【技术实现步骤摘要】
本申请涉及化学免疫学，尤其涉及一种抗relt重组单克隆抗体及其制备方法和应用。
技术介绍
1、relt(receptor expressed on lymphoid tissues)是一种分子量为43kda的膜受体蛋白，隶属于tnf受体超家族(tnf receptor superfamily,tnfrsf)，又被称作tnfrsf19l。relt胞外段含三个保守的富含半胱氨酸结构域，而胞内段缺乏死亡结构域，因此属于非死亡受体的范畴。与tnf受体超家族其他成员一样，relt以膜结合态和游离态两种形式存在，其中从膜结合态向游离态的转变以胞外段脱落(ectodomain shedding)的方式实现，在该过程中，relt胞外近膜部分第137位氨基酸可被剪切释放，成为可溶性的srelt(soluble relt)，这上述过程由基质金属蛋白酶(metalloprotease)和解整联素(disintegrin)家族成员adam17，adam9，adam10，adam19，mmp7，elastase，proteinase 3等介导完成。relt高表达于免疫细胞如t细胞、树突状细胞(dendritic cell，dc)中，且与免疫系统活化密切相关；另有现有研究发现肿瘤患者的血清游离可溶性relt(soluble relt,srelt)会显著增加，这提示relt可能是肿瘤的潜在早期诊断标志物，因此relt有望成为干预自身免疫病和肿瘤等免疫相关疾病的新靶点。
2、现阶段除relt外，其他所有的28种tnfrsf家族成员均已鉴定到与之相对
技术实现思路
1、本申请提供了一种抗relt重组单克隆抗体及其制备方法和应用，以解决现有技术中relt抗体所存在效价比低和特异性差的技术问题。
2、第一方面，本申请提供了一种抗relt重组单克隆抗体，所述单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区的氨基酸序列如seq id no.4所示；所述轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.5所示；
3、其中，所述单克隆抗体体具有中和relt功能的生物活性。
4、可选的，所述单克隆抗体是由特定抗原免疫淋巴细胞得到的，所述特定抗原的氨基酸序列如seq id no.1所示。
5、第二方面，本申请提供了一种编码基因，所述基因包括编码第一方面所述的单克隆抗体的基因组，所述基因组包括编码重链可变区的第一基因片段和编码轻链可变区的第二基因片段；
6、所述第一基因片段的核苷酸序列如seq id no.2所示，所述第二基因片段的核苷酸序列如seq id no.3所示。
7、第三方面，本申请提供了一种核酸分子，所述核酸分子包括第二方面所述的编码基因。
8、第四方面，本申请提供了一种重组表达载体，所述重组表达载体包括第三方面所述的核酸分子，所述重组表达载体包括重组质粒。
9、第五方面，本申请提供了一种制备第四方面所述的重组表达载体的制备方法，所述制备方法包括：
10、采用引物组对第三方面所述的核酸分子进行pcr扩增，得到扩增产物；
11、向表达载体上克隆所述扩增产物，得到重组表达载体；
12、其中，所述引物组包括重链可变区引物组和轻链可变区引物对。
13、第六方面，本申请提供了一种抗relt重组单克隆抗体的制备方法，所述制备方法包括：
14、采用第四方面所述的重组表达载体转染细胞，并进行培养，得到细胞培养液；
15、收集所述细胞培养液的上清液，并进行纯化，得到抗relt重组单克隆抗体。
16、第七方面，本申请提供了一种relt蛋白分子检测装置，所述检测装置的生物成分包括第一方面所述的单克隆抗体、第二方面所述的编码基因、第三方面所述的核酸分子和第四方面所述的重组表达载体中的至少一种，所述检测装置包括检测试剂盒、抗体芯片和抗体探针中的至少一种。
17、第八方面，本申请提供了一种抗relt重组单克隆抗体的应用，所述应用包括将第一方面所述的单克隆抗体用于制备对自身免疫性疾病的治疗药物中。
18、可选的，所述自身免疫性疾病包括1型糖尿病、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、干燥综合征、多发性硬化病、桥本氏甲状腺炎、原发性黏液性水肿、甲状腺功能亢进、自身免疫性溶血性贫血、溃疡性结肠炎、萎缩性胃炎和自身免疫性肾小球肾炎中的至少一种。
19、本申请实施例提供的上述技术方案与现有技术相比具有如下优点：
20、本申请实施例提供的一种抗relt重组单克隆抗体，由于重链可变区和轻链可变区中都含有与抗原特异性识别并与之结合的结合域，通过针对relt抗原的氨基酸序列进行优化和设计，并以此针对relt抗体的重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列分别进行设计，可以使得该抗relt重组单克隆抗体能够与relt蛋白分子的结合具有高特异性和高灵敏度，同时由于该抗relt重组单克隆抗体具有中和relt功能的生物活性，因此该抗relt重组单克隆抗体能够特异性地识别和检测不同组织及细胞上relt蛋白的表达，并在检测relt蛋白时呈阳性高表达，可以避免多杂带的缺陷，有利于提高检测或评估的准确性和可靠性。
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1.一种抗RELT重组单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示；
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体是由特定抗原免疫淋巴细胞得到的，所述特定抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.一种编码基因，其特征在于，所述基因包括编码如权利要求1或2所述的单克隆抗体的基因组，所述基因组包括编码重链可变区的第一基因片段和编码轻链可变区的第二基因片段；
4.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子包括如权利要求3所述的编码基因。
5.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包括如权利要求4所述的核酸分子，所述重组表达载体包括重组质粒。
6.一种制备如权利要求5所述的重组表达载体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
7.一种抗RELT重组单克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
8.一种RELT蛋白分子检测装置，其特征在
9.一种抗RELT重组单克隆抗体的应用，其特征在于，所述应用包括将如权利要求1或2所述的单克隆抗体用于制备对自身免疫性疾病的治疗药物中。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述自身免疫性疾病包括1型糖尿病、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、干燥综合征、多发性硬化病、桥本氏甲状腺炎、原发性黏液性水肿、甲状腺功能亢进、自身免疫性溶血性贫血、溃疡性结肠炎、萎缩性胃炎和自身免疫性肾小球肾炎中的至少一种。
...【技术特征摘要】
1.一种抗relt重组单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区的氨基酸序列如seq id no.4所示；所述轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.5所示；
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体是由特定抗原免疫淋巴细胞得到的，所述特定抗原的氨基酸序列如seq id no.1所示。
3.一种编码基因，其特征在于，所述基因包括编码如权利要求1或2所述的单克隆抗体的基因组，所述基因组包括编码重链可变区的第一基因片段和编码轻链可变区的第二基因片段；
4.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子包括如权利要求3所述的编码基因。
5.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包括如权利要求4所述的核酸分子，所述重组表达载体包括重组质粒。
6.一种制备如权利要求5所述的重组表达载体的制备方法，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：王从义，荣善杰，杨春良，骆佳卉，孙飞，
申请(专利权)人：华中科技大学同济医学院附属同济医院，
类型：发明
国别省市：
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