【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药，尤其涉及一种能够促进t细胞增值的甘草多糖制备工艺。
技术介绍
1、目前已知的一些能够促进t细胞增值的甘草多糖制备工艺包括：超声辅助提取，使用超声波技术辅助提取甘草多糖，可以提高提取效率和速度。超声波能够破坏细胞结构，促进甘草多糖的释放。酶解法，采用特定的酶（如纤维素酶、蛋白酶等）对甘草进行酶解，使甘草多糖从细胞壁中释放出来。酶解法可以提高甘草多糖的提取率和纯度。离子交换法，使用离子交换树脂进行甘草多糖的纯化。离子交换树脂可以根据甘草多糖与树脂的亲和性选择性地吸附和洗脱目标产物，从而实现纯化。凝胶过滤色谱法，利用凝胶过滤色谱技术（如sephadex g-100等）对甘草多糖进行分离和纯化。凝胶过滤色谱法可以根据甘草多糖的分子大小和形态进行分离，得到目标产物。超滤法，通过使用合适的分子量截留膜对甘草多糖进行超滤，去除较小分子的杂质，从而提高甘草多糖的纯度。
2、离子交换法是一种常用的分离和纯化技术，广泛应用于生物制药、食品工业、环境分析等领域。它基于离子交换树脂对物质中的离子或分子的吸附和洗脱作用，实现了目标物质的选择性分离和纯化。离子交换树脂是一种具有固定离子基团的多孔聚合物材料。它可以在水溶液中与带电离子或具有离子性的分子发生相互作用。离子交换法的工作过程如下：将待处理的混合溶液通过装有离子交换树脂的柱子或床层，目标离子或分子会与离子交换树脂上的离子基团发生吸附作用。洗脱，通过改变溶液的性质，例如通过调整溶液的ph值、离子强度或使用特定的洗脱剂，可以破坏目标物质与离子交换树脂的吸附作用，使其从树脂
3、但是，离子交换法在实际应用中需要考虑离子交换树脂的选择、操作条件的优化以及洗脱产物的后续处理等因素，以达到预期的纯化效果。
4、中国专利技术授权专利cn109988795b公开了一种甘草多糖的分离纯化工艺，包括以下步骤：(1)将甘草切成片；(2)将甘草片加水浸泡；(3)弃掉浸泡液，再加入甘草片重量2~4倍的水，重复提取2~4次，减压浓缩；(4)加体积分数92~97％乙醇，静置4~12h，离心，过滤，干燥得到初提取物；向初提取物中加体积分数92~97％乙醇浸泡2~6h，离心，过滤，干燥，重复2~4次，得到甘草多糖。该专利技术甘草多糖的分离纯化工艺，对甘草进行冷冻，并进行超声酶解，破坏甘草的细胞壁以利于甘草多糖的浸出，再经发酵工艺，后续分离纯化，提取工艺简单易行，甘草多糖的得率与含量较高，得到甘草多糖的活性较高，蛋白质残余率低，甘草多糖的纯度高，具有调节机体免疫功能、抗疲劳的作用。但是该专利技术甘草多糖的分离纯化工艺对蛋白质脱除率和多糖保留率均存在不足。
技术实现思路
1、有鉴于现有技术中甘草多糖的分离纯化工艺中蛋白质脱除率和多糖保留率低的缺点，本专利技术所要解决的技术问题是提供一种蛋白质脱除率和多糖保留率高的能够促进t细胞增值的甘草多糖制备工艺。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术采用了如下的技术方案：
3、一种能够促进t细胞增值的甘草多糖制备工艺如下，以重量份计：
4、z1、称取4~6份甘草多糖沉淀，加水配制为甘草多糖溶液，加热煮沸5~15min溶解，加入1~3wt%活性炭，继续煮沸5~15min，以吸附色素，先离心，取上清液，再离心，收集上清液，上清液用改性吸附树脂进行柱层析纯化，收集流出液，用100~300目滤布过滤，得到脱色和脱蛋白的甘草多糖溶液；
5、z2、将步骤z1制备的甘草多糖溶液加至deae-52阴离子交换纤维素柱床中，用超纯水洗脱甘草多糖，收集洗脱液，绘制deae-52阴离子交换纤维素洗脱曲线，收集洗脱峰，得到甘草多糖洗脱溶液；采用中空纤维膜除去甘草多糖洗脱溶液中的小分子杂质，得到除去小分子杂质的甘草多糖溶液；将除去小分子杂质的甘草多糖溶液旋蒸浓缩至1~3mg/ml，加至sephadex g-100葡聚糖凝胶柱床中，以超纯水洗脱，收集洗脱液，绘制sephadex g-100葡聚糖凝胶柱洗脱曲线，收集吸收峰，冷冻干燥后得到能够促进t细胞增值的甘草多糖。
6、优选的，所述步骤z1中加水配制为8~12mg/ml甘草多糖溶液。
7、优选的，所述步骤z1中先3000~5000rpm离心10~30min，取上清液，再10000~12000rpm离心10~20min。
8、优选的，所述步骤z1中柱层析纯化参数为采用径高比为1：5~20，流速为1~3bv/h，进行动态吸附10~30min。
9、所述甘草多糖沉淀的制备方法如下，以重量份计：
10、步骤1、称取8~12份甘草粉，加入水，于30~40℃超声，过滤后收集滤液和滤渣；
