【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药,具体涉及一种胰腺内分泌细胞及制备方法。
技术介绍
1、胰岛尤其是其中的β细胞对于机体血糖控制十分重要,对于一些糖尿病患者尤其是ⅰ型糖尿病患者,胰岛移植是一种有效的治疗手段,但是胰岛供体十分有限,通过干细胞分化获得用于移植的胰岛类器官是一种很好的替代方案。
2、从胚胎干细胞(escs)或者诱导多能干细胞(ipscs)分化胰岛β细胞现有多种方案,都是通过一些化合物组合按照特定的顺序模拟胰岛β细胞的发育过程,将多功能干细胞依次分化为终端内胚层(definitive endoderm)、原始消化管(primitive guttube)、后前肠组织(posterior foregut)、胰腺前体细胞(pancreatic progenitors)、胰岛细胞(maturedislet cell)几个步骤。
3、具体地,首先通过小分子化合物chir99021和activina蛋白调节wnt和tgfβ信号通路,将escs或ipscs分化为终端内胚层,该步骤的分化效率大约在80%左右;然后通过生长因子kgf
...【技术保护点】
1.一种制备胰腺内分泌细胞的方法,其特征在于,所述方法包括:在胰腺前体细胞分化为胰腺内分泌细胞的过程中,3)采用悬浮培养得到胰腺内分泌细胞。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在胰腺前体细胞分化为胰腺内分泌细胞的过程中,包括以下步骤:
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,在胰腺前体细胞分化为胰腺内分泌细胞的过程中,包括以下步骤:
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤1)中,使用消化酶将贴壁的胰腺前体细胞消化为单细胞。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤1)中,所述消化酶选自accuta
...【技术特征摘要】
1.一种制备胰腺内分泌细胞的方法,其特征在于,所述方法包括:在胰腺前体细胞分化为胰腺内分泌细胞的过程中,3)采用悬浮培养得到胰腺内分泌细胞。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在胰腺前体细胞分化为胰腺内分泌细胞的过程中,包括以下步骤:
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,在胰腺前体细胞分化为胰腺内分泌细胞的过程中,包括以下步骤:
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤1)中,使用消化酶将贴壁的胰腺前体细胞消化为单细胞。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤1)中,所述消化酶选自accutase酶、tryple、trypsin、edta中的一种或一种以上。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤2)中,使用aggrewell板将所述单细胞制成均匀大小的细胞团。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤3)中,使用摇床进行所述悬浮培养得到胰腺内分泌细胞。...
【专利技术属性】
技术研发人员:米雪,刘彤日,付自醒,
申请(专利权)人:北京意胜生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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