这样实现的，一种双向双驱序贯式血小板hla抗体检测的微流控芯片，包括基片及压合于基片上的盖片，基片和盖片围合形成微通道，所述微通道左端与盖片上开设的第二加样孔连通，右端与第二废液区连通，所述第二废液区设置有可移动的滤纸片，所述滤纸片移动时接触或远离所述微通道，所述微通道从左到右依次设置有标记区、检测区、质控区，所述盖片上还开设有第一加样孔，所述第一加样孔设置在所述质控区与第二废液区之间的微通道上方，并与微通道相连通，所述标记区与检测区之间设置有第一废液区，所述第一废液区设置在所述微通道宽度方向的两端，并通过设置在微通道上的单向液流通道与所述微通道相连通，所述标记区设置有标记抗人igg抗体，所述检测区包被有血小板捕获抗体。
3、在本专利技术的一个实施方案中，所述盖片下表面沿其长度方向设置有凹槽，所述盖片通过所述凹槽与所述基片上表面围合形成微通道。
4、在本专利技术的一个实施方案中，所述单向液流通道设置在所述盖片下表面，且两端连通所述微通道，所述单向流通道左端与微通道连通处的宽度小于微通道其他位置的宽度，且所述单向液流通道从左到右逐渐变窄，所述第一废液区与单向流通道最宽处的前后两端相连通。
5、在本专利技术的一个实施方案中，所述第一废液区设置在所述盖片下表面，所述第一废液区设置有吸水材料。
6、在本专利技术的一个实施方案中，所述标记区、检测区、质控区、第二废液区均设置在所述基片上表面。
7、在本专利技术的一个实施方案中，所述基片上表面对应所述第一加样孔、第二加样孔的位置处均设置有缓冲液干粉。
8、另一方面，本专利技术还提供了一种利用上述任一一个技术方案中的微流控芯片对血小板hla抗体进行检测的应用，包括至少以下步骤：
9、1）在第一加样孔滴加待检血小板，液体流动方向是由右向左移动，血小板优先以侧向流方式与检测区的血小板捕获抗体结合，剩余样本或样本中其它物质被收集在第一废液区；
10、2）在第一加样孔滴加待检血清，液体流动方向是由右向左移动，血清优先以侧向流方式与检测区结合的血小板相结合，剩余样本或样本中其它物质被收集在第一废液区；
11、3）在第二加样孔注入蒸馏水，同时将位于第二废液区的滤纸片左移，与微通道内液体接触，液体由左向右移动，溶解标记区的标记抗人igg抗体，标记抗体继续移动至检测区、质控区，与检测区、质控区结合，而过剩的标记抗体随液流被收集在第二废液区；
12、4、按常规微流控读取检测区和质控区的信号值。
13、通过上述技术方案得到的双向双驱序贯式血小板hla抗体检测的微流控芯片及应用，其有益效果是：
14、1.简化血小板抗体检测流程、缩短检测时间
15、微流控芯片的微小尺寸和精密制造能够实现准确的流体操纵和反应控制，可以达到微米级别的精度，比传统实验方法更为准确，且更适合poct分析模式。使用微流控芯片整合复杂的实验步骤，只需少量血清样本即可检测且无需专业人员操作，相较现有方法可极大缩短实验时间，提高工作效率，为临床诊断提供便携，且结果以信号值的方式呈现，相较固相凝集法则更为精准，不被实验操作人员主观判断影响。
16、2.规避非特异性igg干扰
17、常规微流控检测模式中待检血清优先与藻红蛋白标记的鼠抗人igg混合，形成复合物后再流经检测区，而待检血清中存在大量非特异性igg抗体，标记二抗与非特异性抗体结合，对待检抗体的检测结果形成干扰。本技术专利技术采用“双向”液流的模式，使血小板与待检血清从右至左依次序贯流经检测区，逐步被捕获，非特异性igg抗体被废液池吸收后，标记二抗再从左至右流经检测区，以此规避非特异性igg的干扰，提高检测敏感度。
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1.一种双向双驱序贯式血小板HLA抗体检测的微流控芯片，包括基片及压合于基片上的盖片，基片和盖片围合形成微通道，其特征在于，所述微通道左端与盖片上开设的第二加样孔连通，右端与第二废液区连通，所述第二废液区设置有可移动的滤纸片，所述滤纸片移动时接触或远离所述微通道，所述微通道从左到右依次设置有标记区、检测区、质控区，所述盖片上还开设有第一加样孔，所述第一加样孔设置在所述质控区与第二废液区之间的微通道上方，并与微通道相连通，所述标记区与检测区之间设置有第一废液区，所述第一废液区设置在所述微通道宽度方向的两端，并通过设置在微通道上的单向液流通道与所述微通道相连通，所述标记区设置有标记抗人IgG抗体，所述检测区包被有血小板捕获抗体。
2.根据权利要求1所述的双向双驱序贯式血小板HLA抗体检测的微流控芯片，其特征在于，所述盖片下表面沿其长度方向设置有凹槽，所述盖片通过所述凹槽与所述基片上表面围合形成微通道。
3.根据权利要求2所述的双向双驱序贯式血小板HLA抗体检测的微流控芯片，其特征在于，所述单向液流通道设置在所述盖片下表面，且两端连通所述微通道，所述单向流通道左
4.根据权利要求2所述的双向双驱序贯式血小板HLA抗体检测的微流控芯片，其特征在于，所述第一废液区设置在所述盖片下表面，所述第一废液区设置有吸水材料。
5.根据权利要求2所述的双向双驱序贯式血小板HLA抗体检测的微流控芯片，其特征在于，所述标记区、检测区、质控区、第二废液区均设置在所述基片上表面。
6.根据权利要求2所述的双向双驱序贯式血小板HLA抗体检测的微流控芯片，其特征在于，所述基片上表面对应所述第一加样孔、第二加样孔的位置处均设置有缓冲液干粉。
7.一种双向双驱序贯式血小板HLA抗体检测的应用，其特征在于，应用权利要求1-6任一项的微流控芯片进行检测，包括至少以下步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种双向双驱序贯式血小板hla抗体检测的微流控芯片，包括基片及压合于基片上的盖片，基片和盖片围合形成微通道，其特征在于，所述微通道左端与盖片上开设的第二加样孔连通，右端与第二废液区连通，所述第二废液区设置有可移动的滤纸片，所述滤纸片移动时接触或远离所述微通道，所述微通道从左到右依次设置有标记区、检测区、质控区，所述盖片上还开设有第一加样孔，所述第一加样孔设置在所述质控区与第二废液区之间的微通道上方，并与微通道相连通，所述标记区与检测区之间设置有第一废液区，所述第一废液区设置在所述微通道宽度方向的两端，并通过设置在微通道上的单向液流通道与所述微通道相连通，所述标记区设置有标记抗人igg抗体，所述检测区包被有血小板捕获抗体。
2.根据权利要求1所述的双向双驱序贯式血小板hla抗体检测的微流控芯片，其特征在于，所述盖片下表面沿其长度方向设置有凹槽，所述盖片通过所述凹槽与所述基片上表面围合形成微通道。
3.根据权利要求2所述的双向双驱序贯式血小板hl...
【专利技术属性】
技术研发人员：李祎娴，杨小慧，李雪，孙瑗敏，李子熹，请求不公布姓名，叶涛，
申请(专利权)人：北京芯迈微生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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