【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，具体涉及一种cd40抗体或抗原结合片段及其应用。
技术介绍
1、cd40蛋白，又被称为b细胞表面抗原40，是tnf受体超家族成员5(tnfrsf5)，主要表达在b细胞、抗原提呈细胞(apc)、树状突细胞(dc)、巨噬细胞和单核细胞表面，另外，还广泛表达于内皮细胞、血小板和肿瘤细胞表面。cd40蛋白主要介导细胞免疫反应和炎症反应，包括t细胞依赖的免疫球蛋白类型转换、记忆性b细胞成熟和发育。早期有报道cd40的两个配体，一个是热休克蛋白70(hsp70)(wang y,kelly cg,karttunen jt,whittall t,lehnerpj,duncan l,et al.cd40 is a cellular receptor mediating mycobacterial heatshock protein 70stimulation of cc-chemokines.immunity.2001；15(6):971-83.)和c4b结合蛋白(c4bp)(brodeur sr,angelini f,bacharier lb,blom am,mizoguchi e,fujiwara h,et al.c4b-binding protein(c4bp)activates b cells through the cd40receptor.immunity.2003；18(6):837-48.)。cd40的另一个重要的配体是cd40l，后者是32-39kda的ii型跨膜蛋白，属于tnf超家族成员，主要表达在活化
2、从cd40-cd40l的作用机制来看，阻断两者直接的结合，将阻断apc细胞与t细胞直接的信号转导，导致抗原提呈第二信号的缺失和t细胞的自主活化和过敏反应，表现为自身免疫疾病的发生。这种阻断作用，不仅体现为抗原提呈的失效也表现为t细胞的识别障碍。很多研究报道cd40在肿瘤细胞表面广泛表达，特别地，在所有b细胞肿瘤和70％的实体瘤中表达。cd40通路可以表现促进肿瘤和抑制肿瘤生长的双重作用，主要取决于肿瘤的微环境。动物实验结果显示，当肿瘤细胞高表达cd40l蛋白后，会引起实验动物的t细胞阶段的毒性杀伤作用和免疫排斥反应，肿瘤显著缩小。在鼠胰腺癌的kpc模型研究中发现，t细胞活化与t细胞浸润非常低，也没有肿瘤抗原提呈的反应，这个kpc模型也就成为了评价t细胞活化的良好模型。在进行cd40抗体治疗后，肿瘤显著缩小。特别是cd40抗体联用pd-1/pd-l1治疗肿瘤，达到比后者单用更好的效果(ngiow sf,young a,blake sj,hill gr,yagita h,tengmw,et al.agonistic cd40 mab-driven il12 reverses resistance to anti-pd1 in at-cell-rich tumor.cancer research.2016；76(21):6266-77.；zippelius a,schreinerj,herzig p,muller p.induced pd-l1 expression mediates acquired resistance toagonistic anti-cd40 treatment.cancer immunology research.2015；3(3):236-44.)。另外，在ctla4和cd40抗体联用的动物实验也发现了非常好的治疗效果。由此可见，cd40激活抗体可以增加免疫检查点抗体的抗肿瘤效果。一方面，通过激活t细胞增殖分化，另一方面，pd-1/pd-l1和ctla4等免疫检查点抗体可能是cd40的免疫调节辅助剂。在化疗药物与cd40抗体联用治疗肿瘤的研究中，如果t细胞缺陷或缺失，或batf3敲除(dc细胞抗体提呈必需蛋白)，或cd40基因敲除，则没有联用的治疗效果。由此可见，b细胞和巨噬细胞是cd40抗体联合化疗药物治疗肿瘤必须的。虽然具体的机制仍然不十分清楚，cd40抗体与化疗药物联用治疗实体瘤已经处于临床研究阶段了(o’hara mh,o’reilly em,mick r,etal.2019.a phase 1b study of cd40 agonistic monoclonal antibody apx005mtogether with gemcitabine and nab-paclitaxel with or without nivolumab inuntreated metastatic pancreatic ductal adenocarcinoma(pdac)patients.paperpresented at the american association for cancer research annual meeting,atlanta,ga,mar.29–apr.3,abstr.ct004.)。
3、目前对cd40单抗的临床实验研究有roche公司的selicrelumab(ro7009789)，selicrelumab是全人源化的igg2型单克隆抗体。celldex公司的cdx-1140也是全人源化的igg2型单克隆抗体。apexigen公司的apx005m(sotigalimab)抗体则是兔源人源化抗体。各cd40抗体由于fc区域突变改造的原因，其与fcr的交联能力不一样，亲和力有差异。apx005m和adc-1013需要与fcr进行交联，而其他几个抗体并不需要与fcr的交联反应。这种通过与fcr交联来增强信号的方法，在体外和体内实验中被证实是可行的(dahan r,barnhart bc,li f,yamniuk ap,korman aj,ravetch jv.therapeutic activity of agonistic,humananti-cd40 monoclonal antibodies requires selective fcgammar engagement.cancercell.2016；29(6):820-31.)。这是基于有研究关注cd40抗体在安全剂量下，有可能很难达到靶点，因此采用cd40 mab-fcr交联的作用机理来增加治疗效果(knorr da,dahan r,ravetch 本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种CD40抗体或抗原结合片段，包括重链可变区和轻链可变区，其特征在于：
2.根据权利要求1所述的CD40抗体或抗原结合片段，其特征在于：
3.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于：
