【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药的，具体涉及一种用于ctcs捕获和无损释放的基底、其制备方法及ctcs捕获和无损释放的方法。
技术介绍
1、血源性转移是循环从原发肿瘤到重要的器官的肿瘤细胞所引发，而且是直接与大部分的癌症死亡相关。虽然他们的组成成分是未知的，其中小部分被认为是具有可行的转移性前体启动克隆转移病灶的能力。然而，循环肿瘤细胞(ctcs)是非常罕见的(估计晚期癌症患者每10亿个正常循环血细胞中有一个ctcs，每106-7个白细胞中有1个ctcs)。ctcss存在的形态分为四种，分别是间质型类、上皮型类、上皮间质混合型和成团的ctcs。深刻对瘤研究，组织活检的局限性以及对患者带来创伤，对ctcs的检测是专注于一种新的方法检测转移性疾病领域研究，与现有的传统方法比较(如临床表现、影像学评估和血清肿瘤标志物)实现创伤小，更可靠效用。微流控生物工程范畴和其他新方法应用于罕见的肿瘤细胞在血液标本检测。许多报告对ctcs监测和表征的研究，便于判断早期ctcs复发或转移，能更加正确地对患者病情掌握和提出适当的医治决策。最初，上皮标记物通过免疫细胞化学或逆转录聚合酶链反应(如epithelial cell adhesion molecule，epcam、细胞角蛋白)被用于鉴定外周血或骨髓中循环肿瘤细胞。
2、此外，上皮间质转化(emt)与肿瘤干细胞(cscs)作为ctcs生物标记受到越来越多的关注。由于他们在转移生物学进展上起到重要作用。除了这些标记外，研究人员已经尝试开发检测或捕获ctcs技术，然而在确立转移时需要考虑肿瘤-宿主之
技术实现思路
1、本专利技术的目的之一在于提供一种用于ctcs捕获和无损释放的基底，可以利用聚吲哚导电性和可逆氧化还原反应的原理对ctcs进行实验捕获和释放。
2、本专利技术的目的之二在于提供一种用于ctcs捕获和无损释放的基底的制备方法，制备方法简单，易于控制。
3、本专利技术的目的之三在于提供一种ctcs捕获和无损释放的方法。
4、本专利技术实现目的之一所采用的方案是：一种用于ctcs捕获和无损释放的基底，包括衬底及沉积于衬底表面的生物素掺杂的聚吲哚薄膜。
5、优选地，所述衬底为导电衬底。
6、优选地，所述基底还包括通过nhs/edc-链霉亲和素修饰至生物素掺杂的聚吲哚薄膜表面的抗体。
7、优选地，所述抗体为上皮特异性抗原抗体、上皮标记物细胞角蛋白抗体、上皮细胞粘附分子抗体、肿瘤胚胎抗体、人类表皮生长因子受体2抗体、静脉内皮细胞分子抗体、附膜蛋白抗体、唾液酸化的路易斯寡糖-x抗体、乙醛脱氢酶1抗体、波形蛋白抗体、尿激酶受体抗体、乙酰肝素酶抗体、前列腺特异性膜抗体、anti-cd44、anti-ck18、anti-cd133、anti-cd90、anti-cd45或anti-cd146中的任意一种。
8、本专利技术实现目的之二所采用的方案是：一种所述的用于ctcs捕获和无损释放的基底的制备方法，包括以下步骤：将去离子水、十二烷基苯磺酸钠、生物素、吲哚按照一定比例配制成电聚合液，通过电化学聚合反应在衬底表面沉积制备生物素掺杂聚吲哚薄膜。
9、优选地，所述电聚合液中十二烷基苯磺酸钠的浓度为0.05～0.5mol/l，生物素的浓度为0.1～5μmol/l，吲哚的浓度为0.1～1mol/l。
10、优选地，采用的聚合电压为1.5～3v，聚合时间为10～25s。
11、优选地，制备方法还包括在所述生物素掺杂的聚吲哚薄膜表面通过nhs/edc-链霉亲和素修饰抗体。
12、本专利技术实现目的之三所采用的方案是：一种ctcs捕获和无损释放的方法，采用所述的用于ctcs捕获和无损释放的基底捕获ctcs，以及施加外加电压释放捕获的ctcs。
13、优选地，所述捕获的方法为：在用于ctcs捕获和无损释放的基底表面修饰抗体，然后将其浸泡在靶细胞的细胞悬浮液中，在35～37℃下孵育30min～2h，完成ctcs的捕获；
14、所述无损释放的方法为：对捕获了ctcs的基底施加0～1.5v的电压超过15s，即可完成对捕获的ctcs的无损释放。
15、本专利技术具有以下优点和有益效果：
16、本专利技术的用于ctcs捕获和无损释放的基底可以利用聚吲哚导电性和可逆氧化还原反应的原理对ctcs进行实验捕获和释放。
