【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺在大鼠体内的代谢产物的检测方法
技术介绍
1、心血管疾病是全球死亡率最高的疾病。这些疾病涉及一系列心脏和血管疾病，包括冠心病、脑血管病、风湿性心脏病和其他各种相关疾病。心律失常是窦房结的异常兴奋或在窦房结外产生的异常兴奋。近90％的急性心源性死亡由心律失常引起。目前，主要临床用药为盐酸利多卡因、奎尼丁、普萘洛尔、胺碘酮等，但这些药物容易导致心律失常，而且治疗窗口狭窄，使得在临床实践中的使用受到限制，因此开发新的抗心律失常疾病新药，及其临床前研究极为迫切。
2、四氢异喹啉类化合物是一类具有四氢异喹啉骨架结构的有机化合物。它们是以四氢异喹啉为基础，通过在该骨架上进行取代或改变官能团而得到不同化合物。四氢异喹啉类化合物具有多种不同的药理活性和生物活性，因此在药物研发和医学领域中具有重要的意义。文献显示四氢异喹啉化合物具有抗心律失常、抗菌、抗病毒、降血压和免疫调节等药理活性。近年来，随着对四氢异喹啉结构修饰，已合成出具有活性较好，治疗窗较宽的四氢异喹啉类似物。4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺是人工合成的四氢异喹啉类化合物，其具有较好的抗心律失常活性，但目前该化合物研究只停留在细胞活性水平，及相关模型动物实验中。其在体内的代谢产物还没有进行研究。
3、因此，本专利技术以4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺为母药，通过口服和静脉注射给
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种化合物4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺检测代谢产物的方法，该方法选择哺乳动物大鼠，给大鼠以4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺对照品进行灌胃，给药剂量为19.2mg/kg，实验前12h，禁食不禁水，收集含有4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺的大鼠的含药血浆样品、含药尿液样品和含药粪便样品，于温度-80℃冰箱储存；将含药血浆样品、含药尿液样品和含药粪便样品室温解冻，利用乙腈提取、离心、收集上清液、氮气吹干、复溶，涡旋震荡，离心，取上清液采用高效液相色谱和高分辨质谱进行检测，结果表明：共鉴定出16中种谢产物，其中ⅰ相代谢产物12种，ⅱ相代谢产物4种。该方法为4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺在生物体内的代谢研究提供强有力的支撑，并为其进一步体内药代动力学评价、药学研究以及临床前研究方案提供依据。
2、本专利技术所述的一种化合物4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺检测代谢产物的方法，按下列步骤进行：
3、a、选择哺乳动物大鼠，给大鼠以4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺对照品进行灌胃，给药剂量为19.2mg/kg，实验前12h，禁食不禁水，收集含有4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺的大鼠的含药血浆样品、含药尿液样品和含药粪便样品，于温度-80℃冰箱储存；
4、其中：所含药血浆样品：取大鼠给药后0,0.5,1,2,4h血样，置于含有乙二胺四乙酸的离心管中，离心，得到含药血浆样品，加入3倍体积乙腈除蛋白，离心，转速为10000-15000rpm，离心时间为5-12min，在温度30-40℃氮气下吹干，加入100μl甲醇复溶，超声，离心，取上清液为含药血浆样品；
5、所含药粪便样品：将粪便样品室温晾干后碾碎，按照体积比例为1:5加入乙腈，超声，时间为20-50min，离心，转速为10000-15000rpm，离心时间为5-12min，取上清液，得到含药粪便样品；
6、所含药尿液样品：将尿液样品置于离心管，按照体积比为1:3加入乙腈，超声，时间为10-20min，离心，转速为10000-14000rpm，离心时间为5～12min，取上清液，得到含药尿液样品；
7、b、将步骤a中的含药血浆样品、含药尿液样品和含药粪便样品室温解冻，利用乙腈提取、离心、收集上清液、氮气吹干、复溶，涡旋震荡，离心，取上清液采用高效液相色谱和高分辨质谱进行检测,其中：
8、高效液相色谱的条件为：beh c18色谱柱；流动相：0.09-0.11vol％甲酸水溶液a与乙腈b；柱温：25-35℃；自动进样器温度：8-12℃；进样体积：2-5μl；梯度洗脱程序：0-3min，5vol％b；3-11min，5-7vol％b；11-18min，7vol％b；18-45min，7-30vol％b；流速：0.18-0.22ml/min；
9、质谱条件为：电喷雾离子源为正离子模式；鞘气流速：38-42arb；辅助气流速：8-12arb；喷雾电压为3.1-3.3kv，毛细管温度：315-325℃；s-lens电压：50-60v；高分辨质谱扫描范围m/z 50-2000；68000-70000；二级质谱分辨率15000-18500；归一化碰撞能量：20-60％；质谱的质量容许偏差为5ppm以内；
10、共检测出16种代谢产物，其中ⅰ相代谢产物12种，ⅱ相代谢产物4种。
11、步骤a中含药血浆样品离心的转速为13000-14000rpm，离心时间6-7min。
12、步骤a中含药粪便液样品超声时间为25-30min；离心的转速13000-14000rpm，离心时间6-7min。
13、步骤a中含药尿液液样品超声时间为15-20min，离心的转速为13000-14000rpm，离心时间为6-7min。
14、本专利技术所述的化合物4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺检测代谢产物的方法，该方法采用化合物4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺对大鼠体内的含药血浆样品、含药粪便样品、含药尿液样品的代谢产物进行检测。
15、本专利技术的检测方法为4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺在大鼠体内的代谢过程研究提供了有力支撑。
16、本专利技术所述的化合物4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺检测代谢产物的方法，该方法中化合物4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺后的含有原药及其代谢产物的含药血浆样品、含药粪便样品、含药尿液样品。这样有利于更全面地表征4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺的体本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种化合物4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-N,N-二甲基苯胺检测代谢产物的方法，其特征在于按下列步骤进行：
2.根据权利要求1所述的一种化合物4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-N,N-二甲基苯胺检测代谢产物的方法，其特征在于步骤a中含药血浆样品离心的转速为13000-14000 rpm，离心时间6-7 min。
3.根据权利要求1所述的一种化合物4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-N,N-二甲基苯胺检测代谢产物的方法，其特征在于步骤a中含药粪便液样品超声时间为25-30 min；离心的转速13000-14000 rpm，离心时间6-7 min。
4.根据权利要求1所述的一种化合物4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-N,N-二甲基苯胺检测代谢产物的方法，其特征在于步骤a中含药尿液液样品超声时间为15-20 min，离心的转速为13000-14000 rpm，离心时间为6-7 min。
【技术特征摘要】
1.一种化合物4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺检测代谢产物的方法，其特征在于按下列步骤进行：
2.根据权利要求1所述的一种化合物4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)-n,n-二甲基苯胺检测代谢产物的方法，其特征在于步骤a中含药血浆样品离心的转速为13000-14000 rpm，离心时间6-7 min。
3.根据权利要求1所述的一种化合物4-(6,7-二甲氧基-1,2,3,4...
【专利技术属性】
技术研发人员：买迪娜，喜如奇，刘永强，
申请(专利权)人：中国科学院新疆理化技术研究所，
类型：发明
国别省市：
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