一种检测内源性自体胰岛素介导的胰岛素抗体的试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种检测内源性自体胰岛素介导的胰岛素抗体的试剂盒。该试剂盒包括放射性抗原蛋白CR12C，TBST缓冲液，蛋白A琼脂糖和蛋白G琼脂糖；所述放射性抗原蛋白CR12C是采用S<supgt;35</supgt;‑蛋氨酸对抗原蛋白CR12C进行标记后得到。本发明专利技术将两段C肽基因序列通过铰链基因连接到R12序列的两侧，构建出相应的质粒，转录翻译后获得的放射性抗原蛋白CR12C可有效的携带放射性信号，且每个蛋白均包含两个C肽抗原结构域，捕获抗体的能力也大为提高；基于以上设计本发明专利技术成功建立了放射配体法对CR12C抗体的检测，在后续的竞争性抑制实验中进一步证明了捕获的CR12CA为针对胰岛素的抗体IAA，该IAA为内源性胰岛素介导产生。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药，具体涉及一种检测内源性自体胰岛素介导的胰岛素抗体的试剂盒。

技术介绍

1、1型糖尿病(t1dm)胰岛自身抗体包括胰岛素自身抗体(iaa)，谷氨酸脱羧酶抗体(gad)，酪氨酸磷酸酶抗体(ia2)和锌转运体8自身抗体(znt8)，是目前t1dm胰岛β细胞自身免疫破坏的最可靠生物标志，对胰岛自身抗体进行检测有助于了解t1dm的自身免疫病程，并对t1dm患者的诊断、鉴别诊断，以及一般人群和患者一级亲属的风险预测有极大的价值。iaa作为最早出现的胰岛自身抗体，在t1dm的鉴别诊断中具有特殊的地位，不仅可以揭示患者的免疫进程，还可能揭示胰岛素用药前后的抗体变化。患者体内的胰岛素来源包括外源性的注射以及内源性的自体产生两种，这两种胰岛素均会导致iaa的产生，但具有完全不同的指示意义。区别这两种iaa对临床诊断有着重要的提示价值，一直以来iaa的检测均使用胰岛素作为抗原来进行抗体的捕获，也无法对这两种iaa抗体进行有效区分，这也是iaa检测存在的难点。

2、因此，设计能有效检测内源性自体胰岛素(insulin)产生的胰岛素抗体(iaa)本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 一种放射性抗原蛋白CR12C，其特征在于，所述放射性抗原蛋白CR12C是采用S35-蛋氨酸对抗原蛋白CR12C进行标记后得到，所述抗原蛋白CR12C的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种检测内源性自体胰岛素介导的胰岛素抗体的试剂盒，其特征在于，包括：权利要求1所述的放射性抗原蛋白CR12C，TBST缓冲液，蛋白A琼脂糖和蛋白G琼脂糖。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，还包括阳性对照和阴性对照。

4.权利要求2所述的试剂盒在制备1型糖尿病诊断试剂中的应用。

【技术特征摘要】

1. 一种放射性抗原蛋白cr12c，其特征在于，所述放射性抗原蛋白cr12c是采用s35-蛋氨酸对抗原蛋白cr12c进行标记后得到，所述抗原蛋白cr12c的氨基酸序列如seq id no.1所示。

2.一种检测内源性自体胰岛素介导的胰岛素抗体的试剂盒，...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨涛，陈恒，顾愹，
申请(专利权)人：江苏省人民医院南京医科大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：