一种蓖麻蚕丝素蛋白单克隆抗体的制备方法技术

本发明专利技术涉及单克隆抗体制备的技术领域，公开了一种蓖麻蚕丝素蛋白单克隆抗体的制备方法，包括如下步骤：(1)选取蚕茧样品，去掉蚕蛹以及内部蚕蛹排泄物；(2)取烘干的蚕茧置于铜乙二胺溶液中溶解；(3)取溶解好的溶液倒入透析袋中透析，最后得到蓖麻蚕丝素蛋白粉；(4)取蓖麻蚕丝素蛋白粉使用生理盐水常温溶解，得到的丝素蛋白溶液与完全弗氏佐剂混合，再进行完全乳化；将乳化好的免疫原在小鼠的皮下、腹腔进行多点注射；(5)在21天后用不完全弗氏佐剂代替完全弗氏佐剂进行二次免疫，再经过培养、增殖、纯化，得到蓖麻蚕丝素蛋白单克隆抗体。本发明专利技术制得的蓖麻蚕丝素蛋白单克隆抗体特异性强，检测效果好，且制备方法简单。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于单克隆抗体制备的，更具体涉及一种蓖麻蚕丝素蛋白单克隆抗体的制备方法。

技术介绍

1、蓖麻蚕属于典型的鳞翅目昆虫，与家蚕、柞蚕一起并称为我国的三大绢丝昆虫，也是一种重要的经济昆虫，已经成为我国广泛饲养的绢丝昆虫之一，仅次于我国家蚕和柞蚕的第三大蚕。蓖麻蚕的茧丝性能优良并具有独特的风格，可以作为绢纺原料，纺织高级的织物，用于提取家蚕和柞蚕的溶液并不能很好的用于蓖麻蚕的溶解，蓖麻蚕茧丝中的次要成分茧丝蜡和无机物含量较高，这些无机物与丝胶混合在一起，填充了茧层内茧丝之间的空隙，因此茧层的结构变得更加紧密。此外，茧丝形状较为扁平，增加了茧丝之间的接触面积，进一步增加了茧层的密度和网状结构，这导致蓖麻蚕丝不容易被溶解。目前已有研究在蓖麻蚕丝胶蛋白的单克隆抗体制备，对蓖麻蚕丝素蛋白单克隆抗体的制备研究还很有限，但未来会有更多的研究工作致力于蓖麻蚕丝素蛋白看克隆抗体的制备和应用，以探索其在医学、生物技术等领域的潜力。所以找到一种快速溶解蓖麻蚕提取丝素蛋白的方法，制备出特异性高的蓖麻蚕丝素蛋白抗体有着重要的作用。

>技术实现思路...

【技术保护点】

1.一种蓖麻蚕丝素蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的蓖麻蚕丝素蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述铜乙二胺溶液的pH为8.4-8.6。

3.如权利要求1所述的蓖麻蚕丝素蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述透析袋的节流分子量为3000-4000，每6-8h换一次水，透析24-30h。

4.如权利要求1或3所述的蓖麻蚕丝素蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述离心为在12000-14000转/分的转速下离心5-10min。

5.如权利要求1所述的...

【技术特征摘要】

1.一种蓖麻蚕丝素蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的蓖麻蚕丝素蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述铜乙二胺溶液的ph为8.4-8.6。

3.如权利要求1所述的蓖麻蚕丝素蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述透析袋的节流分子量为3000-4000，每6-8h换一次水，透析24-30h。

4.如权利要求1或3所述的蓖麻蚕丝素蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述离心为在12000-14000转/分的转速下离心5-10min。

5.如权利要求1所述的蓖麻蚕丝素蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述生理盐水的浓度为1-3mg/ml。

6.如权利要求1或5所述的蓖麻蚕丝素蛋白单克隆抗体...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜浩，李俊婷，李艺畅，张超，吕连鹏，王秉，
申请(专利权)人：浙江理工大学，
类型：发明
国别省市：