【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于体外诊断及免疫检测，特别涉及一种肺炎支原体、肺炎衣原体igm抗体联合检测的芯片及应用。
技术介绍
1、肺炎支原体（mycoplasmal pneumonia，mp）是介于细菌与病毒之间的已知能独立生活的最小病原微生物，由于缺少细胞壁，其形态高度多样化。mp主要通过飞沫传播，是引起儿童呼吸道感染的常见病原体，全球感染率约为9.6%-66.7%。近年来，mp已成为儿童社区获得性肺炎（community acquired pneumonia,cap）最常见的病原体之一，约占cap病原的10%-30%不等。研究发现，mp不仅可以引起上呼吸道感染和下呼吸道感染，也可导致重症肺炎，并且遗留有肺不张、支气管扩张等后遗症。
2、肺炎衣原体（chlamydia pneumoniae，cp）是一种专性细胞内致病微生物，是成人和儿童呼吸道感染的常见病原体，不仅能引起咽炎、鼻窦炎、中耳炎，以及下呼吸道感染如急性支气管炎和肺炎，而且在支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病、心血管疾病的发病中也起着重要的作用，严重者可造成多系统、多器官的损伤。
3、病原体入侵机体后，刺激机体启动免疫应答反应，分为初次免疫应答与再次免疫应答。其中初次免疫应答产生抗体的潜伏期较长，抗体量少，且与抗原结合的亲和力较低。此期出现最早的抗体为igm抗体，可在血液中维持数周或数月。后期可产生igg抗体，当igm抗体接近消失时，正是igg抗体达到高峰的时期，其在血液中维持的时间较长可达数年以上。在初次免疫应答的终末期，抗原被清除，大量浆细胞和效应t细胞死亡，
4、病原体igm抗体检测在常规层析或侧向流分析中，在检测区包被病原体的重组抗原，在标记区放置标记抗人igm抗体。滴加样本后，样本中的igm抗体（包括特异性igm抗体和非特异性igm抗体）首先与标记抗人igm抗体结合，随后与检测区包被的病原体重组蛋白结合，形成抗原-特异性igm抗体-标记抗人igm抗体复合物。但在此种模式下，标本中非特异性igm抗体会产生干扰，中和标记抗人igm抗体，分析敏感度不能满足临床需求。
技术实现思路
1、本专利技术针对现有病原体igm抗体在常规侧向流检测的不足，提供一种肺炎支原体、肺炎衣原体igm抗体联合检测的芯片及应用，利用该芯片可有效规避非特异性igm抗体的干扰，提高分析敏感度。
2、为实现上述目的，本专利技术的技术方案是这样实现的，一种肺炎支原体、肺炎衣原体igm抗体联合检测的芯片，包括基片及压合于基片上的盖片，基片和盖片围合形成微通道，所述微通道左端与盖片上开设的缓冲液加样孔连通，右端与第二废液区连通，所述第二废液区控制微通道内液体向第二废液区的流动，所述微通道从左到右依次设置有标记区、检测区、样本加样区，所述标记区与检测区之间设置有第一废液区，所述第一废液区设置在所述微通道宽度方向的两端，并通过控制阀与所述微通道相连通，所述检测区设置有第一检测位点、第二检测位点、共用参考点，所述标记区设置有标记抗人igm抗体，所述第一检测位点设置有肺炎支原体重组抗原，所述第二检测位点设置有肺炎衣原体重组抗原。
3、在本专利技术的一个实施方案中，所述第一废液区、第二废液区均设置在所述盖片下表面，所述第一废液区、第二废液区均设置有吸水材料，所述第一废液区为矮圆柱形，所述第二废液区的吸水材料为可移动的滤纸片，所述滤纸片移动时接触或远离所述微通道。
4、在本专利技术的一个实施方案中，所述样本加样区包括所述盖片上设置的样本加样孔，所述样本加样孔与所述微通道相连通。
5、在本专利技术的一个实施方案中，所述控制阀设置在所述盖片上，所述控制阀为设置在所述微通道内的两个弧形挡板，且外弧面朝向标记区，所述弧形挡板一端伸入所述微通道并向所述检测区延伸，另一端与所述第一废液区相连。
6、在本专利技术的一个实施方案中，所述标记区、检测区均设置在所述基片上表面，所述第一检测位点、第二检测位点、共用参考点在检测区从左到右依次分布。
7、在本专利技术的一个实施方案中，所述标记抗人igm抗体为荧光微球标记的抗体。
8、另一方面，本专利技术还提供了一种利用上述任一一个技术方案中的芯片对肺炎支原体、肺炎衣原体igm抗体进行联合检测的应用，包括至少以下步骤：
9、1）在样本加样区滴加样本，液体流动方向是由右向左移动，样本中的靶分析物优先以侧向流方式与检测区的肺炎支原体/肺炎衣原体重组抗原结合，剩余样本或样本中其它物质被收集在第一废液区；