11、步骤2、将步骤1中的滤渣加入水，在沸水浴中回流1~3h，然后过滤，收集滤液，并与步骤1中所得滤液合并，然后离心分离，取上层清液；
12、步骤3、将步骤2制备的上层清液浓缩至1/5~1/10，然后加入3~5倍体积的无水乙醇，密封后放入-1~-10℃静置20~30h，析出甘草多糖沉淀。
13、优选的，所述步骤1和步骤2中均按1：20~30的质量比例加入水。
14、优选的，所述步骤1中超声时间为40~60min，超声功率为200~400w、超声频率为20~60khz。
15、所述改性吸附树脂的制备方法如下：
16、将氨基树脂与乙二醛搅拌混合，再加入氰基磷酸二乙酯在80~120℃下加热20~40min，得到螯合树脂；加入环烷酸铜、水和大孔吸附树脂，置于振动台上，在25~40℃下振荡，过滤，收集固体，并用水冲洗，得到改性吸附树脂。
17、优选的，所述改性吸附树脂的制备方法如下，以重量份计：
18、将18~22份氨基树脂与8~12份乙二醛以100~300rpm搅拌混合1~3h，再加入2~4份氰基磷酸二乙酯在80~120℃下加热20~40min，得到螯合树脂；加入10~20份环烷酸铜、500~700份水和30~50份大孔吸附树脂，置于振动台上，在25~40℃下200~300rpm振荡0.5~2h，用50~300目布过滤，收集固体，并用水冲洗，得到改性吸附树脂。
19、甘草多糖是从甘草根部提取得到的一类多糖类化合物。甘草是一种传统草药，在中医药中被广泛应用，并且在许多国家的食品和药品中也有重要的地位。甘草多糖具有多种生物活性和药理作用，其中包括免疫调节作用、抗炎作用、抗氧化作用、抗肿瘤作用。此外，甘草多糖还具有抗溃疡、抗病毒、抗过敏、降血糖等多种药理作用。
20、本专利技术通过添加改性吸附树脂，可以有效吸附和去除甘草多糖溶液中的蛋白质，改性吸附树脂具有特定的表面性质和亲和力，可以选择性地吸附蛋白质分子，从而提高蛋白质的脱除率。这有助于净化甘草多糖溶液，去除其中的蛋白质杂质，提高甘草多糖的纯度。改性吸附树脂还具有良好的多糖保留性能。在制备甘草多糖溶液的过程中，改本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种能够促进T细胞增值的甘草多糖制备工艺，其特征在于，工艺如下，以重量份计：
2.如权利要求1所述的一种能够促进T细胞增值的甘草多糖制备工艺，其特征在于，所述步骤Z1中加水配制为8~12mg/mL甘草多糖溶液。
3.如权利要求1所述的一种能够促进T细胞增值的甘草多糖制备工艺，其特征在于，所述步骤Z1中先3000~5000rpm离心10~30min，取上清液，再10000~12000rpm离心10~20min。
4.如权利要求1所述的一种能够促进T细胞增值的甘草多糖制备工艺，其特征在于，所述步骤Z1中柱层析纯化参数为采用径高比为1：5~20，流速为1~3BV/h，进行动态吸附10~30min。
5.如权利要求1所述的一种能够促进T细胞增值的甘草多糖制备工艺，其特征在于，所述甘草多糖沉淀的制备方法如下，以重量份计：
6.如权利要求5所述的一种能够促进T细胞增值的甘草多糖制备工艺，其特征在于，所述步骤1和步骤2中均按1：20~30的质量比例加入水。
7.如权利要求5所述的一种能够促进T细胞增值的甘草多糖制备工艺
8.如权利要求1所述的一种能够促进T细胞增值的甘草多糖制备工艺，其特征在于，所述改性吸附树脂的制备方法如下，以重量份计：
9.一种能够促进T细胞增值的甘草多糖，其特征在于，采用如权利要求1~8任一项所述的制备工艺制备而成。
...【技术特征摘要】
1.一种能够促进t细胞增值的甘草多糖制备工艺，其特征在于，工艺如下，以重量份计：
2.如权利要求1所述的一种能够促进t细胞增值的甘草多糖制备工艺，其特征在于，所述步骤z1中加水配制为8~12mg/ml甘草多糖溶液。
3.如权利要求1所述的一种能够促进t细胞增值的甘草多糖制备工艺，其特征在于，所述步骤z1中先3000~5000rpm离心10~30min，取上清液，再10000~12000rpm离心10~20min。
4.如权利要求1所述的一种能够促进t细胞增值的甘草多糖制备工艺，其特征在于，所述步骤z1中柱层析纯化参数为采用径高比为1：5~20，流速为1~3bv/h，进行动态吸附10~30min。
5.如权利要求1所述的一...
【专利技术属性】
技术研发人员：宋飞，肖学凤，
申请(专利权)人：康奇天津生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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