【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物分析领域，具体涉及一种土鳖虫及其制剂中核苷类成分的含量测定方法。
技术介绍
1、土鳖虫为鳖蠊科昆虫地鳖eupolyphaga sinensis walker或冀地鳖steleophagaplancyi(boleny)的雌虫干燥体。在《神农本草经》，《本草纲目》等古代医药著作中均以“蟅虫”入药，有近两千年入药历史，在接骨紫金丹，大黄蛰虫丸等古方中均能见到土鳖虫。药用土鳖虫主要具有破血逐瘀、续筋接骨之功效，临床上对抗血栓、祛风湿、抗肿瘤都具有良好作用。中药配方颗粒包装密封性良好，不易变质，便于运输、贮存、保管，且可直接采用颗粒剂冲服饮用，服用剂量相对较小，也便于携带。土鳖虫配方颗粒是将土鳖虫经现代技术制备而成。我国现状对于中药颗粒和中药饮片应用状况差异较大，中药颗粒应用少于中药饮片的应用。土鳖虫配方颗粒和饮片的应用也存在相似的问题。
2、中药配方颗粒与饮片存在形式不同，制备工艺也有差异，在质量控制方面还没有针对土鳖虫制剂质量控制的方法研究，同时也无法评价土鳖虫饮片与配方颗粒之间成分的相关性。
技术实现思路
1、为解决上述问题，本专利技术提供了一种土鳖虫及其制剂中核苷类成分的含量测定方法，采用高效液相色谱法检测，具体包括如下步骤：
2、1)对照品溶液的制备：取核苷类对照品，加水溶解，即得对照品溶液；
3、2)供试品溶液制备：取待检样品，加水提取，提取液离心，过滤，取滤液，即得供试品溶液；
4、3)分别吸取对照品溶液和供试品
5、色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以甲醇为流动相a，以磷酸二氢钾溶液为流动相b；梯度洗脱程序0～5min，95％b；5-8min，99％b；8-9min，95％b。
6、进一步地，步骤1)所述对照品溶液每1ml含核苷类对照品1～20μg。
7、更进一步地，所述核苷类包括尿嘧啶、次黄嘌呤和/或尿苷。
8、更进一步地，尿嘧啶在对照溶液中的浓度为3.38μg/ml，次黄嘌呤在对照溶液中的浓度为4.32μg/ml，尿苷在对照溶液中的浓度为2.00μg/ml。
9、进一步地，步骤2)所述待检样品与水的质量体积比为1～10g：40～80ml。
10、更进一步地，所述待检样品为土鳖虫饮片或土鳖虫配方颗粒。
11、进一步地，步骤2)所述提取为超声提取，时间30～60min；离心的速度2000～6000r/min，时间10～20min；过滤的滤膜为0.45μm微孔滤膜。
12、进一步地，步骤3)所述色谱条件中色谱柱为：inertsil ods-3色谱柱，规格4.6mm×250mm，5μm；柱温40℃，进样量5μl，流速为1ml·min-1，检测波长360nm。
13、进一步地，步骤3)所述流动相b为10mmol/l磷酸二氢钾溶液。
14、进一步地，核苷类成分的含量按外标法以峰面积计算。
15、本专利技术土鳖虫及其制剂中核苷类成分的含量测定方法，通过特定的色谱条件能准确的测定土鳖虫颗粒和饮片中的核苷类成分尿嘧啶、次黄嘌呤和尿苷的含量，更具特征性的化学成分的标定实现了对土鳖虫及其制剂的质量控制，保障了土鳖虫颗粒和饮片的临床疗效，具备实际推广应用价值。
16、显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
17、以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
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1.一种土鳖虫及其制剂中核苷类成分的含量测定方法，其特征在于：采用高效液相色谱法检测，具体包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于：步骤1)所述对照品溶液每1ml含核苷类对照品1～20μg。
3.根据权利要求1或2所述的含量测定方法，其特征在于：所述核苷类包括尿嘧啶、次黄嘌呤和/或尿苷。
4.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于：步骤2)所述待检样品与水的质量体积比为1～10g：40～80mL。
5.根据权利要求1或4所述的含量测定方法，其特征在于：所述待检样品为土鳖虫饮片或土鳖虫配方颗粒。
6.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于：步骤2)所述提取为超声提取，时间30～60min；离心的速度2000～6000r/min，时间10～20min；过滤的滤膜为0.45μm微孔滤膜。
7.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于：步骤3)所述色谱条件中色谱柱为：Inertsil ODS-3色谱柱，规格4.6mm×250mm，5μm；柱温40℃，进样量5μL，流速为1mL·
8.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于：步骤3)所述流动相B为10mmol/L磷酸二氢钾溶液。
9.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于：核苷类成分的含量按外标法以峰面积计算。
...【技术特征摘要】
1.一种土鳖虫及其制剂中核苷类成分的含量测定方法，其特征在于：采用高效液相色谱法检测，具体包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于：步骤1)所述对照品溶液每1ml含核苷类对照品1～20μg。
3.根据权利要求1或2所述的含量测定方法，其特征在于：所述核苷类包括尿嘧啶、次黄嘌呤和/或尿苷。
4.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于：步骤2)所述待检样品与水的质量体积比为1～10g：40～80ml。
5.根据权利要求1或4所述的含量测定方法，其特征在于：所述待检样品为土鳖虫饮片或土鳖虫配方颗粒。
6.根据权利要求1所述的含量测定方...
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