【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于应用基础医学研究领域，具体涉及一种神经管畸形动物模型的构建方法。
技术介绍
1、神经管畸形是一种在胚胎发育过程中神经管闭合失败导致的中枢神经系统出生缺陷，包括脑膨出、脊柱脊膜膨出、脊柱裂等，是一种严重的先天性出生缺陷型疾病。神经管畸形的发病原因极为复杂，遗传学研究表明，它是由一系列遗传因素和环境因素相互共同作用而引发的。神经管畸形通常发生于怀孕的早期，一旦发生不可逆转，多在孕期或出生后很短的时间内死亡。因此，深入研究神经管畸形的发病机制对出生缺陷预防工作和出生人口质量有重要的意义。
2、遗传学研究表明，神经管畸形是由一系列遗传因素和环境因素相互共同作用而引发的，比如妊娠早期叶酸和微量元素的缺乏，妊娠早期接触化学物质、射线、高热、药物、感染等，使得与神经管发育相关的基因发生结构改变或表达障碍。通过预防性干预防止神经管畸形的发生，或通过产前筛查而适时终止妊娠，是应对神经管畸形挑战的重要策略。比如孕妇在孕前l个月至孕后4个月内，坚持口服叶酸，可使胎儿神经管畸形发生率降低70％；而对于产前筛查检出的严重神经管畸形，终止妊娠也不失为一种明智的选择。但是不论是遗传因素还是环境干预的机制目前都不明确，这对预防和治疗神经管畸形带来了很大的困难。
3、近年来，研究人员一直在试图寻找神经管畸形的候选基因，研究数据主要来源于生物化学和发育学途径、动物模型以及定位候选基因三方面，由于小鼠神经管发育机制与人类神经管发育过程十分接近，因而成为了人们研究神经管畸形发生机制最主要的一种模式动物。目前有学者使用维甲酸建立神经
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术中使用药物干预动物建立神经管畸形动物模型，药物使用剂量和干预时间不一致的缺陷，提供一种神经管畸形动物模型的构建方法。
2、为解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案进行。
3、本专利技术的第一方面提供一种神经管畸形动物模型的构建方法，所述构建方法采用雷帕霉素信号通路的抑制剂干预怀孕动物，使动物胚胎形成神经管畸形。
4、本专利技术的一些实施方式中，所述干预的时期为怀孕动物胚胎发育至开始形成神经管时。
5、本专利技术的一些实施方式中，在所述怀孕动物胚胎发育的7.5天将所述雷帕霉素信号通路的抑制剂干预怀孕动物。
6、本专利技术的一些实施方式中，所述雷帕霉素信号通路的抑制剂为雷帕霉素、雷帕霉素药学上可接受的盐、雷帕霉素衍生物或雷帕霉素衍生物药学上可接受的盐。
7、本专利技术的一些实施方式中，所述雷帕霉素药学上可接受的盐，其既可以由于含有酸也可以由于含有碱部分而形成这种盐。在可以施用的情况下，当雷帕霉素包含合适的碱基部分时，可以与有机酸或者无机酸，例如乙酸、丙酸、乳酸、柠檬酸、酒石酸、琥珀酸、反丁烯二酸、马来酸、丙二酸、苹果酸、邻苯二甲酸、盐酸、氢溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、甲基磺酸、萘磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、樟脑磺酸、和公知的可接受的相似的酸形成药学上可接受的盐。当雷帕霉素包含合适的酸基部分时，也可以与有机碱和无机碱例如碱金属盐，例如钠，锂，或钾、碱土金属盐、铵盐，包括1-6个碳原子的烷基铵盐或者在每个烷基上包含1-6个碳原子的二烷基铵盐，以及每个烷基上包含1-6个碳原子的三烷基胺盐成盐。
8、本专利技术的一些实施方式中，所述雷帕霉素衍生物，如依维莫司、替西罗莫司、佐他莫司、sar543、子囊霉素、地磷莫司、ap23841、ku-0063794、ink-128、ex2044、ex3855、ex7518、azd08055、osi-027、wye-125132、xl765、nv-128、wye-125132及em101/ly303511。
9、本专利技术的一些实施方式中，所述雷帕霉素衍生物药学上可接受的盐，其既可以由于含有酸也可以由于含有碱部分而形成这种盐。在可以施用的情况下，当雷帕霉素包含合适的碱基部分时，可以与有机酸或者无机酸，例如乙酸、丙酸、乳酸、柠檬酸、酒石酸、琥珀酸、反丁烯二酸、马来酸、丙二酸、苹果酸、邻苯二甲酸、盐酸、氢溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、甲基磺酸、萘磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、樟脑磺酸、和公知的可接受的相似的酸形成药学上可接受的盐。当雷帕霉素包含合适的酸基部分时，也可以与有机碱和无机碱例如碱金属盐，例如钠，锂，或钾、碱土金属盐、铵盐。
