【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于免疫检测领域，具体涉及膜性肾病抗体检测试剂。
技术介绍
1、膜性肾病是引起肾病综合征的主要原因之一。约15％的膜性肾病病例是继发性膜性肾病，其余的膜性肾病病例是特发性的，也称为自身免疫性原发性膜性肾病。约一半的未治疗特发性膜性肾病患者将发展成需要透析或肾移植的终末期肾病。
2、pla2r1是特发性膜性肾病的主要自身抗原，可用于诊断和监测肾移植术之前和之后特发性膜性肾病的治疗，但是仅有约70％的患有特发性膜性肾病的患者具有抗pla2r1自身抗体，所以存在诊断、预后和诊疗不表达pla2r1自身抗原的特发性膜性肾病患者的需要。
3、1型血小板反应蛋白7a域(thsd7a)为特发性膜性肾病(imn)两大主要靶抗原之一，近年来，随着我国imn的发病率迅速增长，对imn的准确诊断显的尤为重要。既往对mn患者的诊断依赖于肾穿刺活检，其虽为诊断金标准，但也是高风险的创伤性检查手段，因此有必要建立一种不伤害受检人的体外诊断thsd7a抗体的方法。目前市面上检测thsd7a抗体主要为bca法，但操作繁琐、无法定量。
4、磁微粒化学发光免疫分析法是化学发光免疫分析法与磁性微粒载体技术相结合的一种检测方法，它利用磁微粒具有超顺磁性、成本低、能耗少和无污染等特点，将待测物抗原(抗体)包被磁微粒形成磁微粒-免疫复合物，发光标记物标记待测物抗原(抗体)制备标记结合物，通过免疫反应形成抗原-抗体-标记抗原(抗体)复合物，发光强度与待测物抗体(抗原)的含量成正比。由于悬浮性磁微粒作为载体具有较高的比表面积，能够更
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提出了一种thsd7a检测试剂盒及其制备方法。
2、根据本专利技术的一个方面，提供了一种thsd7a抗体检测试剂盒，所述试剂盒包含试剂ra和试剂rd，其中，所述试剂ra为磁微粒与thsd7a多肽或其抗体结合片段交联形成的偶联物；所述rd试剂用于检测在所述thsd7a多肽或其抗体结合片段与生物样品中的thsd7a的自身抗体之间形成的抗原抗体复合物，其中，所述rd试剂带有发光标记。
3、根据一个实施方式，所述rd试剂是抗人igg抗体，所述发光标记是吖啶酯或碱性磷酸酶，所述发光标记与所述抗人igg抗体形成偶联物。
4、根据一个实施方式，所述试剂ra的保存液配方为：50mm bicine、0.9% nacl、0-0.05% bsa、0.03-0.05%甘氨酸和/或0.03-0.05%精氨酸、总浓度5%蔗糖和/或海藻糖、0.1%proclin-300，ph7.5；所述试剂rb的保存液配方为：50mm pb、0.9% nacl、0.1% 吐温-20、0-1%的 bsa、0-1% 酪蛋白、总浓度为5% 的甘露醇和/或海藻糖和/或蔗糖、0.1% proclin-300，ph 6.5。优选地，所述ra的保存液配方为：50mm bicine、0.9% nacl、0.05% bsa、0.05%精氨酸、5%蔗糖、0.1% proclin-300，ph7.5，所述试剂rb的保存液配方为：50mm pb、0.9%nacl、0.1% 吐温-20、1% 酪蛋白酸钠、5% 甘露醇、0.1% proclin-300，ph 6.5。
5、根据一个实施方式，所述试剂盒还包含pla2r1多肽或其抗体结合片段。
6、根据一个实施方式，所述试剂盒还包含标准品和磷酸盐缓冲液。
7、根据一个实施方式，所述生物样品是全血、血清、血浆或肾活检。
8、根据一个实施方式，所示试剂盒用于诊断膜性肾病的用途。优选地，所述膜性肾病是特发性膜性肾病。
9、根据本专利技术的另一个方面，提供了所述试剂盒用于评估对患者中的膜性肾病的治疗的有效性的体外方法，所述方法包括：(i)点测定在第一时间点从所述患者获得的样品中的抗thsd7a自身抗体的水平，(ii)测定在第二时间点从所述患者获得的样品中的抗thsd7a自身抗体的水平，以及(iii)比较两个时间点的自身抗体的水平，其中：与所述第一时间点相比，所述第二时间点中抗thsd7a自身抗体水平的降低表明治疗有效，和/或与所述第一时间点相比，所述第二时间点中抗thsd7a自身抗体水平的增加表明治疗无效。
