【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及农业生物，具体涉及一种扩增小麦抗白粉病基因 pmxq-0508的分子标记引物及其应用。
技术介绍
1、小麦是重要的粮食作物之一，其高产和稳产对粮食安全尤为重要。由布氏白粉病菌侵染引起的小麦白粉病造成小麦减产，严重威胁小麦的安全生产。防治小麦白粉病的措施主要有化学药剂防治和抗病品种的选育和推广。相比传统的化学药剂防治，挖掘抗病基因进行高效的育种选择，在生产上广泛推广使用抗病品种，最为经济、有效和环保。
2、近年来，已有超过100个小麦抗白粉病基因或其等位基因被鉴定和分子定位，包括64个正式命名的基因。但这些抗病基因绝大多数都是小种专化抗性，容易随着生产上的大规模使用以及病原菌的进化而丧失抗性。因此，有必要不断寻找并定位新的白粉病抗性基因，并应用于小麦抗白粉病育种，以丰富小麦白粉病抗原。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种扩增小麦抗白粉病基因 pmxq-0508的分子标记引物及其应用，以利用引物扩增分子标记对小麦抗白粉病基因 pmxq-0508进行定位和检测，在小麦选育中对其亲本进行有目的地选择，为选育抗白粉病类型的小麦新品种提供指导依据。
2、本专利技术是通过以下方法实现的：一种扩增小麦抗白粉病基因 pmxq-0508的分子标记引物，该分子标记引物包括上游引物69-2b-025-f和
3、本专利技术提供的扩增小麦抗白粉病基因 pmxq-0508的分子标记引物在基因 pmxq- 0508的检测、鉴定及辅助鉴定小麦抗白粉病性状以及分子标记辅助育种中的应用。
4、本专利技术还提供了一种检测小麦品种中是否携带小麦抗白粉病基因 pmxq-0508的方法，包括以下步骤：
5、（1）提取待测小麦样品的基因组dna；
6、（2）利用分子标记引物对待测小麦样品的基因组dna进行pcr扩增，获得扩增产物；所述分子标记引物包括上游引物69-2b-025-f和下游引物69-2b-025-r；所述上游引物69-2b-025-f的核苷酸序列为5'-aacataaatgcgttcgacac-3'（ seq id no:1），所述下游引物69-2b-025-r的核苷酸序列为5'-ttaaagcattgcaccaaagg-3'（seq id no:2）；
7、（3）对所述扩增产物进行电泳、检测，若能扩增出156 bp的特异条带，说明待测小麦样品中携带抗白粉病基因 pmxq-0508；否则，待测小麦样品中不携带抗白粉病基因 pmxq- 0508。
8、本专利技术提供的方法中所述pcr扩增的体系为10 μl，包括：50 ng/μl小麦基因组dna1.0 μl，pcr mastermix 4 μl ，5 μm上游引物0.5 μl，5 μm下游引物0.5 μl，无菌去离子水4 μl。
9、本专利技术提供的方法中所述pcr扩增的程序为：94℃预变性3 min；94℃变性15 s，55℃退火15 s，延伸40 s，30个循环；72℃延伸10 min；4℃保存。
10、通过多年多点大田鉴定，小麦xq-0508对白粉病抗性表现良好，是优异的小麦抗白粉病种质资源。苗期白粉病抗性遗传分析及分子标记检测表明，小麦xq-0508苗期对白粉病流行菌株e09的抗性由单个隐性基因控制，命名为 pmxq-0508。利用全基因组均匀分布的118对分子标记对xq-0508、感病小麦品种sh3566及利用xq-0508×sh3566的f2:3群体中20个纯合抗病和20个纯合感病家系组成的抗病池和感病池进行多态性检测，9对标记在抗感亲本和抗感池中展现出一致的多态性，随后利用这些标记对138个xq-0508×sh3566的f2:3家系进行基因型分型，将基因 pmxq-0508初步定位于小麦2bs染色体26.35-29.59 mb的区间内。进一步根据中国春小麦参考基因组在该区间内的序列，利用primer5.0软件设计并筛选获得与基因 pmxq-0508紧密连锁的indel标记69-2b-025。本专利技术提供的小麦抗白粉病基因 pmxq-0508的分子标记69-2b-025经过遗传分离群体检测，与基因 pmxq-0508共分离，可以高效、准确地检测基因 pmxq-0508的遗传作图大群体，应用于基因 pmxq-0508的检测，鉴定及辅助鉴定小麦抗白粉病性状以及分子标记辅助选择育种。扩增小麦抗白粉病基因 pmxq-0508的分子标记引物应用于抗白粉病小麦育种中，不仅检测快速、精准，不受环境影响，选择目标明确，而且节约成本，大大提高了抗白粉病小麦品种或品系的选育效率。
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1.一种扩增小麦抗白粉病基因pmXQ-0508的分子标记引物，其特征在于，该分子标记引物包括上游引物69-2B-025-F和下游引物69-2B-025-R；所述上游引物69-2B-025-F的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述下游引物69-2B-025-R的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.一种权利要求1所述的扩增小麦抗白粉病基因pmXQ-0508的分子标记引物在基因pmXQ-0508的检测、鉴定及辅助鉴定小麦抗白粉病性状以及分子标记辅助育种中的应用。
3.一种检测小麦品种中是否携带小麦抗白粉病基因pmXQ-0508的方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的体系为10 μL，包括：50 ng/μL小麦基因组DNA 1.0 μL，PCR MasterMix 4 μL ，5 μM上游引物0.5 μL，5 μM下游引物0.5μL，无菌去离子水4 μL。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的程序为：94℃预变性3 min；94℃变性15 s，55
...【技术特征摘要】
1.一种扩增小麦抗白粉病基因pmxq-0508的分子标记引物，其特征在于，该分子标记引物包括上游引物69-2b-025-f和下游引物69-2b-025-r；所述上游引物69-2b-025-f的核苷酸序列如seq id no:1所示，所述下游引物69-2b-025-r的核苷酸序列如seq id no:2所示。
2.一种权利要求1所述的扩增小麦抗白粉病基因pmxq-0508的分子标记引物在基因pmxq-0508的检测、鉴定及辅助鉴定小麦抗白粉病性状以及分子标记辅助育种中的应用。
3.一种检测小麦品种中是否携带小...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙妮娜，矫岩林，刘伟，石德杨，刘洁，张焕春，马朋涛，靳玉丽，李佳桐，许晓哲，孙青鹏，李林志，
申请(专利权)人：山东省烟台市农业科学研究院山东省农业科学院烟台市分院，
类型：发明
国别省市：
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