一种气虚发热动物模型及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种气虚发热动物模型及其制备方法和应用。本发明专利技术气虚发热动物模型是采用游泳劳损法加限食法得到的大鼠气虚发热模型。本发明专利技术气虚发热动物模型的制备方法如下：将大鼠控制饮食并力竭游泳，腹腔注射ＬＰＳ。本发明专利技术气虚发热动物模型可以用于气虚发热病症的中医临床辨证论治，还可为中医治疗气虚发热病症的研究提供平台。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及中医疾病研究的模型领域，具体涉及一种用于气虚发热病症研究的气 虚发热动物模型及其制备方法。
技术介绍
近几年来有关各种气虚证的造模方法形式多样，有疲劳加饮食失节或泻下去，偏 食苦味或酸味，耗气破气或苦寒泻下加耗气破气等(李军兰，方肇勤.气虚证动物模型造模 方法.上海中医药大学学报，2004，18(3) :56-60.)。目前比较公认的气虚造模方法主 要有单纯疲劳法、疲劳加饮食失节法、疲劳加泻下法、烟熏法及手术(吴捷，刘勤社，高洁， 等.养血妇康颗粒剂对实验性气血虚证动物的影响.陕西中医，2002，23 (5) =467-469.； 陈家旭，陈易新，季绍良，等.泻下、劳倦因素致脾气虚下鼠下丘脑、血浆NPY含量的变化 .北京中医药大学学报，2002，25(6) =22-24.；田道法，唐发清，周小军，等.气虚证模型 大鼠反义DNA阵列A区基因表达谱特征的初步研究.湖南中医学院学报，2001，21(2) 1-3.；高雪，李浩，曲敬来，等.补肺汤对肺气虚证大鼠下呼吸道病理变化的影响.中 医药信息，2000，17 (5) :55-56.)，但总体上以采用疲劳的方法为主，在疲劳的基础上加用限 食、泻下等方法。有研究表明，应用疲劳加限食法制作的动物气虚模型更符合中医理论，可 使气更不足，气虚症候更明显。气虚多由先天禀赋不足，或后天失养，或劳伤过度而耗损(劳则气耗)，或久病 不复，气的生化不足等所致(张珍玉.对中医学气的认识.浙江中医学院学报，2000， 24(1) :32-32.)，临床上可导致多种病证的发生，发热是其中之一，热势或高或低，但因气虚 所致，故发热多在劳累后发作或加剧。目前实验大鼠发热模型主要以酵母、内毒素(LPS)和 2，4_ 二硝基酚最为常见，其共同的特点是造模方便，成功率高，对实验条件要求也比较低。 其中LPS诱导的发热与传统的中医学症候所致发热相似，是较经典的发热模型，因此常用 于筛选中药解热药物并探讨发热机制(唐晓峰，薛漫清，王晖.大鼠发热模型及发热机制的 研究进展.广东药学院学报，2009，25 (3) :327-331.)。PGE是公认的中枢发热介质(金惠铭主编.病理生理学.北京.人民卫生出版社， 第五版，2001 :96.)。研究资料表明，致热原引起发热时，脑脊液及下丘脑中？6氏含量明显 增加。动物侧脑室注入微量的PGE2可诱导发热反应，并且PGE2可直接刺激P0/AH区温度敏 感神经元，改变其放电频率，抑制PGE合成和释放的物质能抑制发热反应(赵红艳，范书择， 孙丽华等.黄芩甙对发热大鼠下丘脑PGE2和cAMP含量的影响.中国应用生理学杂志， 2002,18(2) :139-141.)。根据以往的资料，国内多数学者主张cAMP也是发热的中枢介质之 一。胡景新等静脉注射ET或EP引起家兔双相热时，脑脊液和下丘脑中cAMP含量均明显增 多，且与体温上升呈显著正相关(张量，佟雷，杨宇等.低温时蛙皮素对IL-10致热大鼠下 丘脑和血浆cAMP含量的影响,中国临床药理学与治疗学，2005，10 (12) 1354-1357.)。中医基础理论认为(张惠敏，郑守曾.气虚体质的研究进展.北京中医药大学 学报，2004，27(1) :14-16.)，精、气、血、津液是构成和维持人体生命活动的基本物质，气虚3则生血不足、气虚则血行不畅、气虚则津停，所以气虚往往与血虚、血瘀、痰湿相互兼夹，形成复杂的体质。明代的万全言“......如受肺之气为皮毛，肺气不足，则皮脆薄怯寒，毛发不生；受心之气为血脉，心气不足，则血不华色，面无光彩；受脾之气为肉，脾气补助，则肌 肉不生，手足如削；受肝之气为筋，肝气不足，则骨软。”还有研究表明，制作病证结合动物模 型是研究气虚发热症的重要途径(罗尧岳.气虚血瘀证动物模型的研究述评.湖南中 医学院学报，2004，24 (5) =57-58.)