10、2）在缓冲液加样孔注入蒸馏水，同时将位于第二废液区的滤纸片左移，与微通道内液体接触，液体由左向右移动，溶解标记区的标记抗人igm抗体，标记抗体继续移动至检测区，与已被捕获的待检肺炎支原体/肺炎衣原体-特异性igm抗体结合，而过剩的标记抗体随液体流动被收集在第二废液区；
11、3）按常规微流控读取检测区和共用参考区的信号值，获得比值：检测区信号值/共用参考区信号值，并根据比值进行后续的定性检测。
12、通过上述技术方案得到的一种肺炎支原体、肺炎衣原体igm抗体联合检测的芯片及应用，其有益效果是：
13、规避非特异性igm抗体干扰：本技术专利技术提出的双向和双驱模式，在滴加样本后，样本首先流至检测区，样本中的待检病原体特异性igm抗体与此处包被的重组抗原结合，而非特异性igm抗体和其他干扰物质在第一驱动力的作用下进入第一废液区；随后于缓冲液加样孔加入蒸馏水，溶解缓冲干粉，并溶解标记区的标记抗体，流至检测区时，与已被捕获的病原体特异性igm抗体结合，可以巧妙消除间接法中非特异性igm抗体的干扰。
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1.一种肺炎支原体、肺炎衣原体IgM抗体联合检测的芯片，包括基片及压合于基片上的盖片，基片和盖片围合形成微通道，其特征在于，所述微通道左端与盖片上开设的缓冲液加样孔连通，右端与第二废液区连通，所述第二废液区控制微通道内液体向第二废液区的流动，所述微通道从左到右依次设置有标记区、检测区、样本加样区，所述标记区与检测区之间设置有第一废液区，所述第一废液区设置在所述微通道宽度方向的两端，并通过控制阀与所述微通道相连通，所述检测区设置有第一检测位点、第二检测位点、共用参考点，所述标记区设置有标记抗人IgM抗体，所述第一检测位点设置有肺炎支原体重组抗原，所述第二检测位点设置有肺炎衣原体重组抗原。
2.根据权利要求1所述的肺炎支原体、肺炎衣原体IgM抗体联合检测的芯片，其特征在于，所述第一废液区、第二废液区均设置在所述盖片下表面，所述第一废液区、第二废液区均设置有吸水材料，所述第一废液区为矮圆柱形，所述第二废液区的吸水材料为可移动的滤纸片，所述滤纸片移动时接触或远离所述微通道。
3.根据权利要求1所述的肺炎支原体、肺炎衣原体IgM抗体联合检测的芯片，其特征在于，所述样
4.根据权利要求1或2所述的肺炎支原体、肺炎衣原体IgM抗体联合检测的芯片，其特征在于，所述控制阀设置在所述盖片上，所述控制阀为设置在所述微通道内的两个弧形挡板，且外弧面朝向标记区，所述弧形挡板一端伸入所述微通道并向所述检测区延伸，另一端与所述第一废液区相连。
5.根据权利要求1所述的肺炎支原体、肺炎衣原体IgM抗体联合检测的芯片，其特征在于，所述标记区、检测区均设置在所述基片上表面，所述第一检测位点、第二检测位点、共用参考点在检测区从左到右依次分布。
6.根据权利要求1所述的肺炎支原体、肺炎衣原体IgM抗体联合检测的芯片，其特征在于，所述标记抗人IgM抗体为荧光微球标记的抗体。
7.一种肺炎支原体、肺炎衣原体IgM抗体联合检测的应用，其特征在于，应用权利要求2-6中任一项的芯片进行检测，包括至少以下步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种肺炎支原体、肺炎衣原体igm抗体联合检测的芯片，包括基片及压合于基片上的盖片，基片和盖片围合形成微通道，其特征在于，所述微通道左端与盖片上开设的缓冲液加样孔连通，右端与第二废液区连通，所述第二废液区控制微通道内液体向第二废液区的流动，所述微通道从左到右依次设置有标记区、检测区、样本加样区，所述标记区与检测区之间设置有第一废液区，所述第一废液区设置在所述微通道宽度方向的两端，并通过控制阀与所述微通道相连通，所述检测区设置有第一检测位点、第二检测位点、共用参考点，所述标记区设置有标记抗人igm抗体，所述第一检测位点设置有肺炎支原体重组抗原，所述第二检测位点设置有肺炎衣原体重组抗原。
2.根据权利要求1所述的肺炎支原体、肺炎衣原体igm抗体联合检测的芯片，其特征在于，所述第一废液区、第二废液区均设置在所述盖片下表面，所述第一废液区、第二废液区均设置有吸水材料，所述第一废液区为矮圆柱形，所述第二废液区的吸水材料为可移动的滤纸片，所述滤纸片移动时接触或远离所述微通道。
3.根据权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨小慧，李祎娴，孙瑗敏，于洋，李子熹，请求不公布姓名，叶涛，
申请(专利权)人：北京芯迈微生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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