【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物，具体涉及栖异地克雷伯氏菌在降解苯甲酸类化合物中的应用。
技术介绍
1、化感作用(allelopathy)由德国科学家molish在1937年首次提出，1984年rice将其定义为植物(或微生物)向周围环境释放化学物质，进而影响邻近植物(或微生物)生长发育的化学生态学现象，是植物、微生物、土壤三者极其复杂的相互作用结果。自毒作用是植物化感作用的一种主要类型，指植物的化感物质释放到周围环境并对同种植物生长产生抑制作用。自毒作用普遍存在于大多数的植物中。自毒物质通过地上部淋溶、根系分泌和植株茬腐解等途径可以释放至土壤环境中。伴随着植物的生长发育进程，土壤中自毒物质不断积累，改变了根际周围微环境，使其不利于植物的生长。同时自毒物质还能够刺激根际病原菌生长，抑制有益微生物生长，导致根际微生物群落结构失衡，微生物多样性水平改变病原菌比例增加，土传病害发病加重。自毒物质在土壤中的积累是植物出现连作障碍的重要的原因之一。
2、前人的研究表明酚酸类、苷类、黄酮类化合物是主要的自毒物质。其中酚酸类物质是茶树、大豆、水稻、豇豆、花生、西瓜、甜瓜、玉米、辣椒、芦笋、西洋参、甘草、海棠、桃、杨树、三七、草莓、百合等多种植物的自毒物质的主要成分。酚酸类物质以带有活性羧基的苯环为分子骨架，苯环上多种取代基类型和取代位点构成了分子结构和性质的多样性，可以通过影响植物的膜系统、光合作用、酶活性、土壤微生物活性和土壤理化性质等，对植物生长发育产生毒害作用。目前已经报到的酚酸类自毒物质有邻苯二甲酸、肉桂酸、阿魏酸、水杨酸、丁香酸、3
3、缓解自毒作用的措施有抗性品种、轮作、套作、生物碳吸附以及利用有益微生物降解等。其中微生物降解具有经济、高效且无二次污染等特点，具有广泛的应用前景。目前，国内外关于降解3，4-二羟基苯甲酸的菌种的研究较少，目前被报道能够降解该污染物的菌种有恶臭假单胞菌、根瘤菌、不动杆菌。能够利用3，4二羟基苯甲酸为唯一碳源、氮源和能源生长。至今为止，未见伯克霍尔德氏菌属(burkholderia)对3，4二羟基苯甲酸的相关报道。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的上述问题，本专利技术所要解决的技术问题在于提供栖异地克雷伯氏菌(klebsiella variicola)在降解苯甲酸类化合物中的应用，该菌种是可以以3，4-二羟基苯甲酸为唯一碳氮源，对于土壤和水体中的3，4-二羟基苯甲酸污染均有较高的降解效率和浓度耐受限度。
2、为了解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案如下：
3、栖异地克雷伯氏菌在降解苯甲酸类化合物中的应用，将菌株与苯甲酸类化合物在培养基中混合培养，获得降解液：将所述降解液投入含有苯甲酸类化合物的土壤或水体中进行降解，菌株为栖异地克雷伯氏菌(klebsiella variicola)ly16。
4、栖异地克雷伯氏菌(klebsiella variicola)ly16，已保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院中国科学院微生物研究所，保藏日期为2023年1月28日，保藏编号为cgmcc 1.61611。
5、栖异地克雷伯氏菌(klebsiella variicola)ly16，是从福建省南平市武夷山市茶园土壤中筛选获得；筛选方法为：先对土壤或水体有害物质进行分析、分离，结合土壤或水体原有微生物群落结构与代谢通路分析，在分别选用适宜的培养基分离纯化出各菌种，转接到以苯甲酸类化合物为唯一碳源的msm培养基中，通过测定培养基中苯甲酸类化合物的含量变化筛选出上述菌株。
6、栖异地克雷伯氏菌(klebsiella variicola)ly16的生物学特征如表1所示。
