【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本申请大体上涉及使用细胞外囊泡(evs)进行的组织工程。更具体地，本申请涉及一种将evs固定在细胞外基质(诸如胶原)中的方法以增加evs在组织工程和再生医学应用中的保留和生物活性。
技术介绍
1、间充质干细胞(mscs)可以从多种组织获得，并已经在许多应用中证明出强大的功效。越来越多的证据表明，mscs的治疗益处在很大程度上是通过旁分泌机制经由msc分泌组，并且特别是以携带evs装载物的形式(诸如核苷酸、脂质、酶、信号转导蛋白、免疫调节细胞因子和生长因子)来实现的。msc来源的evs的治疗功效已经在多种损伤修复模型中得到充分证明，通过包括但不限于诱导细胞增殖和迁移、血管生成以及抗凋亡和抗炎作用等机制实现。此外，与使用活细胞的疗法相比，基于ev的疗法不太可能引发不良的免疫反应，免于外来细胞不受控制的生长的影响，并且不受基于活细胞的疗法的物流和监管问题的影响。
2、纳米级evs代表了一种独特的细胞衍生物，反映了mscs对组织工程的治疗潜力。然而，全身施用的evs经历快速清除，并且通常没有集中的靶向给药，因此降低了它们在治疗性再生疗法中的有效性。因此，有利地，应开发一种固定evs的方法以实现evs的受控递送和延长滞留，从而可以在其他治疗应用中长期支持组织再生和修复。
技术实现思路
1、本申请的实施例是一种将evs固定在诸如胶原的基质材料中的方法。在一个实施例中，所述方法将带有代谢掺入的叠氮化物配体的msc来源的evs的化学选择性固定在二苯并环辛炔修饰的胶原水凝胶中，从而能够实
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1.一种用于产生固定的细胞外囊泡的方法，其包括：
2.根据权利要求1所述的方法，
3.根据权利要求1所述的方法，
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞外基质材料包括能够与环辛炔或磷化氢试剂偶联的天然的或合成的生物材料。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞外基质材料选自由以下组成的组：胶原、纤维蛋白、明胶、纤连蛋白、基质胶、弹性蛋白、和其他脱细胞细胞外基质或提取的细胞外基质。
6.根据权利要求2所述的方法，其中所述环辛炔试剂选自由以下组成的组：二苯并环辛炔、二氟环辛炔、双芳基氮杂环辛炔酮和双环壬炔酮。
7.根据权利要求1所述的方法，进一步包括：
8.根据权利要求1所述的方法，进一步包括：
9.根据权利要求1所述的方法，其中使用叠氮化物配体功能化细胞外囊泡包括：
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述聚糖代谢工程和氨基酸代谢工程靶向所述细胞外囊泡的天然途径。
11.根据权利要求9所述的方法，其中所述聚糖代谢工程靶向所述细胞外囊泡的用于唾液酸糖基化或其
12.根据权利要求1所述的方法，进一步包括：
13.根据权利要求12所述的方法，其中所述叠氮化物探针选自由以下组成的组：四酰基化的N-叠氮基乙酰基甘露糖胺、四酰基化的N-叠氮基乙酰基半乳糖胺、四酰基化的N-叠氮基乙酰基葡萄糖胺和L-叠氮基高丙氨酸。
14.根据权利要求1所述的方法，其中用所述叠氮化物补充试剂功能化细胞外基质材料包括：
15.根据权利要求1所述的方法，其中固定的所述细胞外囊泡用于选自由以下组成的组的应用中：移植物血管化、缺血后损伤修复、伤口愈合、组织再生、对植入的材料和/或器官的免疫反应调节以及移植的器官的生存力和功能改进。
16.根据权利要求15所述的方法，其中所述组织选自由以下组成的组：骨、肺、肝、皮肤、肾、心脏、血管、胰腺、肠和胃。
17.根据权利要求15所述的方法，其中所述器官选自由以下组成的组：肝、肺、胰腺、肌肉、皮肤、肾、心脏、血管、肠、胃和骨。
18.根据权利要求1所述的方法，进一步包括：
19.一种生物材料，其通过前述权利要求中任一项所述的方法产生。
20.一种生物材料，其包括：
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种用于产生固定的细胞外囊泡的方法，其包括：
2.根据权利要求1所述的方法，
3.根据权利要求1所述的方法，
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞外基质材料包括能够与环辛炔或磷化氢试剂偶联的天然的或合成的生物材料。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞外基质材料选自由以下组成的组：胶原、纤维蛋白、明胶、纤连蛋白、基质胶、弹性蛋白、和其他脱细胞细胞外基质或提取的细胞外基质。
6.根据权利要求2所述的方法，其中所述环辛炔试剂选自由以下组成的组：二苯并环辛炔、二氟环辛炔、双芳基氮杂环辛炔酮和双环壬炔酮。
7.根据权利要求1所述的方法，进一步包括：
8.根据权利要求1所述的方法，进一步包括：
9.根据权利要求1所述的方法，其中使用叠氮化物配体功能化细胞外囊泡包括：
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述聚糖代谢工程和氨基酸代谢工程靶向所述细胞外囊泡的天然途径。
11.根据权利要求9所述的方法，其中所述聚糖代谢工程靶向所述细胞外囊泡的用于唾液酸糖基化或其他糖基化途径的天然途径，并且所述氨基酸代谢工程靶向用于细胞外囊...
【专利技术属性】
技术研发人员：任熙，菲利普·G·坎贝尔，邢芸慧，西戈帕拉克里希纳·赛莉拉普莱萨·叶尔内尼，
申请(专利权)人：卡内基·梅隆大学，
类型：发明
国别省市：
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