技术实现思路
本专利技术的目的在于根据现有的气虚发热动物模型的研究较少，而气虚发热病症又 是临床常见病症之一，通过游泳劳损法加限食法，提供一种气虚发热动物模型。本专利技术另一目的在于提供上述气虚发热动物模型的制备方法。本专利技术还有一个目的在于提供上述气虚发热动物模型的应用。本专利技术上述目的通过以下技术方案予以实现一种气虚发热动物模型，该模型是采用游泳劳损法加限食法得到大鼠气虚发热模 型。本专利技术气虚发热动物模型的制备方法包括如下步骤将大鼠控制饮食并力竭游 泳，腹腔注射LPS。作为一种优选方案，上述制备方法中，所述控制饮食是将大鼠的喂食量降为常规 饮食量的1/2 1/3。作为一种优选方案，上述制备方法中，所述大鼠力竭游泳时，不能以尾撑在底部休 息，持续游泳到下沉，经10s后仍不能返回水面为止，每天游泳1 2次，持续3 4周。作为一种优选方案，上述制备方法中，所述大鼠力竭游泳时的水温为18 25°C。作为一种优选方案，上述制备方法中，所述腹腔注射LPS的量为60 lOOy g/kg， 最优选为80iig/kg。通过本专利技术的实验发现，气虚症的大鼠被毛稀疏易脱落、黯淡枯燥，实验后进行肺 病理学检查发现其肺组织中有少量炎性细胞，上皮细胞受损呈现纤毛倒伏、粘连；正常大鼠 支气管黏膜结构和肺组织结构清晰，无上皮坏死脱落、炎细胞浸润等病理改变，从而证实肺 与皮毛之间确实存在一定的依附关系。而且进行脾病理学切片也提示有形态学改变，从这 几点来看，可以初步判断本专利技术方法可以成功制作气虚发热大鼠模型。本专利技术气虚发热动物模型可用于气虚发热病症的中医临床辨证论治，还可为中医 治疗气虚发热病症的研究提供平台。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果本专利技术通过对大鼠控制饮食以及使其游泳劳损力竭，还有腹腔注射LPS，得到了 气虚发热动物模型。研究数据显示，本专利技术气虚发热动物模型的大鼠眼微睁无神，自主活 动少，对外界反应吃段，逃避、攻击行为明显减少；体温偏高，可高达39.4°C且热程较长；组 织病理学切片观察可知气虚发热模型的肺局部组织有炎性细胞浸润，部分出现组织结构模 糊，肺泡间隔变薄或断裂。因此本专利技术方法得到的大鼠气虚发热模型与现有的气虚发热模 型相比，气更不足，气虚症候更加明显，且通过LPS诱导的发热症状与传统中医学症候所致 发热相似，是较经典的发热模型，因此本专利技术大鼠气虚发热模型的气虚发热症状更显著，为中医治疗气虚发热病症提供了良好的研究平台。附图说明图1是正常组大鼠的行为学观察；图2是气虚组大鼠的行为学观察；图3是气虚发热组大鼠的行为学观察；图4是腹腔注射LPS后大鼠提问升高(AT)的影响(°C)图5是正常组大鼠肺脏的病理切片图6是气虚组大鼠肺脏的病理切片图7是气虚发热组大鼠肺脏的病理切片图8是正常组大鼠脾脏的病理切片图9是气虚组大鼠脾脏的病理切片图10是气虚发热组大鼠脾脏的病理切片图。具体实施例方式以下结合实施例来进一步解释本专利技术，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限定。实施例1气虚发热动物模型的制备1.实验动物SD大鼠，220 250g，SPF级，雌雄各半，广州中医药大学实验动物中 心提供。2.药品和试剂脂多糖 LPS(Escherichcacoliell-dotoxin 055 :B5，L2880)购于 Sigma公司；PGE2、cAMP放免药盒广本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种气虚发热动物模型，其特征在于是采用游泳劳损法加限食法得到大鼠气虚发热模型。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王晖，薛漫清，陈恳，唐晓峰，程阔菊，
申请(专利权)人：广东药学院，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]