7、栖异地克雷伯氏菌(klebsiella variicola)ly16的16s rdna序列在ncbi中进行blast比对，结果表明ly16的16srdna序列与burkholderia latens strain au17928isolate au17928 chromosome 1，complete sequence(登陆号：cp013435.1)同源性最高，达100％，结合形态、生理生化特征及16srdna序列分析，鉴定为栖异地克雷伯氏菌(klebsiella variicola)。
8、所述应用，苯甲酸类化合物为3.4-二羟基苯甲酸。
9、所述应用，降解温度为25～30℃，降解ph值为5～8，优选为6～8，进一步优选为7～8。
10、所述应用，培养基中3.4-二羟基苯甲酸的浓度为0.1～4g/l，优选为1～3.5g/l。
11、所述应用，培养基里加入葡萄糖或酵母提取物中的一种，葡萄糖或酵母提取物的浓度为0.5g/l。
12、上述栖异地克雷伯氏菌(klebsiella variicola)ly16在制备植物连作障碍生物菌剂中的应用。
13、所述应用，菌剂含有栖异地克雷伯氏菌(klebsiella variicola)ly16菌株作为活性成分。
14、相比于现有技术，本专利技术的有益效果为：
15、1.本专利技术提供的菌株能够利用3，4-二羟基苯甲酸作为唯一碳氮源和能源生长的细菌，可以快速有效的将3，4-二羟基苯甲酸降解，在去除环境中3，4-二羟基苯甲酸污染时能够达到快速脱毒的效果。
16、2.本专利技术提供的菌株对于苯甲酸类化合物的耐受上限值较高，最高能够降解5g/l的3，4-二羟基苯甲酸污染物，证明本专利技术菌株可以有效地修复污染较为严重的环境。
17、3.本专利技术对提供的菌株的生长及3，4-二羟基苯甲酸降解情况进行了优化，可以更有效、充分地对环境中的苯甲酸类化合物进行降解，解决污染问题。
18、4.本专利技术采用微生物方法降解环境中的污染物，具有高效、无二次污染、成本低的优点，尤其在对含有苯甲酸类污染物的治理上具有良好的应用前景。
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1.栖异地克雷伯氏菌在降解苯甲酸类化合物中的应用。
2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，将菌株与苯甲酸类化合物在培养基中混合培养，获得降解液：将所述降解液投入含有苯甲酸类化合物的土壤或水体中进行降解，菌株为栖异地克雷伯氏菌LY16。
3.根据权利要求1或2所述应用，其特征在于，苯甲酸类化合物为3，4-二羟基苯甲酸。
4.根据权利要求1或2所述应用，其特征在于，降解温度为25～30℃，降解pH值为5～8。
5.根据权利要求1或2所述应用，其特征在于，培养基中3.4-二羟基苯甲酸的浓度为0.1～4g/L。
6.根据权利要求1或2所述应用，其特征在于，培养基里加入葡萄糖或酵母提取物中的一种，葡萄糖或酵母提取物的浓度为0.5g/L。
7.栖异地克雷伯氏菌在制备植物连作障碍生物菌剂中的应用。
8.根据权利要求7所述应用，菌剂含有栖异地克雷伯氏菌LY16菌株作为活性成分。
【技术特征摘要】
1.栖异地克雷伯氏菌在降解苯甲酸类化合物中的应用。
2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，将菌株与苯甲酸类化合物在培养基中混合培养，获得降解液：将所述降解液投入含有苯甲酸类化合物的土壤或水体中进行降解，菌株为栖异地克雷伯氏菌ly16。
3.根据权利要求1或2所述应用，其特征在于，苯甲酸类化合物为3，4-二羟基苯甲酸。
4.根据权利要求1或2所述应用，其特征在于，降解温度为25～30℃，降解...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱笔通，杨新怡，田琳菏，叶欣怡，刘萱苹，贾小丽，
申请(专利权)人：武夷学院，
类型：发明
国别省市：
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