PET水解酶IsPETaseS92P/D157A-cSP的突变体及其应用制造技术

本发明专利技术属于酶工程技术领域，公开了一种PET水解酶IsPETase<supgt;S92P/D157A</supgt;‑cSP的突变体及其应用。本发明专利技术提供了的PET水解酶IsPETase<supgt;S92P/D157A</supgt;‑cSP的突变体，包括IsPETase<supgt;S92P/D157A/N217D</supgt;‑cSP，其氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。在IsPETase<supgt;S92P/D157A/N217D</supgt;‑cSP基础上，本发明专利技术进一步进化突变，获得PAD‑N204L、PAD‑Y58F和PAD‑Y58F‑N204L三种突变体。与IsPETase<supgt;S92P/D157A</supgt;‑cSP相比，本发明专利技术提供的IsPETase<supgt;S92P/D157A</supgt;‑cSP突变体其PET降解活性显著增强。本发明专利技术可应用于PET酶的制备、降解PET、制备PET降解剂或制备降解PET产品等领域，以促进PET回收再利用，减少环境污染和资源浪费。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶工程，涉及一种pet降酶，具体涉及一种pet水解酶 ispetases92p/d157a-csp的突变体及其应用。

技术介绍

1、1950年，全球每年生产塑料约为200万吨；2017年，该数字已飙升至3.48亿吨，并在不断增长。其中，只有大约20%的废弃塑料被循环利用或焚烧处理，大部分塑料被填埋或丢弃于海洋，废弃塑料遍布全球，造成“白色污染”，严重威胁生态系统多样性和人类生命健康。作为全球使用最广泛的塑料之一，聚对苯二甲酸乙二醇酯（pet）因其优异的化学稳定性和机械性能而受到广泛使用，但由于酯键和芳香核的固有化学惰性难以自然降解。通过生物催化再聚合将pet回收到其单体构建块中被认为是pet管理的最理想和最环保的解决方案。生物催化剂在温和的工艺条件下具有高选择性的优势，并且已经报道了几种具有pet降解活性的酶。2016年，日本研究团队从细菌 ideonella sakaiensis中挖掘到pet解聚酶 ispetase，其能够在环境温度下本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种PET水解酶IsPETaseS92P/D157A-cSP的突变体，其特征在于：其是将IsPETaseS92P//D157A-cSP的氨基酸序列中的第217位的天冬酰胺定点突变为天冬氨酸，其氨基酸序列如SEQ ID No.3所示，命名为IsPETaseS92P/D157A/N217D-cSP。

2.一种PET水解酶IsPETaseS92P/D157A-cSP的突变体，其特征在于：其氨基酸序列为：将IsPETaseS92P//D157A-cSP的氨基酸序列的第217位的天冬酰胺定点突变为天冬氨酸，同时第204位的天冬酰胺定点突变为亮氨酸，其他位置的氨基酸残基不变，所得氨基...

【技术特征摘要】

1.一种pet水解酶ispetases92p/d157a-csp的突变体，其特征在于：其是将ispetases92p//d157a-csp的氨基酸序列中的第217位的天冬酰胺定点突变为天冬氨酸，其氨基酸序列如seq id no.3所示，命名为ispetases92p/d157a/n217d-csp。

2.一种pet水解酶ispetases92p/d157a-csp的突变体，其特征在于：其氨基酸序列为：将ispetases92p//d157a-csp的氨基酸序列的第217位的天冬酰胺定点突变为天冬氨酸，同时第204位的天冬酰胺定点突变为亮氨酸，其他位置的氨基酸残基不变，所得氨基酸序列如seqid no.4所示。

3.一种pet水解酶ispetases92p/d157a-csp的突变体，其特征在于：其氨基酸序列为：将ispetases92p//d157a-csp的氨基酸序列的第217位的天冬酰胺定点突变为天冬氨酸，同时第58位的酪氨酸定点突变为苯丙氨酸，其他位置的氨基酸残基不变，所得氨基酸序列如seq idno.5所示。

4.一...

【专利技术属性】
技术研发人员：齐崴，尤生萍，周煜，王梦凡，
申请(专利权)人：北京酶好生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：