System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种NtERF283基因及其编码的蛋白与应用制造技术_技高网

一种NtERF283基因及其编码的蛋白与应用制造技术

技术编号:40142703 阅读:4 留言:0更新日期:2024-01-23 23:52
本发明专利技术公开一种NtERF283基因及其编码的蛋白与应用,所述NtERF283基因碱基序列如SEQ ID NO:1所示。本发明专利技术从烟草中克隆出NtERF283基因,并成功构建了重组表达载体,然后采用农杆菌浸染叶盘法将载体整合到烟草基因组中发现,NtERF283转基因株系在模拟干旱条件下的生长势显著地高于野生型对照,说明在干旱条件下,NtERF283转基因烟草生长受干旱影响较小。此外,NtERF283转基因株系遭受干旱胁迫后的存活率明显高于野生型对照。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物基因工程,具体涉及一种nterf283基因及其编码的蛋白与应用。


技术介绍

1、植物在整个生长发育过程中会遭受许多非生物逆境胁迫,如干旱、高盐、低温等。干旱胁迫是各种逆境胁迫中最普遍的因子之一,严重地影响了植物的生长发育和作物种植分布,造成农作物严重减产甚至绝收。因此,提高作物抗旱能力对农业生产具有重要的意义。

2、烟草属于双子叶植物,管花目,茄科,烟草属,是一种重要的叶用经济作物。烟草在生长过程中对水分要求较高,若遭受干旱胁迫会严重地影响烟叶产量和品质。我国是一个水资源相对缺乏国家,水资源时空分布不均,近年来部分烟区频繁遭受严重干旱,旱灾发生的频率和影响范围不断扩大,持续时间和遭受的损失增加,对我国烟叶生产造成了极大的威胁。通过兴修水利设施解决烟草在生长季节时遭受的干旱问题,虽有不错的效果,但是成本太高,在短期内难于实现全部烟田有配套灌溉,而且在一些烟区无法实施。因此,培育耐旱烟草新品种对烟草的优质高产具有重要的意义。传统杂交育种由于受到抗性亲本资源缺乏的限制,获得优良品种的进程缓慢。随着烟草基因组计划的全面实施,烟草完成了全基因组测序,因此,从烟草中分离、鉴定耐旱相关基因并将其应用到耐旱烟草分子育种中,对于保证烟草的品质和产量具有重要的现实意义。

3、为了解决以上问题,提出本专利技术。


技术实现思路

1、本专利技术第一方面提供一种nterf283基因,其碱基序列如seq id no:1所示。

2、seq id no:1所示序列具体为:

3、

4、

5、本专利技术第二方面提供一种本专利技术第一方面所述的nterf283基因编码的蛋白,其氨基酸序列如seq id no:2所示。

6、seq id no:2所示序列具体为:

7、

8、本专利技术第三方面提供一种与本专利技术第一方面所述的nterf283基因相关的生物材料,其特征在于,包括如下任一种:

9、a)含有所述的nterf283基因的重组表达载体;

10、b)含有所述的nterf283基因的生物工程菌,或含有a)所述的重组表达载体的生物工程菌;

11、c)含有所述的nterf283基因的转基因植物细胞系,或含有a)所述的重组表达载体的转基因植物。

12、可用现有的植物表达载体构建含有nterf283基因的重组表达载体。

13、优选地,使用nterf283基因构建重组表达载体时,可在其转录起始核苷酸前加上任何一种增强型、组成型、组织特异型或诱导型启动子,如花椰菜花叶病毒(camv)35s启动子、泛素(ubiquitin)基因启动子(pubi)、actin启动子等,它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用。

14、优选地,使用本专利技术的基因构建植物表达载体时,还可使用增强子,包括翻译增强子或转录增强子,这些增强子区域可以是atg起始密码子或邻接区域起始密码子等,但必需与编码序列的阅读框相同,以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的,可以是天然的,也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。

15、为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选,可对所用植物表达载体进行加工,如加入在植物中表达可产生抗性的抗生素标记物(庆大霉素标记物、卡那霉素标记物等)或是抗化学试剂标记基因(如抗除草剂基因)等。

