一种检测肺孢子菌特异性基因的方法及试剂盒技术

本发明专利技术属于基因检测技术领域，具体涉及一种检测肺孢子菌特异性基因的方法及试剂盒。本发明专利技术公开了一种检测肺孢子菌特异性基因的引物探针组合，所述肺孢子菌特异性基因为以Pj主要表面糖蛋白(Major surface glycoprotein,Msg)为靶基因，所述引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明专利技术的试剂盒检测准确率高，特异性强。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因检测，具体涉及一种检测肺孢子菌特异性基因的方法及试剂盒。

技术介绍

1、肺孢子菌(pneumocystis)为单细胞生物，长期以来被划归为原虫，称为卡氏肺孢子(囊)虫。1942年，jiroveci等人首次从肺炎患者的肺组织中分离到该病原体。1988年通过对其核糖体小亚基rrna的序列分析证实其属于真菌，更名为肺孢子菌。根据相关研究发现，感染人类与不同动物的肺孢子菌之间各不相同，感染人类的被命名为耶氏肺孢子菌(pneumocystis jiroveci，pj)，由肺孢子菌导致的疾病称为肺孢子菌病(pneumocystispneumonia)。

2、肺孢子菌肺炎感染的诊断面临很多困难，pcp缺乏特异性的临床症状，病原学检测是pcp确诊的唯一证据，但耶氏肺孢子菌不能进行体外培养，一般采取染色方法进行诊断，但所用的样本一般为肺组织或肺泡灌洗液(balf)，这就需要有创取材，很大程度上限制了该方法的应用；血清学检测假阳性率高，特异性低；也有通过分子生物学手段进行检测的方法，但其仅能检测是否为耶氏肺孢子菌感染，不能对耶氏肺孢子菌及其耐药性本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测肺孢子菌特异性基因的引物探针组合，所述肺孢子菌特异性基因为以Pj主要表面糖蛋白(Major surface glycoprotein,Msg)为靶基因，其特征在于，所述引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.根据权利要求1所述的检测肺孢子菌特异性基因的引物探针组合，其特征在于，还包括扩增并检测内标基因的引物对和探针，所述内标基因的引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，...

【技术特征摘要】

1.一种检测肺孢子菌特异性基因的引物探针组合，所述肺孢子菌特异性基因为以pj主要表面糖蛋白(major surface glycoprotein,msg)为靶基因，其特征在于，所述引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如seq id no.1所示，所述下游引物的核苷酸序列如seq id no.2所示，所述探针的核苷酸序列如seq id no.3所示。

2.根据权利要求1所述的检测肺孢子菌特异性基因的引物探针组合，其特征在于，还包括扩增并检测内标基因的引物对和探针，所述内标基因的引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如seq id no.4所示，所述下游引物的核苷酸序列如seq idno.5所示，所述探针的核苷酸序列如seq id no.6所示。

3.根据权利要求1或2所述的检测肺孢子菌特异性基因的引物探针组合，其特征在于，所述探针的核酸在5’端连接有荧光报告基团，在核酸的3’端连接有荧光淬灭基团，且两个探针的荧光报告基团不同；所述荧光报告基团选自fam、vic、rox、cy3和cy5中的任一种；所述荧光淬灭基团选自tamra、bhq1、bhq2和nfq中的任一种。

4.一种检测肺孢子菌特异性基因的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1-3中任一项所述的检测肺孢子菌特异性基因的引物探针组...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴文娟，郭建，钟霓，田文杰，倪剑锋，史俊颖，杨实，刘春燕，
申请(专利权)人：上海市东方医院同济大学附属东方医院，
类型：发明
国别省市：