【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
技术实现思路
【技术保护点】
1.一种在受控的单一培养器皿中扩增特异于一种或多种抗原的淋巴细胞群的方法，所述方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述条件培养基是这样的培养基，在所述培养基中监测并且如果需要的话调整以下参数中的至少一种参数：pH、溶解氧(DO)浓度、葡萄糖浓度、乳酸盐浓度和/或温度。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述条件培养基是这样的培养基，在所述培养基中监测并且如果需要的话调整pH、溶解氧(DO)浓度、葡萄糖浓度、乳酸盐浓度和温度。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，所述方法包括将所述培养体积调整至所述淋巴细胞的扩增率的步骤。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述培养体积在所述淋巴细胞的扩增期间增加了至少2倍、3倍、4倍、5倍或6倍。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，所述方法包括用所述条件培养基动态培养所述淋巴细胞的步骤。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述组织样品来源于肿瘤，特别地其中所述组织样品是肿瘤样品。
8.根据权利要求7所述的方法，其中所述肿
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述淋巴细胞包括肿瘤浸润淋巴细胞，特别地其中所述肿瘤浸润淋巴细胞是T细胞。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中将所述一种或多种抗原以肽的形式添加至所述培养基中。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述肽以0.1μg/ml至10μg/ml的浓度添加到所述培养基中。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述培养步骤包括将所述淋巴细胞与抗原呈递细胞(APC)共培养的步骤。
13.根据权利要求12所述的方法，其中所述抗原呈递细胞(APC)经工程化以呈递一种或多种抗原。
14.根据权利要求12或13所述的方法，其中所述抗原呈递细胞(APC)包括B细胞或者是B细胞。
15.根据权利要求14所述的方法，其中所述B细胞是通过单采血液成分法获得的。
16.根据权利要求14或15所述的方法，其中所述B细胞在添加至所述淋巴细胞之前被激活。
17.根据权利要求16所述的方法，其中所述B细胞用IL-4和/或CD40L激活。
18.根据权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述抗原呈递细胞(APC)经遗传工程化以表达一种或多种转基因。
19.根据权利要求18所述的方法，其中所述遗传工程化的APC已经通过用编码所述一种或多种转基因的核酸转染所述APC获得。
20.根据权利要求18或19所述的方法，其中所述一种或多种转基因中的至少一种转基因编码免疫调节剂。
21.根据权利要求20所述的方法，其中所述免疫调节剂选自由以下组成的组：OX40L、4-1BBL、CD80、CD86、CD83、CD70、CD40L、GITR-L、CD127L、CD30L(CD153)、LIGHT、BTLA、ICOS-L(CD275)、SLAM(CD150)、CD662L、白介素-12、白介素-7、白介素-15、白介素-17、白介素-21、白介素-4、Bcl6、BCLXL、BCL-2、MCL1、STAT-5，以及一种或多种信号传导通路(例如JAK/STAT通路、Akt/PKB信号传导通路、BCR信号传导通路和/或BAFF/BAFFR信号传导通路)的激活物。
22.根据权利要求20或21所述的方法，其中所述免疫调节剂是OX40L、4-1BB和/或白介素12中的一者或多者。
23.根据权利要求7至22中任一项所述的方法，其中在所述培养步骤之前已经在包含所述淋巴细胞的肿瘤样品中确认了所述一种或多种抗原中的至少一种抗原的存在。
24.根据权利要求7至23中任一项所述的方法，其中所述一种或多种抗原中的至少一种抗原是新抗原，并且其中已在所述培养步骤之前在包含所述淋巴细胞的所述肿瘤样品中确认所述新抗原的所述存在。
25.根据权利要求23或24所述的方法，其中在所述肿瘤样品中确认所述一种或多种抗原中的至少一种抗原的所述存在包括对已经从所述肿瘤样品获得的基因组DNA进行测序的步骤。
26.根据权利要求1至25中任一项所述的方法，其中所述方法包括在培养期间激活所述淋巴细胞的步骤。
27.根据权利要求26所述的方法，其中所述激活步骤包括将CD3激动剂添加至所述培养基中。
