【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于金属纳米粒子制备，具体涉及到果胶绿色合成银纳米粒子及其偶联抗菌肽获得银基纳米材料的绿色制备方法及其在抗菌领域的应用。
技术介绍
1、细菌感染是世界上最难解决的难题之一，它对人类健康构成了严重威胁。众所周知，抗生素可以有效的抑制细菌的生长，其是由微生物或动植物在生长发育过程中合成的具有抗病原体活性的代谢产物，能干扰细胞在发育过程中所需的化学物质，从而起到杀灭或抑制细菌的作用。然而，随着抗生素的滥用以及人类对它们的过度依赖，致使部分细菌为了顺应环境不断进化，在进化的过程中对抗生素产生了一定程度的耐药性，因此，开发新型有效的抗菌剂，治疗由耐药菌引起的感染，是一个急需解决的问题。
2、agnps因其广谱的抗菌性能受到广泛关注，目前已应用在生物医药、化妆品工业等领域。目前已有多种制备agnps的方法，其中生物大分子绿色合成方法因具有绿色、高效、经济的优点从而最受欢迎。尽管纳米颗粒的研究取得了重大进展，但其抗菌效率和广谱性还有待进一步提升。
3、抗菌肽（amps）被认为是传统抗生素对抗多重耐药性（mdr）病原体的最有吸引力的替代品。amps由于其广泛的活性和较低的耐药性，正成为杀死致病菌、原生动物和真菌的必要工具。尽管有这些理想的特性，但amps作为抗菌剂在治疗开发方面依然存在局限性；研究表明，多数的amps对于革兰氏阳性菌具有抑菌活性，而对于革兰氏阴性细菌几乎没有，因此扩大其被限制的抗菌谱是人们需要解决的问题。
4、为了克服上述两类抗菌剂所存在的局限性，研究者不断在寻找有效的方法。最近，抗
5、研究表明，果胶作为还原剂和稳定剂，能够绿色合成果胶基agnps，然而合成的产物虽具有广谱的抗菌性能，但其抗菌能力仍然有待提升。而nisin作为一种活性阳离子多肽，可以与绿色合成的果胶基agnps进行偶联，形成纳米银-生物偶联物，nisin协同纳米银发挥作用可有效提升纳米银的抗菌活性及拓宽nisin的抗菌谱。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题是绿色合成抗菌肽-纳米银偶联物的一种新思路。通过在已经绿色合成的果胶基agnps溶液中加入一种抗菌肽——nisin进行负载形成nisin@果胶基agnps溶液，其中果胶作为还原剂和稳定剂，nisin作为一种表面活性剂，其偶联作用可以显著提升纳米银的抗菌性。
2、为解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案：
3、一种nisin@果胶基agnps偶联物的绿色制备方法，包括以下步骤：
4、（1）准确配置0.1～0.8mol/l的硝酸银溶液和1g/l的氢氧化钠溶液；
5、（2）准确称取果胶400mg，加入200ml氢氧化钠溶液，置于500ml杯中，形成浓度为2mg/ml的果胶碱溶液。置于恒温磁力水浴锅中，50～80℃，500r/min条件下辅助溶解10～20min。
6、（3）取4ml硝酸银溶液逐滴加入到上述溶液中，50～80℃，500r/min条件下反应10～20min。
7、（4）称取nisin粉末50～300mg加入到充分反应的果胶基agnps溶液中，50～80℃，500r/min条件下搅拌偶联10～20min，完成后取出烧杯静置20min。
8、（5）根据紫外410nm左右吸收峰值择优选取反应条件，取反应后的液体高速离心，转速10000r/min，离心时间20min。取其沉淀，加入适量的蒸馏水，重复离心2～3次，沉淀置于50℃烘箱烘干过夜，获得抗菌肽偶联的银纳米粒子。
9、本专利技术的创新及优点：
10、1、本专利技术利用果胶绿色合成纳米银，通过恒温磁力水浴搅拌的方式，将nisin与果胶基agnps偶联。形成了一种性能稳定、抗菌性能极佳的nisin@果胶基agnps偶联物。
11、2、本专利技术采用的nisin@果胶基agnps偶联物的制备方法，全程采用恒温磁力水浴搅拌的方法，制备工艺绿色简单、成本低，反应高效，且避免了有毒试剂的使用。
12、3、本专利技术的nisin@果胶基agnps偶联物不仅具有纳米银的生物特性如广谱抗菌活性，还兼具了nisin的抗菌生物活性。因此，作为一种稳定高效、成本低廉、广谱抗菌的抗菌材料，其弥补了纳米银和nisin本身所具有的缺点，极大的拓宽了抗菌剂的应用前景，为开发抗耐药菌的抗菌剂研究提供科学依据。
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1.一种Nisin@果胶基AgNPs偶联物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1中所述的一种Nisin@果胶基AgNPs偶联物的制备方法，其特征在于，所述步骤中果胶碱溶液制备方法为准确称取定量果胶，在恒温磁力搅拌水浴的条件下加入氢氧化钠溶液，最终获得果胶完全溶解的碱溶液。
3.根据权利要求1中所述的一种Nisin@果胶基AgNPs偶联物的制备方法，其特征在于，所述步骤中硝酸银溶液制备方法为准确称取定量的硝酸银溶于定量蒸馏水中，得到浓度为0.1～0.8mol/L的硝酸银溶液。
4.根据权利要求1中所述的一种Nisin@果胶基AgNPs偶联物的制备方法，其特征在于，所述步骤中，恒温磁力搅拌水浴锅温度为50～80℃，转速为500r/min，滴入硝酸银溶液后反应时间10～20min。
5.根据权利要求1中所述的一种Nisin@果胶基AgNPs偶联物的制备方法，其特征在于，所述步骤中，称取Nisin粉末50～300mg，加入到果胶基AgNPs溶液中进行搅拌偶联，恒温磁力搅拌水浴锅温度为50～80℃，转速为500r/min，
6.根据权利要求1中所述的一种Nisin@果胶基AgNPs偶联物的制备方法，其特征在于，所述步骤中，离心转速为10000r/min，时间为20min，烘干温度为50℃，过夜。
7.一种权利要求1-6中任一项所述的制备方法制备获得的Nisin@果胶基AgNPs偶联物在抑菌领域中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种nisin@果胶基agnps偶联物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1中所述的一种nisin@果胶基agnps偶联物的制备方法，其特征在于，所述步骤中果胶碱溶液制备方法为准确称取定量果胶，在恒温磁力搅拌水浴的条件下加入氢氧化钠溶液，最终获得果胶完全溶解的碱溶液。
3.根据权利要求1中所述的一种nisin@果胶基agnps偶联物的制备方法，其特征在于，所述步骤中硝酸银溶液制备方法为准确称取定量的硝酸银溶于定量蒸馏水中，得到浓度为0.1～0.8mol/l的硝酸银溶液。
4.根据权利要求1中所述的一种nisin@果胶基agnps偶联物的制备方法，其特征在于，所述步骤中，恒温磁力搅拌水浴锅温度为50～...
【专利技术属性】
技术研发人员：李培骏，谢闰生，曹兴业，李海云，
申请(专利权)人：桂林理工大学，
类型：发明
国别省市：
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