17、本专利技术的用于ctcs捕获和无损释放的基底的制备方法，采用掺杂生物的吲哚溶液通过电化学聚合反应在衬底上沉淀制备薄膜，十二烷苯磺酸钠作为表面活性剂对吲哚电聚合和聚吲哚导电性均有影响，物素掺杂聚吲哚薄膜呢能够促进后期抗体修饰过程中链霉亲和素与聚吲哚薄膜表面的衔接。
18、采用本专利技术的用于ctcs捕获和无损释放的基底可以对ctcs进行高效捕获，捕获效率接近100％，施加外加电压之后，又能将捕获的ctcs无损释放，释放效率可以达到90％。
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1.一种用于CTCs捕获和无损释放的基底，其特征在于：包括衬底及沉积于衬底表面的生物素掺杂的聚吲哚薄膜。
2.根据权利要求1所述的用于CTCs捕获和无损释放的基底，其特征在于：所述衬底为导电衬底。
3.根据权利要求1所述的用于CTCs捕获和无损释放的基底，其特征在于：所述基底还包括通过NHS/EDC-链霉亲和素修饰至生物素掺杂的聚吲哚薄膜表面的抗体。
4.根据权利要求3所述的用于CTCs捕获和无损释放的基底，其特征在于：所述抗体为上皮特异性抗原抗体、上皮标记物细胞角蛋白抗体、上皮细胞粘附分子抗体、肿瘤胚胎抗体、人类表皮生长因子受体2抗体、静脉内皮细胞分子抗体、附膜蛋白抗体、唾液酸化的路易斯寡糖-X抗体、乙醛脱氢酶1抗体、波形蛋白抗体、尿激酶受体抗体、乙酰肝素酶抗体、前列腺特异性膜抗体、anti-CD44、anti-CK18、anti-CD133、anti-CD90、anti-CD45或anti-CD146中的任意一种。
5.一种根据权利要求1-4中任一项所述的用于CTCs捕获和无损释放的基底的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将去
6.根据权利要求5所述的用于CTCs捕获和无损释放的基底的制备方法，其特征在于：所述电聚合液中十二烷基苯磺酸钠的浓度为0.05～0.5mol/L，生物素的浓度为0.1～5μmol/L，吲哚的浓度为0.1～1mol/L。
7.根据权利要求5所述的用于CTCs捕获和无损释放的基底的制备方法，其特征在于：采用的聚合电压为1.5～3V，聚合时间为10～25s。
8.根据权利要求5所述的用于CTCs捕获和无损释放的基底的制备方法，其特征在于，制备方法还包括在所述生物素掺杂的聚吲哚薄膜表面通过NHS/EDC-链霉亲和素修饰抗体。
9.一种CTCs捕获和无损释放的方法，其特征在于：采用权利要求1-4中任一项所述的用于CTCs捕获和无损释放的基底捕获CTCs，以及施加外加电压释放捕获的CTCs。
10.根据权利要求9所述的CTCs捕获和无损释放的方法，其特征在于：
...【技术特征摘要】
1.一种用于ctcs捕获和无损释放的基底，其特征在于：包括衬底及沉积于衬底表面的生物素掺杂的聚吲哚薄膜。
2.根据权利要求1所述的用于ctcs捕获和无损释放的基底，其特征在于：所述衬底为导电衬底。
3.根据权利要求1所述的用于ctcs捕获和无损释放的基底，其特征在于：所述基底还包括通过nhs/edc-链霉亲和素修饰至生物素掺杂的聚吲哚薄膜表面的抗体。
4.根据权利要求3所述的用于ctcs捕获和无损释放的基底，其特征在于：所述抗体为上皮特异性抗原抗体、上皮标记物细胞角蛋白抗体、上皮细胞粘附分子抗体、肿瘤胚胎抗体、人类表皮生长因子受体2抗体、静脉内皮细胞分子抗体、附膜蛋白抗体、唾液酸化的路易斯寡糖-x抗体、乙醛脱氢酶1抗体、波形蛋白抗体、尿激酶受体抗体、乙酰肝素酶抗体、前列腺特异性膜抗体、anti-cd44、anti-ck18、anti-cd133、anti-cd90、anti-cd45或anti-cd146中的任意一种。
5.一种根据权利要求1-4中任一项所述的用于ctcs捕获和无损释放的基底的制备方法，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘武，
申请(专利权)人：江阴市珞珈飞流数字科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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