28.根据权利要求27所述的方法，其中在1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天或12天后将...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种在受控的单一培养器皿中扩增特异于一种或多种抗原的淋巴细胞群的方法，所述方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述条件培养基是这样的培养基，在所述培养基中监测并且如果需要的话调整以下参数中的至少一种参数：ph、溶解氧(do)浓度、葡萄糖浓度、乳酸盐浓度和/或温度。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述条件培养基是这样的培养基，在所述培养基中监测并且如果需要的话调整ph、溶解氧(do)浓度、葡萄糖浓度、乳酸盐浓度和温度。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，所述方法包括将所述培养体积调整至所述淋巴细胞的扩增率的步骤。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述培养体积在所述淋巴细胞的扩增期间增加了至少2倍、3倍、4倍、5倍或6倍。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，所述方法包括用所述条件培养基动态培养所述淋巴细胞的步骤。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述组织样品来源于肿瘤，特别地其中所述组织样品是肿瘤样品。
8.根据权利要求7所述的方法，其中所述肿瘤包含至少一种新抗原。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述淋巴细胞包括肿瘤浸润淋巴细胞，特别地其中所述肿瘤浸润淋巴细胞是t细胞。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中将所述一种或多种抗原以肽的形式添加至所述培养基中。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述肽以0.1μg/ml至10μg/ml的浓度添加到所述培养基中。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述培养步骤包括将所述淋巴细胞与抗原呈递细胞(apc)共培养的步骤。
13.根据权利要求12所述的方法，其中所述抗原呈递细胞(apc)经工程化以呈递一种或多种抗原。
14.根据权利要求12或13所述的方法，其中所述抗原呈递细胞(apc)包括b细胞或者是b细胞。
15.根据权利要求14所述的方法，其中所述b细胞是通过单采血液成分法获得的。
16.根据权利要求14或15所述的方法，其中所述b细胞在添加至所述淋巴细胞之前被激活。
17.根据权利要求16所述的方法，其中所述b细胞用il-4和/或cd40l激活。
18.根据权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述抗原呈递细胞(apc)经遗传工程化以表达一种或多种转基因。
19.根据权利要求18所述的方法，其中所述遗传工程化的apc已经通过用编码所述一种或多种转基因的核酸转染所述apc获得。
20.根据权利要求18或19所述的方法，其中所述一种或多种转基因中的至少一种转基因编码免疫调节剂。
21.根据权利要求20所述的方法，其中所述免疫调节剂选自由以下组成的组：ox40l、4-1bbl、cd80、cd86、cd83、cd70、cd40l、gitr-l、cd127l、cd30l(cd153)、light、btla、icos-l(cd275)、slam(cd150)、cd662l、白介素-12、白介素-7、白介素-15、白介素-17、白介素-21、白介素-4、bcl6、bclxl、bcl-2、mcl1、stat-5，以及一种或多种信号传导通路(例如jak/stat通路、akt/pkb信号传导通路、bcr信号传导通路和/或baff/baffr信号传导通路)的激活物。
22.根据权利要求20或21所述的方法，其中所述免疫调节剂是ox40l、4-1bb和/或白介素12中的一者或多者。
23.根据权利要求7至22中任一项所述的方法，其中在所述培养步骤之前已经在包含所述淋巴细胞的肿瘤样品中确认了所述一种或多种抗原中的至少一种抗原的存在。
24.根据权利要求7至23中任一项所述的方法，其中所述一种或多种抗原中的至少一种抗原是新抗原，并且其中已在所述培养步骤之前在包含所述淋巴细胞的所述肿瘤样品中确认所述新...
【专利技术属性】
技术研发人员：乔治·库科斯，亚历山大·哈拉里，西蒙·施泰纳，佛罗伦萨·萨蒙，
申请(专利权)人：泰根制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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