4.根据权利要求1所述的CD40抗体或抗原结合片段，其特征在于：
5.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于：
6.根据权利要求1所述的CD40抗体或抗原结合片段，其特征在于：
7.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于：
8.根据权利要求1所述的CD40抗体或抗原结合片段，其特征在于：
9.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于：
10.编码权利要求1至9中任一项所述的CD40抗体或抗原结合片段的核酸分子。
11.一种基因表达盒，其包括权利要求10所述的核酸分子。
12.一种重组载体，其包括权利要求10所述的核酸分子、或权利要求11所述的基因表达盒。
13.一种转基因细胞系，其包括权利要求10所述的核酸分子、或权利要求11所述的基因表达盒、或权利要求12所述
14.一种免疫偶联物，其包括：
15.根据权利要求14所述的免疫偶联物，其特征在于，所述偶联部分为可检测标记物、药物、毒素、细胞因子、抗体、抗体Fc片段、抗体scFv片段、放射性核素、酶、金纳米颗粒/纳米棒、纳米磁粒和病毒外壳蛋白中的至少一种。
16.一种检测产品，其包括权利要求1至9中任一项所述的CD40抗体或抗原结合片段、或权利要求10所述的核酸分子、或权利要求11所述的基因表达盒、或权利要求12所述的重组载体、或权利要求13所述的转基因细胞系、或权利要求14或15所述的免疫偶联物。
17.一种药物组合物，其包括权利要求1至9中任一项所述的CD40抗体或抗原结合片段、或权利要求10所述的核酸分子、或权利要求11所述的基因表达盒、或权利要求12所述的重组载体、或权利要求13所述的转基因细胞系、或权利要求14或15所述的免疫偶联物。
18.根据权利要求17所述的药物组合物，其特征在于，还包括药学上可接受的载体。
19.权利要求1至9中任一项所述的CD40抗体或抗原结合片段、或权利要求10所述的核酸分子、或权利要求11所述的基因表达盒、或权利要求12所述的重组载体、或权利要求13所述的转基因细胞系、或权利要求14或15所述的免疫偶联物在制备用于治疗和/或预防肿瘤的药物中的应用。
20.根据权利要求19所述的应用，所述肿瘤为实体瘤或非实体瘤。
21.根据权利要求20所述的应用，所述实体瘤为以下的任意一种：非小细胞肺癌、小细胞肺癌、结直肠癌、黑色素瘤、乳腺癌、食道癌、胃肿瘤、膀胱癌、子宫内膜癌、头颈癌和肾癌。
22.权利要求1至9中任一项所述的CD40抗体或抗原结合片段、或权利要求10所述的核酸分子、或权利要求11所述的基因表达盒、或权利要求12所述的重组载体、或权利要求13所述的转基因细胞系、或权利要求14或15所述的免疫偶联物在制备用于检测CD40的试剂中的应用。
23.权利要求1至9中任一项所述的CD40抗体或抗原结合片段、或权利要求10所述的核酸分子、或权利要求11所述的基因表达盒、或权利要求12所述的重组载体、或权利要求13所述的转基因细胞系、或权利要求14或15所述的免疫偶联物在制备用于阻断CD40L-CD40途径的药物中的应用。
24.权利要求1至9中任一项所述的CD40抗体或抗原结合片段、或权利要求10所述的核酸分子、或权利要求11所述的基因表达盒、或权利要求12所述的重组载体、或权利要求13所述的转基因细胞系、或权利要求14或15所述的免疫偶联物在制备用于诊断CD40相关疾病或病症的诊断试剂中的应用。
25.一种治疗和/或预防肿瘤的方法，其特征在于：向患者施用有效量的权利要求1至9中任一项所述的CD40抗体或抗原结合片段、或权利要求10所述的核酸分子、或权利要求11所述的基因表达盒、或权利要求12所述的重组载体、或权利要求13所述的转基因细胞系、或权利要求14或15所述的免疫偶联物。
26.一种生产蛋白的方法，其特征在于包括以下步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种cd40抗体或抗原结合片段，包括重链可变区和轻链可变区，其特征在于：
2.根据权利要求1所述的cd40抗体或抗原结合片段，其特征在于：
3.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于：
4.根据权利要求1所述的cd40抗体或抗原结合片段，其特征在于：
5.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于：
6.根据权利要求1所述的cd40抗体或抗原结合片段，其特征在于：
7.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于：
8.根据权利要求1所述的cd40抗体或抗原结合片段，其特征在于：
9.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于：
10.编码权利要求1至9中任一项所述的cd40抗体或抗原结合片段的核酸分子。
11.一种基因表达盒，其包括权利要求10所述的核酸分子。
12.一种重组载体，其包括权利要求10所述的核酸分子、或权利要求11所述的基因表达盒。
13.一种转基因细胞系，其包括权利要求10所述的核酸分子、或权利要求11所述的基因表达盒、或权利要求12所述的重组载体。
14.一种免疫偶联物，其包括：
15.根据权利要求14所述的免疫偶联物，其特征在于，所述偶联部分为可检测标记物、药物、毒素、细胞因子、抗体、抗体fc片段、抗体scfv片段、放射性核素、酶、金纳米颗粒/纳米棒、纳米磁粒和病毒外壳蛋白中的至少一种。
16.一种检测产品，其包括权利要求1至9中任一项所述的cd40抗体或抗原结合片段、或权利要求10所述的核酸分子、或权利要求11所述的基因表达盒、或权利要求12所述的重组载体、或权利要求13所述的转基因细胞系、或权利要求14或15所述的免疫偶联物。
17.一种药物组合物，其包括权利要求1至9中任一项所述的cd40抗体或抗原结合片段、或权利要求10所述的核酸分子、或权利要求11所述的基因表达盒、或权利要求12所述的重组载体、或权利要求13所述的转基因细胞系、或权利要求14或15所述的免疫偶联物。
18.根据权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：叶才果，王笑非，曾敏，叶雨晴，
申请(专利权)人：广东安普泽生物医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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