一种荧光定量PCR方法的肠道菌群定量检测试剂盒技术

本发明专利技术涉及微生物检测技术领域，且公开了一种荧光定量PCR方法的肠道菌群定量检测试剂盒，包括：荧光定量PCR反应液、菌株标准品、对照品。荧光定量PCR反应液包含PCR反应缓冲液、特异性上下游引物、特异性探针。PCR反应缓冲液含氯化镁和三磷酸脱氧核糖核酸混合物、耐热Taq DNA聚合酶。对照品分阴性对照和阳性对照，阴性对照为高压灭菌的焦碳酸二乙酯处理水，阳性对照为标准菌株的阳性质粒样品。比传统的普通PCR和单重荧光定量PCR方法更简便、快速和准确，对检测的微生物进行实时准确定量，为临床上疑似肠道微生态紊乱，肠道疾病患者早期明确诊断，以便及时制定治疗方案。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物检测，具体为一种荧光定量pcr方法的肠道菌群定量检测试剂盒。

技术介绍

1、目前，国内比较常见，也比较成熟的两种肠道菌群基因检测方法，分别是：方法1是基于pcr的16s-rdna扩增子测序法、方法2是宏基因组测序法、方法3是rt-qpcr(荧光定量pcr)法。对比现有的微生物检测方法，方法1和方法2虽然成熟可靠，成本相对较低，适合大规模数据建模和统计分析使用，适合用来分析肠道菌群的多样性，推测出菌群的变化，可知样品中的优势菌群，探讨菌群与疾病的关系，也可用来猜测不同种的细菌等优点。但是，由于扩增子测序上机检测需要大量时间，数据占用的电脑空间很大，仪器昂贵，不利于该技术在市场上普及。技术层面上由于需要先经过一轮pcr扩增，对样品中的dna片段进行富集来放大信号，这样就很容易在处理时遗漏掉一些本来含量较低，但对人体可能有较大影响的细菌。

2、方法3pcr技术在食品安全检测中的应用和推广提升了食品安全检测的准确性和安全系数，对比以往的食品检测方法，pcr技术在肠道菌群检测中的应用和推广提升了微生物检测的准确性和安全系数。pcr技术本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种荧光定量PCR方法的肠道菌群定量检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括：荧光定量PCR反应液、菌株标准品、对照品。

2.根据权利要求1所述的一种荧光定量PCR方法的肠道菌群定量检测试剂盒，其特征在于：所述荧光定量PCR反应液包含PCR反应缓冲液、特异性上下游引物、特异性探针。

3.根据权利要求2所述的一种荧光定量PCR方法的肠道菌群定量检测试剂盒，其特征在于：所述PCR反应缓冲液含氯化镁和三磷酸脱氧核糖核酸混合物、耐热Taq DNA聚合酶。

4.根据权利要求1所述的一种荧光定量PCR方法的肠道菌群定量检测试剂盒，其特征在于：所述对照品分阴性对照...

【技术特征摘要】

1.一种荧光定量pcr方法的肠道菌群定量检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括：荧光定量pcr反应液、菌株标准品、对照品。

2.根据权利要求1所述的一种荧光定量pcr方法的肠道菌群定量检测试剂盒，其特征在于：所述荧光定量pcr反应液包含pcr反应缓冲液、特异性上下游引物、特异性探针。

3.根据权利要求2所述的一种荧光定量pcr方法的肠道菌群定量检测试剂盒，其特征在于：所述pcr反应缓冲液含氯化镁和三磷酸脱氧核糖核酸混合物、耐热taq dna聚合酶。

4.根据权利要求1所述的一种荧光定量pcr方法的肠道菌群定量检测试剂盒，其特征在于：所述对照品分阴性对照和阳性对照，阴性对照为高压灭菌的焦碳酸二乙酯处理水，阳性对照为标准菌株的阳性质粒样品。

5.根据权利要求1所述的一种荧光定量pcr方法的肠道菌群定量检测试剂盒，其特征在于：所述细菌的获取和培养方式为粪便中提取和从中国微生物菌种保藏中心购买标准；所述提取方法为使用稀释倒平板法，涂布平板法，平板划线法和稀释摇管法，并将培养的细菌做全基因组的检测，确定细菌所属的菌属，临床样本来源于近期患者的粪便标本，样本采集后低温保存并及时运送到实验室。

6.根据权利要求1所述的一种荧光定量pcr方法的肠道菌群定量检测试剂盒，其特征在于：所述特异性探针和引物的设计包括ncbi基因库上下载了世界各地的目标菌属的序列...

【专利技术属性】
技术研发人员：张茂好，
申请(专利权)人：中科基因科技山东有限公司，
类型：发明
国别省市：