10、本专利技术的试剂盒可配合全自动化学发光仪使用，使thsd7a抗体检测更加方便、准确、快速，具有稳定性好，灵敏度高，重复性好等优点，同时大大缩短了检测时间，35分钟及可出第一个检测，而且操作简易方便，真正实现了检测全自动化。
11、此外，本专利技术的试剂盒适于诊断膜性肾病，尤其是特发性膜性肾病，以及pla2r1阴性膜性肾病患者。
12、本申请的其它特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。
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1.一种THSD7A抗体检测试剂盒，所述试剂盒包含试剂Ra和试剂Rd，其中，
2.根据权利要求1所述的THSD7A抗体检测试剂盒，其中，所述试剂Rd是抗人IgG抗体，所述发光标记是吖啶酯或碱性磷酸酶，所述发光标记与所述抗人IgG抗体形成偶联物。
3.根据权利要求1所述的THSD7A抗体检测试剂盒，其中，所述试剂Ra的保存液配方为：50mM Bicine、0.9% NaCl、0-0.05% BSA、0.03-0.05%甘氨酸和/或0.03-0.05%精氨酸、总浓度5%的蔗糖和/或海藻糖、0.1% Proclin-300，pH7.5；所述试剂Rb的保存液配方为：50mMPB、0.9% NaCl、0.1% 吐温-20、0-1%的BSA、0-1% 酪蛋白、总浓度为5% 的甘露醇和/或海藻糖和/或蔗糖、0.1% Proclin-300，pH 6.5。
4.根据权利要求1所述的THSD7A抗体检测试剂盒，其中，所述试剂Ra的保存液配方为：50mM Bicine、0.9% NaCl、0.05% BSA、0.05%精氨酸、5%蔗糖、0.1% Proclin-3
5.根据权利要求1所述的THSD7A抗体检测试剂盒，所述试剂盒还包含PLA2R1多肽或其抗体结合片段。
6.根据权利要求1所述的THSD7A抗体检测试剂盒，所述试剂盒还包含标准品和磷酸盐缓冲液。
7.根据权利要求1所述的THSD7A抗体检测试剂盒，所述生物样品是全血、血清、血浆或肾活检。
8.权利要求1-7的任一项所述的THSD7A抗体检测试剂盒，其中，所示试剂盒用于诊断膜性肾病的用途。
9.根据权利要求8所述的THSD7A抗体检测试剂盒，所述膜性肾病是特发性膜性肾病。
10.权利要求1-9的任一项所述的THSD7A抗体检测试剂盒用于评估对患者中的膜性肾病的治疗的有效性的体外方法，所述方法包括：
...【技术特征摘要】
1.一种thsd7a抗体检测试剂盒，所述试剂盒包含试剂ra和试剂rd，其中，
2.根据权利要求1所述的thsd7a抗体检测试剂盒，其中，所述试剂rd是抗人igg抗体，所述发光标记是吖啶酯或碱性磷酸酶，所述发光标记与所述抗人igg抗体形成偶联物。
3.根据权利要求1所述的thsd7a抗体检测试剂盒，其中，所述试剂ra的保存液配方为：50mm bicine、0.9% nacl、0-0.05% bsa、0.03-0.05%甘氨酸和/或0.03-0.05%精氨酸、总浓度5%的蔗糖和/或海藻糖、0.1% proclin-300，ph7.5；所述试剂rb的保存液配方为：50mmpb、0.9% nacl、0.1% 吐温-20、0-1%的bsa、0-1% 酪蛋白、总浓度为5% 的甘露醇和/或海藻糖和/或蔗糖、0.1% proclin-300，ph 6.5。
4.根据权利要求1所述的thsd7a抗体检测试剂盒，其中，所述试剂ra的保存液配方为：50mm bicine、0.9% nacl、0.05%...
【专利技术属性】
技术研发人员：张清宇，
申请(专利权)人：南京羿检医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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