【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物发酵，具体涉及一种吡咯喹啉醌的制造方法。
技术介绍
1、吡咯喹啉醌(pqq)最初被发现是细菌脱氢酶的辅酶，特别是葡萄糖脱氢酶和甲醇脱氢酶。尽管pqq并非官方被归类为维生素或条件性维生素，但其具有潜在的健康益处。
2、补充pqq与多种优势相关，包括改善抗氧化活性、增强认知功能、强化免疫系统、增强线粒体功能以及降低c-反应蛋白水平。最近的研究还显示，pqq在保护心肺功能和维持线粒体平衡方面发挥作用，尤其是在低氧压力环境中。
3、pqq通过发酵生产，以水溶性形式的pqq二钠盐或biopqq的形式存在。多种细菌都能够产生pqq。其中，利用甲醇的细菌，如methylobacterium、methylobacillus和hyphomicrobium，展示出最高的pqq产量。尽管已经有了完整的pqq的生物合成途径，但调控pqq生物合成的分子机制仍不清楚，因此代谢工程技术在获得高产量的pqq方面相对低效。有研究利用pet28a质粒在大肠杆菌bl21中过表达gluconobacter oxydans的pqqabcde基因簇，结果只在培养基中积累了2mg/l的pqq。在不含丙酮酸脱羧酶编码基因的g.oxydans菌株中，在内源性组成性启动子的控制下，过表达了pqqabcde基因簇和tldd基因，实现了51.32±0.8997mg/l的pqq产量。考虑到上述pqq产量，通过单纯通过基因工程方法过表达一个或几个pqq合成基因来获得高产量的pqq菌株相对困难。
4、已经开发了许多发酵策略来提高pqq的
5、pqq作为一种辅酶，已发现与h.denitrifcans 16-162的生长和活性有关，其可能通过作为参与硝酸盐还原的酶的辅因子来促进反硝化过程。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种吡咯喹啉醌发酵生产方法，采用反硝化菌h.denitrifcans 16-162为底盘菌，配合发酵培养基组分的进一步优化及发酵过程的ph值控制，从而实现发酵生产的pqq浓度、产量和收率都有显著提高。
2、为解决上述技术问题，本专利技术提供一种吡咯喹啉醌发酵生产方法，其采用反硝化菌h.denitrifcans 16-162为底盘菌，所采用的培养基包括15-25g/l ch3oh、1-3g/l(nh4)2so4、1-3g/l kh2po4、5-7g/l na2hpo4。
3、其中，所述培养基还包括2g/l mgso4、30mg/l cacl2·2h2o、5mg/l znso44·7h2o、30mg/l feso4·7h2o、5mg/l mncl2·4h2o、3mg/l cocl2·6h2o以及0.5mg/l cuso4·5h2o。
4、其中，所述发酵培养基为20g/l ch3oh、2g/l(nh4)2so4、3g/l kh2po4、5g/l na2hpo4、2g/l mgso4、30mg/l cacl2·2h2o、5mg/l znso44·7h2o、30mg/l feso4·7h2o、5mg/lmncl2·4h2o、3mg/l cocl2·6h2o以及0.5mg/l cuso4·5h2o。
5、其中，发酵过程中55小时前供氧60％，55小时后供氧40％。
6、其中，发酵过程中前40小时的ph值保持在6.5，然后在剩余的发酵过程中保持在7.0。
7、其中，所述发酵过程进一步具体为：以反硝化菌h.denitrifcans 16-162为底盘菌，在5升发酵系统中进行发酵，发酵罐中含有2.5升所述发酵培养基，采用的发酵条件具体如下：保持温度为30℃，并通过调整搅拌器转速、空气压力和通风率采用两阶段供氧策略，55小时前供氧60％，55小时后供氧40％；通过加入nh4oh以调节ph值，前40小时的ph值保持在6.5，然后在剩余的发酵过程中改为7.0，整个发酵过程持续140h。
8、本专利技术的有益效果
9、本专利技术提供一种吡咯喹啉醌发酵生产方法，通过对发酵培养基组分的进一步优化及发酵过程的ph值控制，从而实现发酵生产的pqq浓度、产量和收率都有显著提高。
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1.一种吡咯喹啉醌发酵生产方法，其特征在于：采用反硝化菌H.denitrifcans 16-162为底盘菌，所采用的培养基包括15-25g/L CH3OH、1-3g/L(NH4)2SO4、1-3g/L KH2PO4、5-7g/LNa2HPO4。
2.如权利要求1所述吡咯喹啉醌发酵生产方法，其特征在于：所述培养基还包括2g/LMgSO4、30mg/L CaCl2·2H2O、5mg/L ZnSO44·7H2O、30mg/L FeSO4·7H2O、5mg/L MnCl2·4H2O、3mg/L CoCl2·6H2O以及0.5mg/L CuSO4·5H2O。
3.如权利要求2所述吡咯喹啉醌发酵生产方法，其特征在于：所述发酵培养基为20g/LCH3OH、2g/L(NH4)2SO4、3g/L KH2PO4、5g/L Na2HPO4、2g/L MgSO4、30mg/L CaCl2·2H2O、5mg/LZnSO44·7H2O、30mg/L FeSO4·7H2O、5mg/L MnCl2·4H2O、3mg/L CoCl2·6H2O以及0.5mg/LCuSO4·5H2O。
...【技术特征摘要】
1.一种吡咯喹啉醌发酵生产方法，其特征在于：采用反硝化菌h.denitrifcans 16-162为底盘菌，所采用的培养基包括15-25g/l ch3oh、1-3g/l(nh4)2so4、1-3g/l kh2po4、5-7g/lna2hpo4。
2.如权利要求1所述吡咯喹啉醌发酵生产方法，其特征在于：所述培养基还包括2g/lmgso4、30mg/l cacl2·2h2o、5mg/l znso44·7h2o、30mg/l feso4·7h2o、5mg/l mncl2·4h2o、3mg/l cocl2·6h2o以及0.5mg/l cuso4·5h2o。
3.如权利要求2所述吡咯喹啉醌发酵生产方法，其特征在于：所述发酵培养基为20g/lch3oh、2g/l(nh4)2so4、3g/l kh2po4、5g/l na2hpo4、2g/l mgso4、30mg/l cacl2·2h2o、5mg/lznso44·7h2o、30mg/l feso4·7h2o、...
【专利技术属性】
技术研发人员：吕望东，冯玉静，
申请(专利权)人：武汉泰澳生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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