10、本专利技术的一些实施方式中，所述雷帕霉素信号通路的抑制剂为雷帕霉素。
11、本专利技术一些实施方式中，所述雷帕霉素按照怀孕动物的体重进行干预，所述雷帕霉素的干预剂量为0.5-5mg/kg。
12、本专利技术一些实施方式中，所述雷帕霉素按照怀孕动物的体重进行干预，所述雷帕霉素的干预剂量为0.5-1mg/kg。
13、本专利技术一些具体实施方式中，所述雷帕霉素信号通路的抑制剂按照怀孕动物的体重进行干预，所述雷帕霉素的干预剂量为1mg/kg。
14、本专利技术一些实施方式中，所述神经管畸形动物模型的表型为：脑膨出、脊柱脊膜膨出、颅脊柱裂、发育迟缓、颅面部畸形、眼部畸形或吸收胎。
15、本专利技术的一些实施方式中，所述干预的方式包括灌胃、口服、皮下注射、皮内注射、肌肉注射、腹腔注射、尾静脉注射、皮下静脉注射、颅内给药、脊髓腔内给药、耳缘静脉注射或局部涂抹。
16、本专利技术一些实施方式中，所述怀孕动物为c57bl/6j小鼠。
17、与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术在小鼠怀孕的第7.5天，采用雷帕霉素诱导怀孕小鼠的胚胎形成神经管畸形。雷帕霉素信号通路与胚胎发育密切相关，但大多在基因层面干预研究，本研究直接利用雷帕霉素信号通路的抑制剂干预孕鼠，构建小鼠神经管畸形模型。为今后对雷帕霉素在胚胎神经研究中提供模型基础。
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1.一种神经管畸形动物模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括采用雷帕霉素信号通路抑制剂干预怀孕动物，使动物胚胎形成神经管畸形。
2.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述干预的时期为怀孕动物胚胎发育至开始形成神经管时。
3.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述雷帕霉素信号通路的抑制剂为雷帕霉素、雷帕霉素药学上可接受的盐、雷帕霉素衍生物或雷帕霉素衍生物药学上可接受的盐。
4.如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述雷帕霉素信号通路的抑制剂为雷帕霉素。
5.如权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述雷帕霉素按照怀孕动物的体重进行干预，所述干预的剂量为0.5-5mg/kg。
6.如权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述干预的剂量为0.5-1mg/kg。
7.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述神经管畸形动物模型的表型为：脑膨出、脊柱脊膜膨出、颅脊柱裂、发育迟缓、颅面部畸形、眼部畸形或吸收胎。
8.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述干预的方式包括灌胃、口服、
9.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述怀孕动物为C57BL/6J小鼠。
...【技术特征摘要】
1.一种神经管畸形动物模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括采用雷帕霉素信号通路抑制剂干预怀孕动物，使动物胚胎形成神经管畸形。
2.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述干预的时期为怀孕动物胚胎发育至开始形成神经管时。
3.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述雷帕霉素信号通路的抑制剂为雷帕霉素、雷帕霉素药学上可接受的盐、雷帕霉素衍生物或雷帕霉素衍生物药学上可接受的盐。
4.如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述雷帕霉素信号通路的抑制剂为雷帕霉素。
5.如权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述雷帕霉素按照怀孕动物的体重进...
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