【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药物检测分析，具体涉及一种利用高效液相色谱-质谱联用检测可食组织中硝基咪唑类、抗病毒类、氯霉素类药物残留的方法。
技术介绍
1、硝基咪唑类药物是一类具有5-硝基咪唑环结构的药物，包括甲硝唑、地美硝唑、羟基甲硝唑、羟基地美硝唑等，主要用于治疗和预防厌氧菌引起的局部或系统感染，也用于抗滴虫和阿米巴原虫等。硝基咪唑类药物含有的硝基杂环类化合物具有细胞诱变性，从而导致此类药物有致癌作用和潜在的致畸作用，我国规定甲硝唑、地美硝唑及其盐、酯及制剂不准以促进动物生长为目的在所有食品动物饲养过程中使用，地美硝唑、甲硝唑等药物不得在动物性食品中检出。
2、金刚烷胺，属于三环氨类药物，对流感病毒有抑制作用，广泛用于畜禽养殖业，用来防止禽流感等疾病，但是，食用金刚烷胺类药后会产生呕吐以及神经紊乱症状等相对明显的副作用，而且其在体内降解代谢的量极微。若长期食用残留量高或被此类药物污染的食品，会在人体内富集，对中枢神经系统造成不良影响。我国2005年禁止了金刚烷胺用于食品动物，不得在动物性食品中检出。
3、氯霉素属抑菌性广谱抗生素，用于治疗由伤寒杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、流感杆菌、布氏杆菌、肺炎球菌等引起的感染。氯霉素常被用于畜禽动物及水产品的疾病治疗和预防，但会造成动物源性食品中的药物残留。但是它对造血系统有严重不良反应，可能发生不可逆性骨髓抑制，氯霉素可透过胎盘屏障，对早产儿和足月产新生儿均可能引起毒性反应，发生“灰婴综合征”。我国原农业部第235号公告中已将氯霉素列为不得检出药物。
4、目前，国家及
5、在现有的研究报道中，同时测定动物可食组织中硝基咪唑类(甲硝唑、地美硝唑、羟基甲硝唑、羟基地美硝唑)、抗病毒类(金刚烷胺)、氯霉素的方法还未见报道，但是在动物源性食品的监督检验中，动物可食组织中硝基咪唑类(甲硝唑、地美硝唑、羟基甲硝唑、羟基地美硝唑)、抗病毒类(金刚烷胺)、氯霉素类药物的残留检测是非常重要的。因此，研究同时测定动物可食组织中硝基咪唑类、抗病毒类、氯霉素的残留，为提高食品的卫生质量，保证食品的安全及人类的健康，对食品中的药物残留进行准确测定是亟需的，对实际应用有很大的价值，对节省人力物力和检测时间具有紧迫意义。
技术实现思路
1、克服现有技术的不足，本专利技术提供了一种可食组织中药物残留的检测方法，利用高效液相色谱-质谱联用检测可食组织中硝基咪唑类(甲硝唑、地美硝唑、羟基甲硝唑、羟基地美硝唑)、抗病毒类(金刚烷胺)、氯霉素类药物的残留情况，准确、迅速、全面的检测可食组织中药物残留，加强质量安全检测，使食品质量得到可靠保障。
2、具体而言，本专利技术的技术方案如下：
3、本专利技术提供了一种利用高效液相色谱-质谱联用检测可食组织中药物残留的方法，其特征在于，所述方法包括：(1)前处理提取；(2)前处理净化；(3)高效液相色谱-质谱检测。
4、其中，所述前处理提取为：
5、准确称取均质试样于具塞离心管中,加入酸化乙腈或乙腈，加入提取盐包，用多管涡旋混合仪2500r/min涡旋振荡3-10min，4-6℃，9000r/min离心5-10min,取上清液置于另一离心管中,剩余残渣再次加入酸化乙腈或乙腈,重复上次操作，得到提取样液。
6、进一步的，所述酸化乙腈为0.1％酸化乙腈，所述提取盐包为重量比为1:1-3的mgso4和nacl，优选的，mgso4的nacl重量比为1:2。
7、其中，所述前处理净化步骤为：
8、将mep柱和mcx柱按照从上到下顺序装好，依次甲醇、水和柠檬酸缓冲液活化，转移提取样液至固相萃取柱的顶部，以0.5ml/min流速过柱，用柠檬酸缓冲液、水、水-甲醇溶液淋洗柱，抽干后，依次用甲醇和甲醇-氨水溶液洗脱柱上的待分析成分，合并收集洗脱液，在氮吹浓缩装置上于40-45℃的温度下蒸干。加入含0.1％甲酸的水-甲醇溶液振荡溶解残渣后，过0.22μm滤膜，滤液供液相色谱-质谱测定。
9、其中，所述高效液相色谱-质谱检测中色谱条件为：
10、色谱柱：c18柱；
11、流动相a：含0.1％甲酸的乙腈+酒石酸钠缓冲溶液(90+10，体积比)；
12、流动相b：含0.1％甲酸的2mmol/l乙酸铵水溶液+甲醇(95+5，体积比)；
13、流速：0.2-0.7ml/min；
14、进样量：25μl
15、梯度洗脱：
16、
17、进一步的，所述酒石酸钠缓冲溶液的ph为3.0-4.5，优选为酒石酸钠缓冲溶液的ph＝3.5。
