【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于血稀释液，具体涉及一种外周血稀释液及其应用。
技术介绍
1、外周血是体外诊断的主要样本来源之一，使用滤膜法或微流控技术获取血细胞用于体外诊断检测是常见的方法学，但外周血的密度与粘度因人而异，甚至一天的不同时段也有差异，尤其是高血脂人群的外周血，在过滤或者是通过微流控的时候经常发生堵塞，影响了外周血中血细胞的获取效率，甚至导致了实验的失败。
2、现有的中国专利cn116466089a公开采用微流控芯片与多重免疫荧光探针技术的基于sclc分子分型的ctc的检测试剂盒及其鉴定方法，采用的是取sclc患者的血液并采用人外周血淋巴细胞分离液进行密度梯度离心法分离出sclc患者的外周血单核细胞pbmc，然后将sclc患者的外周血单核细胞pbmc注入微流控芯片内以富集捕获ctc细胞，这种方法需要将外周血先进行先一步处理，不但增加了实验的繁琐，而且在取单核细胞pbmc时不同的实验人员人为误差很大，最终造成实验结果的不稳定。
3、现有的中国专利cn113214959b公开一种用于分离捕获尤文肉瘤循环肿瘤细胞的芯片，直接将外周血以6ml/h的流速从血液入口处通入芯片，这样非常容易对微流控造成堵塞。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是为了解决现有技术中存在外周血的密度与粘度因人而异，在过滤或者是通过微流控的时候经常发生堵塞的缺点，而提出的一种外周血稀释液及其应用。
2、为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
3、设计一种外周血稀释
4、进一步的，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液、tris缓冲液、hepes缓冲液中的一种或几种的混合。
5、进一步的，所述磷酸盐缓冲液的浓度为155.2mm nacl,1.059mm kh2po4,2.967mmna2hpo4,ph值为7.4±0.1，内毒素含量确保低于1eu/ml。
6、进一步的，所述抗凝剂为乙二胺四乙酸、草酸钠、肝素类、枸橼酸钠中的一种，浓度为1-100mmol。
7、进一步的，所述表面活性剂为吐温20、吐温80、曲拉通100中的一种，浓度为0.1％-2％。
8、进一步的，所述消化酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶中的一种。
9、进一步的，所述胰蛋白酶的活力大于10,00baee units/mg，浓度为1-50mg/l。
10、进一步的，所述酶抑制剂为凝血酶和纤维蛋白溶酶的抑制剂。
11、进一步的，所述酶抑制剂为盐酸苯脒水合物，浓度为1-100mg/l。
12、为了解决上述技术问题，本专利技术还提出了一种外周血稀释液的应用，将所述的外周血稀释液与外周血按照2：1的比例混合，室温孵育10min。
13、采用盐酸苯脒水合物，为了抑制酵母蛋白酶，可以用0.5-4.0mm范围浓度，它在很大程度上可与胃蛋白酶抑制剂互换除chemicalbook了作为强有力胰蛋白酶抑制剂的竞争物，盐酸苯甲脒是一个强有力的凝血酶和纤维蛋白溶酶的竞争性抑制剂。盐酸苯甲脒作为抑肽酶可有效防止退化人血浆中胰高血糖素降解。
14、与现有技术相比，采用本专利技术提出的一种外周血稀释液，有益效果在于：本专利技术通过非常简单的处理流程，即可将外周血的粘度和密度落在一个可用于过滤或微流控处理的合理范围内而不发生堵塞。本稀释液对外周血的处理不需要其他额外的设备，如离心机等，且耗时短，仅需室温10分钟左右即可。同时稀释液具有配置简单、运输保存简便、成本可控等优势。
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1.一种外周血稀释液，其特征在于，所述稀释液包括缓冲液、抗凝剂、表面活性剂、消化酶和酶抑制剂。
2.根据权利要求1所述的一种外周血稀释液，其特征在于，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液、TRIS缓冲液、HEPES缓冲液中的一种或几种的混合。
3.根据权利要求1所述的一种外周血稀释液，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液的浓度为155.2mM NaCl,1.059mM KH2PO4,2.967mM Na2HPO4,pH值为7.4±0.1，内毒素含量确保低于1EU/ml。
4.根据权利要求1所述的一种外周血稀释液，其特征在于，所述抗凝剂为乙二胺四乙酸、草酸钠、肝素类、枸橼酸钠中的一种，浓度为1-100mmol。
5.根据权利要求1所述的一种外周血稀释液，其特征在于，所述表面活性剂为吐温20、吐温80、曲拉通100中的一种，浓度为0.1％-2％。
6.根据权利要求1所述的一种外周血稀释液，其特征在于，所述消化酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶中的一种。
7.根据权利要求6所述的一种外周血稀释液，其特征在于，所述胰蛋白酶的活力大于
8.根据权利要求1所述的一种外周血稀释液，其特征在于，所述酶抑制剂为凝血酶和纤维蛋白溶酶的抑制剂。
9.根据权利要求8所述的一种外周血稀释液，其特征在于，所述酶抑制剂为盐酸苯脒水合物的盐酸苯甲脒，浓度为1-100mg/L。
10.一种外周血稀释液的应用，其特征在于，将权利要求1-9任一项所述的外周血稀释液与外周血按照2：1的比例混合，室温孵育10min。
...【技术特征摘要】
1.一种外周血稀释液，其特征在于，所述稀释液包括缓冲液、抗凝剂、表面活性剂、消化酶和酶抑制剂。
2.根据权利要求1所述的一种外周血稀释液，其特征在于，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液、tris缓冲液、hepes缓冲液中的一种或几种的混合。
3.根据权利要求1所述的一种外周血稀释液，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液的浓度为155.2mm nacl,1.059mm kh2po4,2.967mm na2hpo4,ph值为7.4±0.1，内毒素含量确保低于1eu/ml。
4.根据权利要求1所述的一种外周血稀释液，其特征在于，所述抗凝剂为乙二胺四乙酸、草酸钠、肝素类、枸橼酸钠中的一种，浓度为1-100mmol。
5.根据权利要求1所述的一种外周血稀释液，其特征在于，所述表面活性剂为吐温20、...
【专利技术属性】
技术研发人员：彭小玲，杨小二，袁丽，
申请(专利权)人：南京卫凯立生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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