一种过表达基因质粒、构建方法及其用途技术

本发明专利技术属于基因工程技术领域，公开了一种过表达基因质粒、构建方法及其用途。该构建方法包括：全基因合成Circ_0058514序列，对所获得的基因序列和pcDNA3.1(+)真核表达载体进行限制性内切酶HindIII和KpnI双酶切，并进行连接；将连接产物转化到E.coliTop10感受态细胞，筛选阳性克隆进行扩大培养；抽提过表达circ_0058514基因质粒，酶切后进行测序鉴定。本发明专利技术通过过表达Circ_0058514分析巨噬细胞炎症因子表达、吞噬细菌功能的变化，有助于突破现有认知，进一步挖掘Circ_0058514基因功能。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程，尤其涉及一种过表达基因质粒、构建方法及其用途。

技术介绍

1、创面感染是下肢开放性骨折最常见的并发症，也是长期困扰骨科领域的难点问题。文献报道，高暴力开放性创伤的患者即使在5小时内接受彻底清创，诊疗期间发生感染的几率仍为28％；开放性骨折gustiloⅲ型严重软组织损伤的患者发生创面及深部感染的风险更高达50％。感染不仅破坏组织的正常结构及功能，而且加重局部缺血、缺氧及过度炎症反应，严重妨碍愈合修复过程，极易引发骨髓炎、骨不连、肢体功能缺失甚至导致截肢，给患者带来巨大痛苦。统计数据表明，创面感染使下肢开放性骨折患者平均住院时间延长54天、平均住院费用增加1.89倍，浪费了大量医疗卫生资源。

2、巨噬细胞协调下的固有免疫应答在抵御细菌感染与维持免疫稳态中发挥极其重要的作用。巨噬细胞作为组织内的常驻吞噬细胞能在感染发生后迅速识别并吞噬杀菌，是最早做出反应的免疫细胞；同时通过模式识别受体pprs介导nf-κb、c/ebp、mapk等信号通路表达炎症因子及趋化因子，不仅促进组织细胞分泌抗菌肽直接杀伤细菌，还使中性粒细胞迅速聚集到本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种过表达基因质粒，其特征在于，所述过表达基因质粒的DNA序列为SEQ ID NO：1。

2.根据权利要求1所述过表达基因质粒，其特征在于，利用所述过表达基因质粒转染制备巨噬细胞，在测定炎性因子表达水平上应用。

3.根据权利要求1所述过表达基因质粒，其特征在于，利用所述过表达基因质粒转染制备增强吞噬细菌能力的巨噬细胞。

4.一种过表达基因质粒的构建方法，其特征在于，该构建方法包括以下步骤：

5.根据权利要求4所述的过表达基因质粒的构建方法，其特征在于，在步骤S1具体包括：

6.根据权利要求4所述的过表达基因质粒的构建方法，其...

【技术特征摘要】

1.一种过表达基因质粒，其特征在于，所述过表达基因质粒的dna序列为seq id no：1。

2.根据权利要求1所述过表达基因质粒，其特征在于，利用所述过表达基因质粒转染制备巨噬细胞，在测定炎性因子表达水平上应用。

3.根据权利要求1所述过表达基因质粒，其特征在于，利用所述过表达基因质粒转染制备增强吞噬细菌能力的巨噬细胞。

4.一种过表达基因质粒的构建方法，其特征在于，该构建方法包括以下步骤：

5.根据权利要求4所述的过表达基因质粒的构建方法，其特征在于，在步骤s1具体包括：

6.根据权利要求4所述的过表达基因质...

【专利技术属性】
技术研发人员：李曈曈，葛翔，白树财，卜国云，许海委，韩小磊，陈晨，张玺，霍振鑫，
申请(专利权)人：天津市天津医院，
类型：发明
国别省市：