18、需要说明的是，专利技术人经过大量实验，反复尝试各种流动相(甲酸、乙腈、甲醇、异丙醇、乙酸铵等及其组合)，选择了上述流动相a和流动相b的组合，其中利用流动相a：含0.1％甲酸的乙腈；流动相b：含0.1％甲酸的2mmol/l乙酸铵水溶液+甲醇(95+5，体积比)检测时，发现各特征峰保留时间距离较近，也存在一定的拖尾现象，于是通过利用缓冲溶液调节ph来改善上述问题，通过筛选，在酒石酸钠缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、磷酸缓冲液、碳酸缓冲液、tris缓冲液。醋酸缓冲液中选择了更为适合的酒石酸钠缓冲液，且ph为3.0-4.5能够解决上述问题，达到很好的分离效果，回收率高，rsd小。另外，梯度洗脱条件也是专利技术人经过不断尝试筛选出来的最佳实验条件。
19、优选的，所述高效液相色谱-质谱检测中色谱条件为：
20、色谱柱：hypersil gold c18(100mm×2.1mm，5μm)；
21、流动相a：含0.1％甲酸的乙腈+酒石酸钠缓冲溶液(90+10，体积比)；
22、流动相b：含0.1％甲酸的2mmol/l乙酸铵水溶液+甲醇(95+5，体积比)；
23、流速：0.6ml/min；
24、进样量：25μl；
25、梯度洗脱程序为：
26、
27、
28、其中，所述高效液相色谱-质谱检测中质谱条件为：
29、离子源：电喷雾离子源；
30、扫描方式：正离子扫描；
31、检测方式：多反应监测；
32、电离电压：3.0-4.0kv；
33、萃取电压：1.0-3.0v；
34、源温：100-120℃；
35、雾化温度：330-370℃本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种利用高效液相色谱-质谱联用检测可食组织中药物残留的方法，其特征在于，所述方法包括：(1)前处理提取；(2)前处理净化；(3)高效液相色谱-质谱检测。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述前处理提取为：
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述酸化乙腈为0.1％酸化乙腈，所述提取盐包为重量比为1:1-3的MgSO4和NaCl，优选的，MgSO4的NaCl重量比为1:2。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述前处理净化步骤为：
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱-质谱检测中色谱条件为：
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述酒石酸钠缓冲溶液的pH为3.0-4.5，
7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱-质谱检测中色谱条件为：
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱-质谱检测中质谱条件为：
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述质谱条件为：
10.根据权利要求1所述
11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述可食组织包括但不限于猪肉、鸡肉，牛肉、羊肉、猪肝、鸡肝、禽蛋、牛奶。
...【技术特征摘要】
1.一种利用高效液相色谱-质谱联用检测可食组织中药物残留的方法，其特征在于，所述方法包括：(1)前处理提取；(2)前处理净化；(3)高效液相色谱-质谱检测。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述前处理提取为：
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述酸化乙腈为0.1％酸化乙腈，所述提取盐包为重量比为1:1-3的mgso4和nacl，优选的，mgso4的nacl重量比为1:2。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述前处理净化步骤为：
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱-质谱检测中色谱条件为：
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述酒...
【专利技术属性】
技术研发人员：王磊，史艳艳，王辉，辛永波，辛鑫，康福忠，王洪宇，钱坤，
申请(专利权)人：天津市农业生态环境监测与农产品质量检测中心天津市农业机械质量鉴定中心，天津市农药兽药检定中心，
类型：发明
国别省市：
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