一种亚硝化细菌的快速高通量筛选方法技术

本发明专利技术属于微生物技术领域，涉及一种亚硝化细菌的快速高通量筛选方法。亚硝化细菌固体培养基中加入50mg/L的BTB（溴百里酚蓝）制作显色培养基，用盐酸或氢氧化钠将其pH调节至7.0，趁热将其分装至96孔板中，待其冷却凝固后，再将待分离的菌液梯度稀释后接种至各孔，倒置培养7~14天，通过观察BTB的变色效应，并结合亚硝氮显色效应，识别阳性孔。在分离筛选亚硝化细菌上，传统技术要经过4代培养，ZL 201510503292.5也需要培养2代，本发明专利技术方法只需要一代培养，大大节约了时间，提供了效率2‑4倍。另外通过显色来指示阳性，方便直观，便于操作。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物，涉及一种亚硝化细菌的快速高通量筛选方法。

技术介绍

1、由于氮(特别是氨氮)是水体富营养化污染的主要原因之一，“硝化→反硝化”是最常见的水体脱氮过程，也广泛应用于污水处理和地表水的治理中。多数研究表明，“硝化→反硝化”过程中，“硝化”是常见的限速步骤，其中又以“亚硝化”(将氨氮氧化为亚硝氮)的限速效应最为明显，因此分离筛选高效的亚硝化细菌对于提高污水处理和地表水的治理中的脱氮效果有重要意义。

2、目前，从环境中分离筛选亚硝化细菌的常规方法是：1、先通过至少3轮的平板划线(采用接种针/环实现)才能获得纯的亚硝化细菌菌落；2、对分离得到的每一株纯化菌株均需通过专门的脱氨氮试验才能初步确定该纯化菌株的亚硝化能力。综上所述，分离筛选亚硝化细菌的常规方法至少要对亚硝化细菌连续培养4代。在此过程中，仅有不到1％的菌株具有亚硝酸活性。而专利技术人之前已有的筛选亚硝化细菌的高通量筛选方法(zl201510503292.5)，也需要在固体培养基上进行至少2轮培养，才能识别并获得可培养的亚硝化细菌菌落，耗时也较长。因此，研发耗时更短的亚硝酸菌本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种亚硝化细菌的快速高通量筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的快速高通量筛选方法，其特征在于，将BTB固体培养基在121℃的温度下灭菌20min，将环氧乙烷灭菌的塑料96孔板放入洁净超净工作台紫外线照射30min。

【技术特征摘要】

1.一种亚硝化细菌的快速高通量筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的快速高通量筛选方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：程凯，陈诚，李月娜，蔡雨衡，
申请(专利权)人：湖北工业大学，
类型：发明
国别省市：