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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及发光蛋白芯片,特别涉及血清中抗原类蛋白的化学发光蛋白芯片方法和试剂盒。
技术介绍
1、蛋白质芯片是一种高通量的蛋白功能分析技术,可用于蛋白质表达谱分析,研究蛋白质与蛋白质的相互作用,甚至dna-蛋白质、rna-蛋白质的相互作用,筛选药物作用的蛋白靶点等。
2、蛋白芯片技术的研究对象是蛋白质,其原理是对固相载体进行特殊的化学处理,再将已知的蛋白分子产物固定其上(如酶、抗原、抗体、受体、配体、细胞因子等),根据这些生物分子的特性,捕获能与之特异性结合的待测蛋白(存在于血清、血浆、淋巴、间质液、尿液、渗出液、细胞溶解液、分泌液等),经洗涤、纯化,再进行确认和生化分析;它为获得重要生命信息(如未知蛋白组分、序列。体内表达水平生物学功能、与其他分子的相互调控关系、药物筛选、药物靶位的选择等)提供有力的技术支持。
3、现有的蛋白芯片,不具备有高通量的验证能力,因此我们提出了血清中抗原类蛋白的化学发光蛋白芯片方法和试剂盒。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于至少解决现有技术中存在的技术问题之一,提供血清中抗原类蛋白的化学发光蛋白芯片方法和试剂盒,
2、为实现上述目的,本专利技术提供如下技术方案:血清中抗原类蛋白的化学发光蛋白芯片方法,包括以下步骤:
3、s1:标准品的制备和稀释,使用前1小时内溶解、稀释;
4、s2:样品准备:血清、血浆、细胞培养上清、细菌或者组织裂解液的上清。上样前可以用samplediluent适当
5、s3:cy3标记的链霉亲和素准备:加入1.4mlsamplediluent溶解备用;
6、s4:从冰箱取出芯片,恢复室温后,撕掉盖膜,室温干燥1-2小时;
7、s5:加入100ulsamplediluent室温封闭30分钟;
8、s6:吸出封闭液,在1-6we11中加入标准品100ul,7-16we11中加入待测样品血清100u1;室温孵育1小时;
9、s7:芯片清洗,200ul的1x洗液i洗5遍,200ul的1x洗液ii洗2遍;
10、s8:抗体结合,每孔加入抗体80ul,室温孵育1小时;
11、s9:芯片清洗,200ul的1x洗液i洗5遍,200ul的1x洗液ii洗2遍;
12、s10:标记,每孔加入80ulcy3标记的链霉亲和素,避光室温孵育1小时;
13、s11:继续清洗,200ul的1x洗液i洗4遍,除去围栏,200u1的1x洗液i摇洗15分钟,200ul的1x洗液ii摇洗5分钟;
14、s12:芯片干燥,1000g,离心3分钟。
15、血清中抗原类蛋白的化学发光蛋白芯片试剂盒,包括碳酸钠、碳酸氢钠、二喹啉甲酸、酒石酸钠溶于m氢氧化钠中、4%硫酸铜一次性标准白蛋白、牛血清白蛋白(bsa)存在于5%盐和4%叠氮化钠中。
16、与现有技术相比,本专利技术的有益效果是:
17、(1)、该血清中抗原类蛋白的化学发光蛋白芯片方法和试剂盒,直接用粗生物样品(血清、尿、体液)进行分析,同时快速发现多个生物标记物,高通量的验证能力。
18、(2)、该血清中抗原类蛋白的化学发光蛋白芯片方法和试剂盒,发现低丰度蛋白质测定疏水蛋白质:与“双相电泳加飞行质谱”相比,除了有相似功能外,并可增加测定疏水蛋白质,在同一系统中集发现和检测为一体特异性高利用单克隆抗体芯片,可鉴定未知抗原/蛋白质,以减少测定蛋白质序列的工作量。
19、(3)、该血清中抗原类蛋白的化学发光蛋白芯片方法和试剂盒,可以定量利用单克隆抗体芯片,由于结合至芯片上的抗体是定量的,故可以测定抗原量,但一般飞行质谱不用于定量分析。
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1.血清中抗原类蛋白的化学发光蛋白芯片方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.血清中抗原类蛋白的化学发光蛋白芯片试剂盒,其特征在于,包括碳酸钠、碳酸氢钠、二喹啉甲酸、酒石酸钠溶于M氢氧化钠中、4%硫酸铜一次性标准白蛋白、牛血清白蛋白(BSA)存在于 5%盐和 4%叠氮化钠中。
【技术特征摘要】
1.血清中抗原类蛋白的化学发光蛋白芯片方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.血清中抗原类蛋白的化学发光蛋白芯片试剂盒,其特征在于,包...
【专利技术属性】
技术研发人员:李琼英,
申请(专利权)人:深圳市赛尔生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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