需钠弧菌在表达PET降解酶突变酶中的应用、重组需钠弧菌及其构建方法和应用技术

本发明专利技术属于酶工程技术领域，具体涉及需钠弧菌在表达PET降解酶突变酶中的应用、重组需钠弧菌及其构建方法和应用。本发明专利技术提供了需钠弧菌在表达PET降解酶突变酶IsPETase突变酶和LCC‑ICCG中的应用，并提供了表达IsPETase‑PA突变酶的重组需钠弧菌和表达LCC‑ICCG的重组需钠弧菌，二者具有较高的活性和热稳定性，能够高效表达该IsPETase‑PA突变酶和LCC‑ICCG，从而高效促进PET降解，还可以在开放条件下保持较高的蛋白表达水平，从而能够减省高压灭菌工艺，节约生产成本和淡水资源，为PET生物降解实现产业化打下基础，并且具有较高的表达效率，能够缩短蛋白表达的时间成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及酶工程，具体涉及需钠弧菌在表达pet降解酶突变酶中的应用、重组需钠弧菌及其构建方法和应用。

技术介绍

1、pet生物降解法由于反应条件温和以及绿色环保等优势而受到大量关注，其中如何低成本高效表达pet降解酶是实现pet生物法降解的关键。大肠杆菌由于易于培养且安全，繁殖速度较快，遗传背景清楚，技术操作简单等优势，是目前应用最广泛，最成功的表达体系，常作为异源蛋白高效表达的首选底盘细胞。然而，大肠杆菌的培养依赖淡水作为培养基，应用于工业生产则需要消耗大量淡水资源；并且，微生物培养异源表达蛋白酶时需要进行严格的无菌操作，否则外界微生物的进入会导致过程污染，但传统的高温、密闭灭菌过程需消耗大量能量和复杂的工艺设备，造成能源消耗和成本提升。除此之外，大肠杆菌倍增大约需要20分钟，也增加了蛋白表达的时间成本。以上问题阻碍了该方法的工业发展进程。

技术实现思路

1、针对以上技术问题，本专利技术提供了需钠弧菌在表达pet降解酶突变酶中的应用、重组需钠弧菌及其构建方法和应用。本专利技术通过实验发现，以需钠弧菌作为本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.需钠弧菌在表达PET降解酶突变酶中的应用，其特征在于，所述PET降解酶突变酶包括IsPETase突变酶和LCC-ICCG。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述PET降解酶突变酶为IsPETase突变酶IsPETase-PA，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述PET降解酶突变酶为LCC-ICCG。

4.一种表达IsPETase-PA突变酶的重组需钠弧菌，其特征在于，所述IsPETase-PA突变酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。

5.根据权利要求4所述的表达Is...

【技术特征摘要】

1.需钠弧菌在表达pet降解酶突变酶中的应用，其特征在于，所述pet降解酶突变酶包括ispetase突变酶和lcc-iccg。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述pet降解酶突变酶为ispetase突变酶ispetase-pa，其氨基酸序列如seq id no.1所示。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述pet降解酶突变酶为lcc-iccg。

4.一种表达ispetase-pa突变酶的重组需钠弧菌，其特征在于，所述ispetase-pa突变酶的氨基酸序列如seq id no.1所示。

5.根据权利要求4所述的表达ispetase-pa突变酶的重组需钠弧菌，其特征在于，所述重组需钠弧菌由含有编码ispetase-pa突变酶的核苷酸序列的重组质粒构建得到。

6.根据权利要求5所述的表达ispetase-pa突变酶的重组需钠弧菌，其特征在于，编码所述ispetase-pa突变酶的核苷酸序列如seq id no.2所示。

7.权利要求4～6任一项所述的表达ispetase-pa突变酶的重组需钠弧菌的构建方法，其特征在于，选取测序正确的单克隆，提取质粒，将质粒转化进需...

【专利技术属性】
技术研发人员：齐崴，尤生萍，王梦凡，周煜，苏荣欣，
申请(专利权)人：北京酶好生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：