16、优选地,使用所述nterf283基因构建重组表达载体时,构建方法如下:是将所述nterf283基因插入pdt1载体的spei酶切位点,得到的所述重组表达载体。

17、本专利技术第四方面提供一种本专利技术第一方面所述的nterf283基因在增强植物耐旱性中的应用。

18、优选地,通过如下方法中的一项或多项增强植物耐旱性,得到耐旱转基因植物:

19、f1)导入所述的nterf283基因;

20、f2)导入所述的蛋白;

21、f3)导入a)和b)中所述的生物材料。

22、所述耐旱转基因植物的耐旱性高于野生型对照。所述耐旱转基因植物为耐甘露醇和/或耐干旱转基因植物。

23、优选地,方法f3中,通过ti质粒、ri质粒、植物病毒载体、如基因枪法、花粉管通道、显微注射、电导、农杆菌介导等生物学方法将所述的生物材料转化到植物细胞或组织中。

24、优选地,所述植物为双子叶植物或单子叶植物,所述双子叶植物为烟草或拟南芥。

25、相对于现有技术,本专利技术具有以下有益效果:

26、本专利技术从烟草中克隆出nterf283基因,并成功构建了重组表达载体,然后采用农杆菌浸染叶盘法将载体整合到烟草基因组中发现,nterf283转基因株系在模拟干旱条件下的生长势显著地高于野生型对照,说明在干旱条件下,nterf283转基因烟草生长受干旱影响较小。此外,将nterf283转基因株系、erf283突变体和对照在营养土中种植,常规条件生长4周后开始断水。断水两周后复水,复水20天后统计存活率,结果发现nterf283转基因株系遭受干旱胁迫后的存活率明显高于野生型对照。

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【技术保护点】

1.一种NtERF283基因,其特征在于,其碱基序列如SEQ ID NO:1所示。

2.一种权利要求1所述的NtERF283基因编码的蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如SEQID NO:2所示。

3.一种与权利要求1所述的NtERF283基因相关的生物材料,其特征在于,包括如下任一种:

4.根据权利要求3所述的生物材料,其特征在于,使用所述NtERF283基因构建重组表达载体时,在其转录起始核苷酸前加上增强型、组成型、组织特异型或诱导型的启动子,所述启动子选自花椰菜花叶病毒(CAMV)35S启动子、泛素(Ubiquitin)基因启动子(pUbi)、Actin启动子。

5.根据权利要求3所述的生物材料,其特征在于,使用所述NtERF283基因构建重组表达载体时使用增强子,包括翻译增强子或转录增强子,所述增强子区域是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子。

6.根据权利要求3所述的生物材料,其特征在于,使用所述NtERF283基因构建重组表达载体时,构建方法如下:将所述NtERF283基因插入pDT1载体的SpeI酶切位点,得到所述重组表达载体。

7.一种权利要求1所述的NtERF283基因在增强植物耐旱性中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,通过如下方法中的一项或多项增强植物耐旱性:

9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,方法F3中,通过Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、基因枪法、花粉管通道、显微注射、电导、农杆菌介导生物学方法将所述的生物材料转化到植物细胞或组织中。

10.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述植物为双子叶植物或单子叶植物,所述双子叶植物为烟草或拟南芥。

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【技术特征摘要】

1.一种nterf283基因,其特征在于,其碱基序列如seq id no:1所示。

2.一种权利要求1所述的nterf283基因编码的蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如seqid no:2所示。

3.一种与权利要求1所述的nterf283基因相关的生物材料,其特征在于,包括如下任一种:

4.根据权利要求3所述的生物材料,其特征在于,使用所述nterf283基因构建重组表达载体时,在其转录起始核苷酸前加上增强型、组成型、组织特异型或诱导型的启动子,所述启动子选自花椰菜花叶病毒(camv)35s启动子、泛素(ubiquitin)基因启动子(pubi)、actin启动子。

5.根据权利要求3所述的生物材料,其特征在于,使用所述nterf283基因构建重组表达载体时使用增强子,包括翻译增强子或转录增强子,所述增强...

【专利技术属性】
技术研发人员:许力徐国云高茜米其利邢佳鑫周会娜许永曹培健李雪梅杨文武陈章玉
申请(专利权)人:云南中烟工业有限责任公司
类型:发明
国别省市:

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