一种利用蛋白液-液相分离原理提取IgY的方法技术

本发明专利技术具体涉及一种利用蛋白液‑液相分离原理提取IgY的方法，包括以下步骤：1、配置PEG8000母液；2、分离卵黄；3、稀释PEG8000母液至9％～12％与卵黄混匀后促使卵黄液中脂蛋白等杂蛋白聚沉，离心取上清液；4、过滤上清液；5、稀释PEG8000母液至20％～30％与滤液混匀，使滤液中的IgY发生液‑液相分离，离心使相分离的IgY沉降，摒弃上清；6、使用磷酸盐(PBS)缓冲液复溶沉降的IgY；7、将复溶后IgY抗体溶液于PBS缓冲液中4℃过夜透析，收集透析袋内液体即为提取后的IgY抗体。本发明专利技术工序简单，耗时短，对设备需求低，可重复度高，提取效率较高，纯度高，更加快速，稳定，环保，便捷。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种利用蛋白液-液相分离原理提取igy的方法。

技术介绍

1、卵黄抗体(egg yolk antibody，igy)是禽类产生的一种免疫球蛋白，经血液传递到卵黄内，在卵黄中富集。然而，通过对禽类免疫注射特定抗原产生特异性igy，进而可以从卵黄中提取获得特异性多克隆抗体。相对于从哺乳动物血清中获得抗体，这种方法避免了常规的动物采血，减轻了动物的痛苦。同时通过卵黄获得抗体的优势在于产量大、制备简单，且蛋鸡、鸭等禽类易于饲养、费用低、便于大规模生产，经济优势明显。然而，igy繁杂、费时的提取和纯化工艺一直是阻碍其推广应用的瓶颈。常用的igy提取方法主要为聚乙二醇沉淀法、水稀释法、超过滤法、硫酸葡聚糖提取法、氯仿提取法、苯酚提取法和辛酸提取法。这些传统方法步骤复杂，结果不稳定且耗时很长，均在三小时以上。因此，亟需开发一种省时、简便的提取纯化方法。

2、蛋白质液-液相分离是指在特定条件下，蛋白自发从均相变为两相或多相的物理现象，呈现出蛋白浓度较低的稀释相和高浓度、液滴状的致密相，且二者可共存并进行物质交换。这种现象通常本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种利用蛋白液-液相分离原理提取IgY的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种利用蛋白液-液相分离原理提取IgY的方法，其特征在于，步骤(1)中PEG8000母液配置是将PEG8000粉末用纯水溶解至终浓度为32％(w/v)。

3.如权利要求1所述的一种利用蛋白液-液相分离原理提取IgY的方法，其特征在于，步骤(2)中分离卵黄包括以下步骤：用卵黄分离器分离卵黄，用滤纸去除多余蛋清，戳破卵黄膜并收集卵黄液。

4.如权利要求1所述的一种利用蛋白液-液相分离原理提取IgY的方法，其特征在于，步骤(3)中稀释PEG8000母液，离心分...

【技术特征摘要】

1.一种利用蛋白液-液相分离原理提取igy的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种利用蛋白液-液相分离原理提取igy的方法，其特征在于，步骤(1)中peg8000母液配置是将peg8000粉末用纯水溶解至终浓度为32％(w/v)。

3.如权利要求1所述的一种利用蛋白液-液相分离原理提取igy的方法，其特征在于，步骤(2)中分离卵黄包括以下步骤：用卵黄分离器分离卵黄，用滤纸去除多余蛋清，戳破卵黄膜并收集卵黄液。

4.如权利要求1所述的一种利用蛋白液-液相分离原理提取igy的方法，其特征在于，步骤(3)中稀释peg8000母液，离心分离igy与脂蛋白等杂蛋白包括以下步骤：

5.如权利要求4所述的一种利用蛋白液-液相分离原理提取i...

【专利技术属性】
技术研发人员：张小莺，党梅，胡郁章，
申请(专利权)人：陕西理工大学，
类型：发明
国别省市：